无症状高尿酸血症对大鼠的血压及肾脏的影响

　　随着人民生活水平的提高和饮食结构的改善，特别是富含蛋白质和嘌呤食物摄入的增加，高尿酸血症（ Hyperuricemia,HUA） 的发病率逐年上升，日益受到研究者的关注。长期以来，无症状高尿酸血症病人无不适感，认为高尿酸血症对人体没有伤害； 迄今为止，在临床指南中它都不是降尿酸治疗的指征。有证据表明高尿酸血症与高血压及肾脏病变密切相关[1,4],但无症状高尿酸血症是否引起高血压及肾脏病变少见报道。本研究观察无症状高尿酸血症对大鼠的血压及肾脏的影响，为临床无症状高尿酸血症提供参考数据。

　　1 材 料

　　1. 1 主要仪器与试剂： BP -6: 无创伤血压测量系统（ 成都泰盟科技有限公司） ; BL-420 生物机能实验系统（ 成都泰盟科技有限公司） ; 全自动生化分析仪（ 日立 7180） ; FT-630G 放免仪（ 北京核仪器厂） .氧嗪酸钾（ 上海金穗生物科技有限公司，批号 JS14824） ; 羧甲基纤维素钠（ 北京冰达生物有限公司） ; 聚丙烯吡咯烷酮（ 北京化学试剂公司） ; 尿酸试剂盒（ 北京北化康泰临床试剂有限公司） ; 尿 β2- MG 放射免疫分析药盒（ 北京原子高科股份有限公司） .

　　1. 2 实验动物： 健康雄性 SD 大鼠（ 20 只） ,体重（ 200±10） g（ 购于北京大学医学部实验动物中心） ,分笼市售颗粒饲料饲养，自由饮水。

　　2 方 法

　　2. 1 高尿酸血症模型的建立： 动物随机分成两组，每组10 只，高尿酸血症组以250mg·kg-1·d-1氧嗪酸钾腹腔注射造模[1,2],对照组腹腔注射相同剂量 0. 8% 羧甲基纤维素钠乳剂，连续给药 8 周。在大鼠在模型建立的第 0、2、4、6、8 周末，腹腔注射 2h 后经内眦采集不抗凝血 0. 5mL,自然凝血后提取血清，采用尿酸酶法测量血尿酸水平。

　　2. 2 大鼠动脉血压测量： 给药后第 0、2、4、6、8 周末采用 BP-6 无创血压测量系统检测大鼠尾动脉收缩压，比较两组间差别。

　　2. 3 大鼠给药 6 周后 24h 尿 ALB 和 β2-MG 含量测定： 给药 8 周后，将每只大鼠分别置于代谢笼中禁食不禁水，收集 24h 尿液，用全自动生化分析仪进行尿蛋白（ albumin,ALB） 定量，放射免疫法测定尿 β2微球蛋白（β2-microglobulin,β2-MG） .

　　2. 4 统计学方法： 实验数据采用均数±标准差（ x珋 ±s）表示，通过 SPSS11. 5 统计软件包进行统计学处理，组间多样本均数比较采用单因素方差分析。所有检验以P <0. 05 为有显著性差异。

　　3 结 果

　　3. 1 血尿酸水平的变化： 对照组尿酸水平在实验期间虽有小的波动，但整体保持在一个比较稳定的水平。与对照组比较，高尿酸血症组大鼠从给药的第二周开始尿酸水平显著升高（ P<0. 01） ,随给药的延长，血清尿酸水平维持在较高的水平上，但增加变化不明显。在造模给药的期间中血尿酸水平比较稳定地保持在正常水平的 2 ~3 左右，见表 1.

　　3. 2 血压变化： 正常对照组大鼠的尾动脉收缩压在 0~ 8 周时无明显变化，高尿酸血症组大鼠血液随给药时间的延长逐渐升高，在给药第 6 周期血压升高有统计学差异（ P<0. 05） ,在实验结束的第 8 周血压非常显著地升高（ P<0. 01） .结果见表 2.

　　3. 3 给药 8 周后 24hALB 及尿 β2-MG 变化： 与对照相比，高尿酸血症组给药8 周后大鼠的 ALB 和 β2-MG均显著升高（ P<0. 01） ,结果见表 3.

　　4 讨 论

　　尿酸是嘌呤分解代谢的终产物，在一系列酶的参与下经过复杂的过程产生。体内尿酸异常是人体疾病的反映，通常指体内血尿酸值增高，称高尿酸血症。一般认为采用尿酸酶法测定血清中尿酸值，男性 >416μmoL / L（ 7mg / dL） ,女性 > 357μmoL / L （ 6mg / dL） ,具有诊断价值，并把无痛风症状发作的高尿酸血症称为无症状高尿酸血症[3].本实验中对大鼠腹腔注射250mg·kg-1·d-1的氧嗪酸钾，抑制了尿酸酶，减少了尿酸在大鼠体内的分解，尿酸水平逐渐上升，在第 4 周时达到最高水平，之后大鼠适应性自保护，体内尿酸酶分解尿酸的能力增强，血尿酸水平有所下降但仍保持在正常水平的 2 ~3 倍，关节及肾内无尿酸盐结晶，为无症状高尿酸血症的尿酸水平[4].实验发现，当大鼠处于高血尿酸水平下，大鼠的血压也随之升高。高尿酸血症所致的高血压与尿酸盐的结晶无关，其机制可能为尿酸诱导的肾素-血管紧张素-醛固酮系统的激活[4].醛固酮增多会引起肾远曲小管和集合管重吸收钠、水增多，血容量增加； 血管紧张素分泌的增多，收缩血管导致血管张力及外周阻力升高，持续增高引起血管硬化，形成高血压。肾脏既是血压的重要调节器官，也是高血压损伤的靶器官之一。ALB 和 β2- MG含量的增高是反应高血压早期肾损害的重要指标。

　　ALB 是反映肾小球功能的主要指标，正常情况下肾小球滤过膜存在电荷选择性屏障，绝大部分 ALB 不能通过滤过膜，当尿 ALB 含量升高时，就标志着肾小球滤过膜电荷选择性屏障损伤。β2-MG 是低分子蛋白，主要有人体淋巴细胞产生，由肾小球自由滤过，绝大部分在近端小管被重吸收，故尿中含量极微，尿 β2-MG 是测定肾小球滤过率和近端肾小管重吸收功能的敏感指标。模型组在给药 8 周后尿 ALB、β2-MG 明显升高，说明肾小球滤过和肾小管重吸收功能已有损伤。因此无症状高尿酸血症应引起临床重视，但其所致的高血压和肾脏损伤是尿酸的直接作用还是间接相互作用，有待于进一步研究。

　　参考文献：

　　[1] Yamada H,Kotaki H,Furitsu H,et al. Mechanism of theuricosuric action of the anti -inflammatory drug E3040 usedto treat inflammatory bowel disease I: study using a rat mod-el of hyperuricemia[J]. Biopharm Drug Dispos,1999,20: 77~ 83.

　　[2] 王颜刚，陆付耳，吴燕群。 复方中药降尿酸合剂干预高尿酸血症大鼠血尿酸水平的剂量依赖[J]. 中国临床康复，2006,10（ 19） : 105 ~ 109.

　　[3] 无症状高尿酸血症合并心血管疾病诊治建议中国专家共识[J]. 中国全科医学，2010,13（ 11） :1145 ~1149.