念珠菌阴道炎的病原学特性及发病机制研究

　　外阴阴道念珠菌病(Vulvocaginal Candidiasis。VVC)是由念珠菌感染引起的女性外阴阴道炎症性疾病，是常见的妇女外阴阴道炎症之一，75%的妇女一生中会有1次发病，约5%～8%的患者可反复发作。复发性外阴阴道念珠菌病(recurrent vulvovag-inal candidasis，RVVC)是指妇女患VVC后，经过治疗真菌学检查阴性，临床症状和体征消失后，又出现症状，且真菌学检查阳性或1年内发作4次或以上者。

　　严重损害妇女的身心健康。因此，研究念珠菌阴道炎的病原学特性及发病机制，对指导该病的预防和治疗有重要意义。

　　1、材料与方法

　　1.1病例来源所有的标本来自本院2009年6月－20013年8月间门诊拟诊为念珠菌病患者，年龄(17～59)岁，平均年龄33.76岁。病例选择标准参照中华妇产科学分会感染性疾病协作组关于阴道念珠菌病诊治规范(草案)的评分标准。①患者具有典型的临床症状外阴瘙痒和/或刺激症状(烧灼、干燥、尿痛等);②查体可见外阴阴道肿胀、红斑、分泌物增多呈豆渣样或有异常;③患者非妊娠期及哺乳期;④血尿常规、肝肾功能、血糖均正常;⑤两个月以上未口服或外用过抗真菌类药物。治疗后随访4次。近期随访于停药后第(5～7)天，后期随访于停药后第30、60及90天。本病经治疗临床症状及体征消失，连续3个月经周期未检出阴道念珠菌后症状重现，镜检(+)，则属复发。

　　1.2培养基与试剂沙保弱培养基由法国梅里埃公司生产;科玛嘉念珠菌显色培养基购自郑州博赛科技有限公司;酵母菌鉴定试剂条及改良真菌药敏购自丹麦ROSO公司。

　　1.3菌种分离及鉴定患者扩阴后用无菌棉拭子经窥阴器进入阴道，取阴道后穹窿分泌物，直接镜检可见大量孢子或假菌丝。将标本接种于在沙保弱培养基(SDA)，置37℃孵育(48～72)h，对生长的酵母样真菌取菌落接种于科玛嘉念珠菌显色培养基(郑州博赛科技有限公司);37℃48h观察颜色，判读结果。科码嘉鉴定无法确定的再用API－20CAUX鉴定。(送至福建省立医院检验科帮助鉴定)。

　　1.4药敏试验使用L1940P改良真菌药敏培养基平板;配制接种液取酵母菌先配0.5麦氏浊度，再用生理盐水1∶1稀释;将平板先置35℃干燥(20～30)min，吸0.5ml接种液倾注9cm药敏平板，涂布均匀，吸走多余液体。然后35℃干燥10min，贴丹麦ROSCO抗真菌药敏片，分别为制霉菌素、特比奈芬、伊曲康唑、氟康唑、置35℃(18～24)h后测抑菌圈，判读结果。标准质控菌株为白色念珠菌ATCC64548。

　　2、结果

　　2.1阴道念珠菌病病原真菌检查情况门诊阴道炎患者中，符合外阴阴道念珠菌感染标准的约占30%。取临床症状典型580例，直接镜检阳性478例，阳性率82.41%，真菌培养阳性332例，阳性率69.45%。共分离念珠菌339株，培养结果发现合并两种以上念珠菌感染8人。

　　2.2合并其他疾病及性病感染情况332例阴道念珠菌病患者中，单纯阴道念珠菌病例263例(81.67%)，合并皮肤病24例(7.2%)，包括外阴接触性皮炎、外阴湿疹、外阴神经性皮炎。合并性病31例(9.34%)，包括艾滋病、梅毒、非淋菌性尿道(宫颈)炎，合并其他基础病4例(1.2%)，包括类风湿性关节炎、红斑狼疮。322例中有9对是夫妻(其中9例是真菌性龟头炎)。其中18例是复发性念珠菌病。见图1。

　　2.3菌种分布特点478例外阴阴道念珠菌病，真菌培养阳性332例，阳性率为69.45%。共分离念珠菌339株，分离出念珠菌6种，其中白色念珠菌288株占85%，光滑念珠菌23株占6.8%，热带念珠菌12株占3.54%，克柔念珠菌7株占2%，近平滑念珠菌4株占1.18%，光滑假丝酵母4株占1.18%，酿酒酵母菌1株占0.29%。研究结果表明白色念珠菌检出率明显高于非白念珠菌，本研究结果与国内外报道相一致。详见表1。

　　2.4药敏试验结果体外药敏显示399株念珠菌对制霉菌素、伊曲康唑、氟康唑、特比奈芬的耐药分别为2.0%、8.5%、5.3%、26.25%。从药敏结果看特比奈芬的耐药最高，其次伊曲康唑、氟康唑、制霉菌素的耐药率最低。详见表2。

　　3、讨论

　　从临床症状体征看外阴阴道念珠菌病病因复杂，是常见的外阴阴道炎症，发病率很高，且治疗后极易复发，阴道内环境的改变是引起念珠菌致病先决条件之一，而导致阴道菌群失调及微生态失衡引起念珠菌增殖的因素有很多，本次研究332例平均年龄33.76岁，可见VVC一般见于生育年龄妇女，由于青年女性青春期后外分泌旺盛，雌激素水平高，加之局部皮肤潮湿温暖导致微生态环境的变化适合念珠菌的生长，故女性激素的分泌与VVC的发病有一定的内在联系;有报道VVC病人中有45%重复感染，有15%诊断为复发性外阴阴道念珠菌病。本次研究332例中有11例，复发率为3.31%比报道的低，可能与我们选择病例为初次诊断VVC后按药敏实验结果给予规范治疗，定期随访并且要求配偶共同治疗有关。332例中合并皮肤病24例(7.2%)，笔者分析患者外阴瘙痒是由于外阴阴道念珠菌病引起但患者一直未到医院检查自行买药涂出现的接触性皮炎、部分患者长期反复搔抓外阴皮肤肥厚。

　　近年来性传播疾病逐年增加，广谱抗生素的广泛应用及滥用造成阴道内环境紊乱菌群失调;由于不洁性交或配偶包皮过长等原因使VVC的发病率升高，夫妻未共同治疗可造成RVVC的升高。本实验中9对夫妇均否认不洁性交史但男方都存在包皮过长。

　　本研究对332例外阴阴道念珠菌病标本进行菌种培养鉴定，可以反映福州及周边地区外阴阴道念珠菌病的致病菌以白色念珠菌为主占85%，非白念珠菌以光滑念珠菌，热带念珠菌为主。本研究结果与国内外有关资料报道相一致，笔者研究发现RVVC主要致病念珠菌为白色念珠菌(7例);其次为光滑念珠菌(4例)，同时笔者还发现光滑假丝酵母菌4例，酿酒酵母菌1例。

　　念珠菌耐药菌株的出现给临床工作带来不少难题，本研究发现绝大多数念珠菌属对伊曲康唑和氟康唑敏感，检出339株菌菌株中有白念珠菌288株中3株对4种药敏耐药、11株对3种耐药、22株对2种耐药、52株对一种(特比奈芬)耐药。光滑念珠菌23株中4株3种药敏耐药、2株对一种(氟康唑)耐药，与国内研究相似，热带念珠菌12株中其中一株对4种耐药、2株2种耐药、4株对特比奈芬耐药。近平滑念珠菌4株中其中一株2种药耐药(制霉菌素、特比奈芬)、一株一种药耐药(特比奈芬)。克柔念珠菌2株对2种菌耐药(伊曲康唑、特比奈芬)、2株对一种药耐药(伊曲康唑)。酿酒酵母菌对4种药均敏感。笔者认为以上可能二者存在交叉耐药性。本研究发现对特比奈芬的耐药率最高，由此可见对于常规疗程治疗无效的病例应考虑耐药菌株的出现。

　　从而必须做有针对性的检查为患者提供准确的治疗并做好健康教育，更好的治疗与预防该病。

　　参考文献:
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　　［2］乐杰.妇产科学［M］.第5版.北京:人民卫生出版社，2002.286－287.
　　［3］徐海萍，王桂芝.外阴阴道念珠菌病的致病菌群分析［J］.中华皮肤科杂志，2013，46(2):128.