病理诊断中HE染色的不足与改进研究

　　摘    要：　目的 分析病理诊断中HE染色技术的应用价值。方法 选取2015年6月—2018年2月于我院接受病理学检测的60例患者作为研究对象, 所有患者均行病理诊断, 总结HE染色中存在的不足, 并采取针对性改进措施进行完善, 分析其染色诊断结果。结果 改进后染色诊断准确率明显高于改进前 (P<0.05) 。结论 科学掌握HE染色技术可提高病理切片质量, 有利于提高病理诊断准确性。

　　关键词：　病理诊断; HE染色技术; 切片质量; 诊断准确率;

　　病理诊断是通过观察器官大体改变、镜下观察组织结果和细胞病变特征作出的疾病诊断, 较之根据病史、症状、体征作出的分析性诊断和利用影像设备所作的诊断更具科学性和准确性, 可作为疾病诊断的金标准。HE染色为石蜡切片技术中常用染色方法, 是组织学、胚胎学、病理学教学及科研中最基本且使用最广泛的技术, 其染色结果直接影响病理诊断结果, 本次研究主要分析其应用效果。

　　1、 资料与方法

　　1.1、 临床资料

　　选取2015年6月—2018年2月于我院病理科行病理诊断的60例患者, 所有患者均行病理切片检查, 对比染色技术改进前后的诊断结果。其切片种类有:骨髓组织切片15例、脂肪组织切片14例、胃镜活检切片21例、胆囊切片10例。

　　1.2、 研究方法

　　标本固定后取材 (病变部位、病变部位与正常组织交界处) , 所取组织多形状规则、薄软一致 (1.5×1.5×0.2 cm) , 骨组织取材应在充分脱钙后进行, 用大头针轻刺骨组织穿刺即可, 取材切片切勿挤压, 以免细胞组织受压变形;组织包埋与切片碎组织应包埋于同一平面, 包埋时用热镊子将预制好的蜡块表面融化, 待表面初凝后用平滑金属板轻压使其平整, 保证切片完整, 捞片前于载玻片上涂抹50%蛋白甘油防止脱片, 切片于烤箱内 (65℃) 烘烤30 min。改进前常规HE染色, 加二甲苯 (15 min) 脱水后予以乙醇 (100%乙醇5 min、80%乙醇5 min) 、蒸馏水 (5 min) 之后加苏木精液染色 (5 min) , 水洗10 min或用流水冲洗5 min, 之后加入1%盐酸乙醇 (30 s) , 水洗30 s, 蒸馏水过洗5 s, 加0.5%伊红液染色1 min～3 min, 蒸馏水、80%乙醇稍洗后中性树胶封固。

　　改进后HE染色:根据不同病理组织选择适宜的脱水和染色方法、固定时间, 染色过程中根据切片组织的厚度、大小及标本特点调整操作步骤, 保证细胞核呈蓝色, 细胞质、肌纤维、胶原纤维和红细胞呈深浅不一红色, 切记HE染色后需彻底脱水透明方可用中性树胶封盖。运用显微镜检查染色情况。

　　1.3、 观察指标

　　比较不同病理切片染色诊断结果。

　　1.4、 统计学方法

　　使用SPSS20.0统计学软件处理数据, 计数资料采用χ2检验, P<0.05为差异有统计学意义。

　　2、 结果

　　改进后不同切片类型染色诊断准确率高于改进前, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。见表1。

　　表1 2组病理组织切片染色诊断准确率比较

　　3、 讨论

　　病理诊断是指运用多种医疗设备及检查方法检查人体器官、组织和细胞病理改变的一种病理形态学诊断方法, 被广泛应用于临床医疗及科研工作中。上世纪90年代病理检查工作已进入到组化、免疫组化、分子生物学及癌基因检查中, 随着医疗卫生事业的进步, 自然科学的发展完善, 新仪器设备及技术的引入, 可为疾病确诊、治疗、疗效及预后判断提供参考。HE染色作为病理检查的重要步骤, 可通过观察细胞组织着色情况分析其病理变化和生活周期, 如多数细胞新生期胞浆伊红着色较淡或呈轻微嗜碱性, 衰老期或退行性病变期染色较浓, 胶原纤维在老化或出现透明变性时其染色由浅变深, 染色结果直接影响后续诊断。郑菲[1]指出常规病理技术HE染色方面尚存不足, 影响制片质量及病理诊断准确率, 研究中选取11 800例标本进行分析, 发现染色技术改进前胃肠、子宫、肝胆、胃镜活检、脂肪组织、骨、子宫内膜等染色结果均低于技术改进后;董星杏[2]则在研究中指出病理检查虽为临床诊断金标准, 但其诊断结果准确与否受制于HE染色技术, 染色效果越佳、切片质量越高, 其诊断准确率越高。本次研究选取60例患者进行病理检测, 分别对比HE染色技术调整前后的诊断结果, 发现染色技术改进后诊断准确率高于改进前, 差异有统计学意义 (P<0.05) 。

　　HE染色即苏木精-伊红染色法, 是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的染色方法, 也是石蜡切片技术中常用染色方法。因苏木精染液呈碱性, 在进行涂片染色时可使细胞核内染色质和胞质内核糖体显紫蓝色, 而伊红是酸性染料, 可使细胞质和细胞外基质显红色。临床研究发现细胞着色情况与细胞种类相关, 同时也会随生活周期和生理变化而改变, 郑样贞[3]在研究中提出HE染色虽具有极高的普适性, 且诊断结果确切;但在实际应用中常因染色不当影响切片质量和病理诊断准确性。总之, 科学统筹病理诊断过程, 准确把握检查细节, 严格按照规定操作, 便于顺利开展组织学检查, 科学诊断疾病, 准确鉴定病变组织、发病原因、发病机制及病程。应谨遵国家卫生计生委制定的病理诊断中心基本标准和管理规范进行操作, 合理应用免疫组化、分子生物学、特殊染色及电子显微镜等技术, 结合患者临床表现给予科学的病理诊断, 切实提高病理诊断准确率, 为医疗工作的正常开展奠定基础, 更好地为患者服务。

　　参考文献

　　[1]郑菲, 陈培琼, 王玉环.HE染色在临床病理诊断中的应用研究[J].中外医疗, 2016, 35 (30) :552-553.
　　[2]董星杏.病理技术HE染色在病理诊断中的应用探讨[J].世界最新医学信息文摘, 2016, 16 (34) :43-44.
　　[3]郑样贞.分析HE染色技术在病理诊断中的应用[J].中国社区医师, 2016, 32 (17) :109.