分析化学论文
知母饮片来源于百合科植物知母 Anemarrhenaasphodeloides Bge.的干燥根茎。知母性味苦、甘、寒，归肺、胃、肾经，能清热泻火、滋阴润燥。现代研究表明，知母具有抗菌、解热、利胆等方面的药理作用。
指标成分芒果苷（mangiferin），又名芒果素、知母宁，是从百合科植物知母中提取的天然多酚类化合物，分子式：C19H18O11,分子量：422.2010版中国药典规定，知母饮片含芒果苷不得少于0.5%[1].芒果苷具有多方面的药理作用，如能明显的兴奋中枢神经系统、能增强心肌收缩力[2]、还能抗病毒[3]、抗肿瘤[4]等。
河北易县是知母的道地产地，因品质优良、疗效好而被称为“西陵知母”.由于野生资源无法满足市场需求，知母现已在中国北方大规模人工栽培，特别是河北和安徽两省产量很大。本实验通过对不同产地和采收期的知母饮片进行检测，从而为知母饮片的筛选提供依据。
1 仪器与试药。
1.1 仪器：高效液相色谱仪：Agilent 1100 型；检测器：UV（VWD）；色谱工作站：Agilent.
1.2 药品与试剂：芒果苷对照品采购自中检院，批号为111607-200402;流动相乙腈为色谱级，其余试剂均为分析纯。
1.3 实验材料：市售知母饮片均采购自安徽贺林中药饮片公司。经台州市食品药品检验所鉴定为均符合《中国药典》2010年版一部规定。
2 实验方法和结果。
2.1 色谱条件及系统适应性试验：色谱柱：WatersHPLC C18柱（4.6﹡250mm,5μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（18:82）；流速：1.0ml/min;柱温：25℃；进样量：10μl;检测波长：258nm.在上述色谱条件下，理论塔板数按芒果苷峰计算，应不低于6000.对照品和典型样品图谱见图1、图2.
2.2 对照品溶液的制备：取芒果苷对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml含50μg的溶液。
2.3 供试品溶液的制备：取知母饮片粉末（过3号筛）约0.1g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml,称定重量，超声处理（功率400W,频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀。滤过，取续滤液，即得。
2.4 标准曲线：精密吸取对照品溶液 1μl、3μl、5μl、7μl、10μl、13μl分别进样，以对照品进样量Y（μg）为纵坐标，峰面积积分值x为横坐标，得直线回归方程为：Y=0.0003x+0.0011,r=0.9991,在0.05~0.65μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验：精密吸取上述对照品溶液各10μl,连续进样6次，芒果苷峰面积的平均积分值为1700.3,RSD为1.2%（n=6）。
2.6 重现性试验：取同一批次的饮片粉末精密称定，按2.1项、2.3项测定6次，饮片芒果苷平均含量为1.28%,RSD为0.9%.
2.7 稳定性试验：取上述对照品溶液室温放置，分别在0、12、24、36、60、72h测定，峰面积的RSD为1.12%,表明对照品溶液在72h内稳定。
2.8 加样回收率：精密称取饮片粉末6份，各加入一定量的对照品，按2.1、2.3项下操作，由回归方程计算样品中各对照品的量，芒果苷平均回收率为99.38%.
3 讨论。
本法参考药典用高效液相色谱法测定知母饮片中芒果苷的含量，比较了多种比例的流动相包括乙腈-水、甲醇-水、乙腈-冰醋酸水溶液、乙腈-磷酸水溶液、甲醇-磷酸水溶液的分离效果，结果以乙腈-磷酸水溶液（18:82）的分离效果为优，分离度较好，保留时间适中，无干扰杂峰。市售知母饮片由于产地的不同，芒果苷含量变化很大。知母传统道地产地为河北省易县，近年来在全国各地进行了大规模引种。河北安国和安徽亳州是目前种植规模最大的两个主要产地。从芒果苷含量检测结果看，安徽和河北样品均明显好于其它省份，安徽亳州所产饮片与河北安国和易县所产饮片没有明显差别。这也说明，安徽和河北仍然为知母饮片的最重要产地。
传统的知母采收期一般为3年。而从表3可以看出，芒果苷含量随种植年份加长有明显的下降，说明知母饮片以1年生采收为宜，这与传统的认识有很大的出入。由于收集到的样品量较少，如综合考虑药材产量及其它指标性成分等因素，对采收时间还需进行更深入的研究。
4 参考文献
[1] 国家药典委员会。中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010:198
[2] 余胜民，钟鸣。 芒果苷药理研究进展[J].中国中医药科技，1999,6（3）：F00
[3] Zheng M S,Lu Z Y,Antiviral effect of mangiferinand iso-mangiferin on herpes simplex virus[J]. ChinMed J （Engl），1990,103（2）：160.
[4] Guha S,Ghosal S,Chattopadhyay U.Antitumor,immu-nomodulatory and anti- HIV effect of mangiferin,anaturally occurring glucosylxanthone[J].Chemothera-py,1996,42（6）：443.