分析化学论文
1 引 言
三脂肪酸甘油酯（ 甘油三酯） 由 1 个甘油分子与 3 个脂肪酸分子结合成酯而成，是食用油的主要成分。根据碳链的长度以及不饱和度，脂肪酸的种类可高达 800 余种。动物及植物油脂主要集中在含有0 ~ 3 个双键的 C8~ C26的直链脂肪酸，同时由于结合位置的不固定，导致了甘油三酯的种类相较脂肪酸更趋向于复杂多样[1].但常见动物油和植物油中主要存在的仅是含有 C16和 C18的甘油三酯，如脂肪酸为棕榈酸（ C16∶ 0,P） 、硬脂酸（ C18∶ 0,S） 、油酸（ C18∶ 1,O） 、亚油酸（ C18∶ 2,L） 、亚麻酸（ C18∶ 3,Ln） 的甘油三酯。其它脂肪酸的甘油三酯含量普遍较低。
目前，在世界范围内广泛存在着食用油掺杂的问题，在中国尤以地沟油掺杂问题备受关注[2 ~4],甘油三酯作为食用油的主要成分，对其进行分离分析是一个值得关注的研究方向。高效液相色谱-质谱联用技术（ LC-MS） 在分离分析甘油三酯方面具有独特的优势，不同的液相色谱柱可以对甘油三酯形成不同程度的分离，高灵敏质谱检测器为分离后的定性识别与定量分析提供了重要条件。目前，用于分析甘油三酯的质谱离子源有 ESI 与 APCI 两种离子源。ESI 源适用于检测中等极性以及强极性的化合物，在使用 ESI 源时可利用多级质谱通过将甘油三酯分子打碎后得到的子离子峰，获得对甘油三酯更好的定性分析结果[5,6].通常使用 ESI 源时需要在流动相中加入盐类才会有好的离子化效果[7 ~9].APCI 源适用于弱极性化合物的检测，甘油三酯在 APCI 源中主要形成 3 种类型的碎片离子： 酰基离子（ RCO）+、单酰基甘油离子（ M + H - RCOOH - RCO）+和二酰基甘油离子（ M + H - RCOOH）+,根据这些碎片离子峰的特征，可以确定甘油三酯的结构[10 ~13].
本实验使用串联长柱建立了超高效液相色谱-质谱联用（ UPLC-MS） 分析食用油中甘油三酯组成的方法。与普通的 HPLC 分离相比，本方法可以简便地对食用油中的甘油三酯实现更精细的分离分析，从而可根据不同食用油之间甘油三酯的精细差异，区分常见食用油，并可检测掺入少量猪油的大豆油。
2 实验部分
2. 1 仪器与试剂
LCMS 2020 型超高效液相色谱仪（ 日本 岛津公司） ,包括脱气机、两个 LC-30AD 泵、CTO-30A 柱温箱、SIL-30AC 自动进样器、SPD-M20A 二极管阵列检测器及使用 APCI 源的质谱检测器。数据分析软件采用 LabSolution software （ version 5. 53） .三油酸甘油三酯、乙腈（ HPLC 级） 、异丙醇（ HPLC 级） 均购自国药集团化学试剂有限公司。食用油样品除猪油为自制外，其它均购自本地超市。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 样品及其准备 （ 1） 液体样品 移取 10 μL 样品溶于 1000 μL 异丙醇中，浓度为 1% （ V /V） ,直接进样。（ 2） 固体样品 称取 0. 5 g 溶解于 50 mL 正己烷中，浓度为 1%（ w/V） ,直接进样。
2. 2. 2 色谱与质谱条件 液相色谱条件： Thermo Syncronis C18色谱柱（ 100 mm ×2. 1 mm,1. 7 μm） 与两根月旭 Ultimate UHPLC XB-C18（ 150 mm ×2. 1 mm,1. 8 μm） 色谱柱串联。流速为 0. 2 mL/min,流动相为乙腈-异丙醇（ 50∶ 50,V/V） 等度洗脱。进样量为 1 μL.质谱条件： APCI 电离源，正离子电离模式，质荷比（ m/z） 范围300 ~1050,雾化气流速2. 5 L/min,干燥气流速 5 L/min,APCI 温度 250℃，DL 温度 250℃，Heat 温度 200℃，检测器电压 1. 05 kV.