引言
胎生蜥蜴( Lacerta vivipara) 是蜥蜴科卵胎生动物的典型代表,在我国分布于黑龙江、内蒙古和新疆等地. 在国外分布较广泛,从欧洲乌拉山远端的英格兰和爱尔兰,往东通过西伯利亚到远离东海岸的库页岛等广大地区. 作为一个广泛分布的物种,胎生蜥蜴在染色体组型、性别决定机制上存在一定的地理变异. 通过对内蒙古地区胎生蜥蜴种群染色体组型的研究,可以与大、小兴安岭地区胎生蜥蜴种群的染色体组型进行比较[1,2],为胎生蜥蜴的起源和物种演化提供参考.
1 材料与方法
2013 年 5 月,在内蒙古的呼伦贝尔地区采集胎生蜥蜴雌雄各 5 只,采用骨髓细胞蒸汽固定法制备染色体标本. 具体操作方法为: 将胎生蜥蜴断指放血,2 h 后腹腔处注射 0. 05% 秋水仙素 0. 12 mL,12 h 后处死,取出肱骨和股骨,剔除上面的肌肉,横断两端骨骺. 用 0. 46% KCl 溶液将骨髓细胞冲到载玻片上,将载玻片放到玻璃皿中的玻璃棒上低渗处理 30 min. 吸出低渗液后加入固定液( 无水乙醇: 冰醋酸: 双蒸水 =1∶2∶3) 固定 2 h,换无水乙醇进行二次固定 30 min,再用无水乙醇: 冰醋酸 =1∶2 冲洗. 待自然干燥后,用吉姆萨染液进行染色 30 min,自来水冲洗干净后,风干装片.使用 Leica DC 500 显微镜油镜进行观察、统计染色体数目,选取其中 20 个较好的中期分裂相进行照相. 观察雌雄各 120 个分散良好、边缘清晰且较平整的中期细胞分裂相,确定二倍体染色体数目. 用 Leica QwinV3 软件对染色体进行测量,计算出相对长度和臂比值.
2 结果
如图1、如图2 所示,雄性胎生蜥蜴二倍体染色体个数是 36,性染色体为 ZZ 型,2n =34 + ZZ.雌性染色体中存在异型的性染色体,二倍体染色体个数为 35,性染色体为 W 型,2n = 34 + W. 除雌性 W 性染色体为亚端部着丝点( ST) 外,全部染色体均为顶端着丝点( T) ,所以很难根据着丝点位置区分染色体.根据胎生蜥蜴染色体形态与大小,17 对常染色体可分成 2 组,第 1 组包括第 1 ~ 4 对染色体( 9% > 相对长度 >7%) ,其中第 1 对染色体相对长度明显大于第 2 对染色体( F = 18. 80,P <0. 05) ,容易区分,第 2 ~ 4 对染色体相对长度差也较大,大于 0. 4%,较易于辨别; 第 2 组包括第5 ~ 17 对染色体( 相对长度 < 7% ) ,第 5 ~ 9 对染色体相对长度在 5% ~ 7%,第 10 ~ 13 对染色体的相对长度在 4% ~ 5% 之间,第 14 ~ 17 对染色体的相对长度在 3% ~4%之间. Z 染色体的相对长度为 5. 47 ±0. 08%,在第8 对与第9 对常染色体相对长度之间,W 染色体相对长度为 5. 40 ±0. 26% ,臂比值为 5. 47,为亚端部着丝,在第 8 对与第 9 对常染色体相对长度之间( 见表 1) .【表1.图1-2】
3 讨论
胎生蜥蜴分布比较广泛,具有卵生与卵胎生两种生殖模式,对其染色体组型的研究比较早,且不同地理种群中具有一定的染色体变异. 内蒙古地区胎生蜥蜴种群染色体数目为雄性 2n =36,雌性 2n =35,W 染色体为亚端着丝染色体,与乌克兰跨喀尔巴阡山脉种群、匈牙利东部种群、俄罗斯部分地区种群、爱沙尼亚种群、芬兰东部种群、瑞典北部种群相似,但 W染色体类型不同,例如保加利亚种群的 W 染色体为亚中着丝点、阿尔卑斯山种群 W 染色体为中部着丝点,此外,染色体的数目也存在一定的变化,例如斯洛维尼亚的种群发现染色体个数为雄性 2n =36,雌性 2n =36,性别决定机制为ZZ /ZW,这种同一物种不同种群的染色体数目的地理变异是物种进化的结果,与新物种的形成有关.研究结果表明,内蒙古地区地处大兴安岭的西坡,胎生蜥蜴种群的 W 染色体类型为亚端部着丝点,不同于大兴安岭东坡的呼玛种群 W性染色体的中部着丝,而与小兴安岭地区的种群一致,这三个种群 W 染色体类型的变化对讨论胎生蜥蜴的起源和进化具有重要意义.
参 考 文 献
[1] 朱丹,赵文阁,刘鹏,等. 大兴安岭产胎生蜥蜴的染色体组型研究[J]. 中国农学通报,2011,27( 22) : 75 -77.
[2] 赵文阁,夏玉国,刘琳琳,等. 黑龙江省产胎生蜥蜴的染色体组型研究[J]. 四川动物,2006,25( 2) : 234 -237.