百草枯致肺纤维化中Wnt/β-catenin信号通路的调控作用(2)

　　2 结 果。
　　
　　2.1 肺组织病理检测 与对照组大鼠肺组织相比，百草枯中毒组大鼠肺组织肿胀，存在出血点，颜色变暗，外观不光整，存在疤痕。HE 染色结果显示，百草枯中毒 14 d 后，肺组织发生纤维化，肺泡结构遭到破坏，纤维结缔组织增多，肺泡壁增厚。百草枯中毒 28 d 后，肺泡上皮结构紊乱，肺泡腔面积缩小，肺间质逐步被纤维结缔组织所替代，肺泡壁进一步增厚，肺组织发生弥漫性肺纤维化。马松染色结果表明，与对照组大鼠肺组织相比，百草枯中毒 14 d 后，大鼠肺组织细胞外基质增多，肺泡壁明显增厚，胶原蛋白（ 染色为蓝色） 沉积，百草枯中毒28 d 后，胶原蛋白沉积更加明显，弥漫范围更广，肺泡壁显着增厚，证明百草枯导致肺纤维化发生发展。见图 1.
　　 　　
　　2.2 Western blot 检测大鼠肺组织中 β-catenin 的表达水平 与对照组比较，百草枯中毒后 14 d,大鼠肺组织内 β-catenin 蛋白表达水平升高[（ 0.38±0.04） vs （ 0. 67 ± 0. 06 ） ,P < 0. 01 ],中 毒 28 d,β-catenin的表达水平（ 1.05±0.08） 亦明显升高（ P<0.01） .见图 2.
　　 　　
　　2.3 免疫荧光和 Western blot 检测 HBE 细胞中β-catenin的表达水平 免疫荧光结果显示，与空白对照组比较，百草枯组 HBE 细胞中 β-catenin 蛋白表达水平升高，而抑制剂组表达降低。Western blot检测表明，与百草枯组 β-catenin 表达水平（ 0.75±0.06） 比 较，空白对照组 （ 0. 26 ± 0. 03 ） 、抑制剂组（ 0.41±0.04） 表达下降（ P<0.01） .见图 3.
　　 　　
　　2.4 qRT-PCR 检测 HBE 细胞 EMT 标记的 mRNA表达情况 与空白对照组比较，百草枯组 HBE 细胞中 E-cadherin、Occludin 的 mRNA 表达水平显着降低（ P<0.01） ,α-SMA、Vimentin 的 mRNA 表达水平显着上升（ P<0.01） ,而抑制剂组 HBE 中 E-cadherin、Occludin、α-SMA、Vimentin 的 mRNA 表达水平差异无统计学意义（ P>0.05） .与百草枯组比较，抑制剂组 HBE 中 E-cadherin、Occludin 的 mRNA 表达水平显着上升（ P<0.01） ,而 α-SMA、Vimentin 的 mRNA表达水平显着降低（ P<0.01） .见图 4.