文献求助
求助主题影响血小板计数的因素
需求说明主要是想找一些外界因素，如时间，温度等
求助时间2021-01-15 11:47
第一篇：血细胞分析仪测定血小板计数影响因素分析
作者：周莉 陈军政
作者单位：湖北省直属机关医院
摘要：目的 探讨在血细胞分析仪中血小板计数 （PLT） 的影响因素。方法 采用Ac.T 5diff血细胞分析仪和手工计数法， 测定40例健康体检者的静脉血和末梢血的血小板数量。结果 用仪器法在不同时间测静脉血的血小板计数差异有统计学意义 （P<0.01） , 在不同温度环境下测血小板数有差异 （P<0.05） .结论 EDTA-K2抗凝静脉血和末梢血都可检测血小板数量， 但需要注意测定时间范围、环境温度是否混合均匀等问题。当血小板直方图异常时， 应采取手工计数和推片观察来予以纠正。
关键词：血细胞分析仪 血小板计数 血小板直方图
目前血细胞分析仪在各级医院广泛应用， 具有检测简便、快速、重复性好、精度高的特点。但血细胞分析仪受自身检测原理的限制， 其检测的结果受很多因素的影响， 特别是血小板计数 （PLT） 是临床反映较多的问题， 为此作者探讨了几种影响血小板计数结果的常见因素及纠正方法。
1 资料和方法
1.1 一般资料 本院体检中心健康体检者40例；男23例， 女17例， 年龄在0.5~80岁。
1.2 仪器与试剂 仪器Ac.T 5diff血细胞分析仪及配套试剂和质控品 （美国BECKMAN-COLUTE公司生产） ;OLYMPUS显微镜 （日本） ;血细胞计数板 （上海） .
1.3 方法 静脉抽血2 mL, 用EDTA-K2抗凝管， 末梢采血 120 μL用EDTA-K2 （0.15 mg） 抗凝。仪器法按仪器操作说明操作， 手工计数法按WHO推荐[1], 手工每份计数3次取平均值。
1.4 统计学处理 所有结果均用x?±s表示， 各组资料的比较采用t检验。
2 结果
2.1 40份静脉血分别在即刻、10min、1 h、2 h、4 h、8 h用仪器和手工两种方法测定， 其结果见表1.
表1 不同时间和方法测定血小板计数的结果 （×109/L,x-±s）
2.2 静脉血标本和末梢血标本用仪器在2h内测定血小板数结果见表2.
表2 静脉血和末梢血测定结果 （×109/L,x-±s）
2.3 对40份静脉血标本在日常工作温度和放置水浴37℃， 10 min后再测血小板数， 结果见表3.
表3 水浴前后测定结果 （×109/L,x-±s）
3 讨 论
3.1EDTA在抑制PLT的黏附和聚集的同时， 会使PLT形态由双凹形态变为球形， 体积再增大约20%, 取完标本立即上机测试， 血小板计数会偏低， 如果放置10 min后， 血小板计数便达到稳定， 从表1可看出放置10 min至4 h内， 其PLT结果无显着性差异， 但随放置时间越长， 血小板数逐渐减少， 8 h后出现显着减少 （P<0.01） .当工作气温低于25 ℃时， 冷凝集引起的PLT分布不均， 会出现显着性减少 （P<0.05） , 此时应水浴保温37 ℃充分混匀， 必要时推片镜检。
3.2 血小板体积小、无色、易黏附， 当血液自血管破损处流出时， 血小板一经与破损的血管内皮细胞及组织成分接触， 立即以极快的速度黏附于破损的血管壁， 而且采集的血标本还要与不光滑的抗凝管表面接触， 此时PLT黏附在其内壁并发生聚集[2].因此， 无论用何种方法采血， 所数得的血小板数， 均较血中实际血小板数为低， 末梢采血比静脉采血更低， 本文实验结果表明 （见表2） , 静脉采血与末梢采血比较差异无统计学意义 （P>0.05） , 但末梢采血影响因素很多， 如扎针的深浅， 取血的快慢， 及挤压手指混进组织液， 这些都会影响PLT的结果， 有条件的都应取静脉血作血细胞分析， 对有些基层单位和小孩患者难以做到静脉抽血， 必须要末梢采血时， 应深扎3 mm左右， 让血自然流出， 确保结果的准确性。
3.3 采用EDTA-K2抗凝的标本， 血小板的体积不稳定， 血小板的体积随标本的保存时间和保存温度而变化。根据Ac.T 5diff仪器分析原理， 通常血小板计数阈在2~25 fL, 3~18 fL是血小板的准确计数阈， 18~25 fL是血小板的漂移阈 （可能有干扰） , 只要血小板直方图分布在18 fL以内， 血细胞分析仪所测的血小板结果与临床基本吻合。当血小板体积超过25 fL时， 依照仪器计数的原理， 使许多大血小板被当作小细胞而未计人血小板的计数范围， 让血小板计数结果偏低。因此在出现血小板计数和直方图异常， 以及小红细胞病症的标本时， 应及时人工计数， 并推片观察， 是否有血小板聚集团块和“血小板卫星现象”.
3.4 血细胞分析仪， 无论是阻抗法还是光散法， 对于血小板数及形态正常的标本， 结果一般比较可靠， 但对于血小板明显减少或/和形态异常者， 所得结果误差甚大， 因在病理情况下， 血中会出现一些大小近似血小板的所谓“非血小板颗粒”, 如小红细胞、红细胞碎片、白细胞片、细菌和真菌以及免疫复合物等， 会被当作血小板加以计数， 从而使血小板数假性增多。目前已报道准确计数血小板的方法大体上有两类[3]:一类是免疫学方法， 即用荧光标记的抗血小板抗体， 特异地着染血小板， 在流式细胞仪 （FCM） 或特定的血小板分析仪上计数血小板。二是用二维激光散射测定法， 将血小板与“非血小板颗粒”分开， 达到准确计数。但这二种方法都需特殊试剂和昂贵仪器， 难以在常规工作中普遍推广。对于普通仪器计数血小板出现偏低 （<50×109/L） , 血小板直方图出现异常， 以及对于确诊血小板数量或/和形态异常的患者标本， 目前大多数采用手工计数来复查。由于手工计数其本身不但精密度较差， 而且在镜下也往往难以准确辨别血小板与某些“非血小板颗粒”, 准确性也不够高， Kunicka等[4]提出增加一项在血涂片上间接计数血小板的方法作为补充。该法是用抗凝血液推一血片， 经瑞氏染色后， 在厚薄适中处计数1 000个红细胞并同时计数所见到的血小板， 求得血小板/红细胞之比值， 再将此比值×红细胞数， 求得血小板数， 此法虽不十分精确， 但对于电阻法的仪器或人工法计数血小板， 特别对不正常血小板数或/和形态异常的标本， 还是相对准确的， 同时还能观察血小板的大小、形态、有无聚集及聚集体大小等等， 是一种简单易行的方法。除加强质量控制， 还需积极加强与临床医生的联系， 消除血小板计数结果不真实引起的误诊或漏诊， 这对提高检验结果的准确性， 更好地服务临床有很重要的作用。
血细胞自动计数仪的引进和使用， 促进了血液学检验技术的发展， 平时只要注意影响血小板计数减少的相关因素， 做到正确使用和分析， 必要时进行涂片和直接计数， 以确保计数结果的准确性， 从而更好地服务于临床。
参考文献
[1]叶应妩， 王毓三， 申子瑜。全国临床检验操作规程[M].3版。南京：东南大学出版社， 2006:136-137.
[2]马雨东。血细胞分析仪测定血小板时抗凝剂等影响因素分析[J].检验医学与临床， 2010, 7 （11） :1078-1080.
[3]刘景香， 刘云生。影响血小板计数因素分析[J].中国实用医药， 2009, 4 （8） :226.
[4]Kunicka JE, Fisher G, Murphy J, et al.Improved piatelet CountingUsing two-dimensional lass light scatter[J].Am J clin pathol, 2000, 114 （2） :283-289.
原文引用：周莉，陈军政.血细胞分析仪测定血小板计数影响因素分析[J].国际检验医学杂志，2013,34（14）：1877-1878.
第二篇：血液分析仪测定血小板计数的影响因素研究
作者：杨健
作者单位：成都军区峨眉疗养院检验科
摘要：目的 分析血液分析仪测定血小板计数的相关影响因素， 排除假性降低以及假性增高情况以后得到的准确血小板计数水平。方法 选取2011年1月-2012年12月我院收治的300例患者， 均采用XE-1000i全自动血细胞分析仪测定， 对不在血液分析仪阈值范围内的标本改行手工复检测定。结果 300例患者标本根据血小板计数分为患者A、患者B、患者C, 每组各100例， 仪器法组与手工法组的差异随血小板计数的减少而逐渐增大， 差异有统计学意义 （P<0.05） ;仪器法组与手工法组血标本放置的时间不同血小板计数比较差异有统计学意义 （P<0.05） .结论 对于血液分析仪测定血小板计数结果不在阈值范围内的标本病例应采用手工复检测定， 并保证血标本的方式时间<120min.
关键词：血细胞计数 血小板计数 危险因素
Discussion of Influence of Detecting Platelets by Hematology Analyzer
Abstract:Objective To analyze the effect factors of influence of detecting platelets by hematology analyzer to remove falsely lower and falsely higher to get the correct PLT.Methods Choosed data of 300 patients from Jan.2011 to Dec.2012 to analyze PLT by XE-1000i hematology analyzer.Results There were PLT of 100 cases beyond the scope of threshold value to manual review.There was significant difference between hematology analyzerm and manual test （P < 0.05） .And the longer the specimen placed time, the lower the results were.And there was significant difference of resutls between detecting in 0 min and 120 mins （P < 0.01） .Conclusion We should manual review results of PLT dectecting by hematology analyzer beyond the scope of threshold value and ensure detecting time in 120 mins.
Keyword:Blood cell count; Platelet count; Risk factors;
血小板计数能够有效地反映出患者的出血、止血情况， 是判断患者病情的一个重要指标。临床常用的血小板计数测定方式有血液分析仪测定和手工测定方式。随着不同型号的血液细胞分析仪的广泛应用， 证实全自动血液分析仪具有快捷、方便、对红细胞计数、白细胞计数的测定结果稳定性和重复性好的优势， 但是由于仪器自身工作原理的限制以及影响检测结果的多方面因素， 经血液分析仪测定的血小板计数低于或高于阈值的稳定性较差。本研究分析采用血液分析仪测定血小板计数的相关影响因素， 现报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2011年1月-2012年12月我院收治的300例肿瘤患者， 及同期在本院接受体检的健康人100例为研究对象。
1.2 仪器与试剂
采用XE-1000i血液细胞分析仪 （20×109/L<血小板计数阈值<600×109/L） ;清洗液、稀释液、溶血素等原装配套试剂；EDTA-Kz抗凝采血管[1].
1.3 方法
全自动血液细胞测定仪与手工法附件测定的基本操作方法均按照全国临床检验操作中所规定的标准规程进行[2].
1.4 统计学方法
采用SPSS 15.0统计学软件进行数据的分析和处理， 计量资料以 （±s） 表示， 组间比较采用t检验， 以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
300例患者标本根据血小板计数分为患者A、患者B、患者C, 每组各100例， 仪器法组与手工法组的差异随血小板计数的减少而逐渐增大， 差异有统计学意义 （P<0.05, 见表1） ;仪器法组与手工法组血标本放置的时间不同血小板计数比较差异有统计学意义 （P<0.05, 见表2） .
表1 两种测定方法测定血小板计数结果比较 （±s, ×109/L）
表2 两种测定方法测定血标本不同放置时间血小板计数结果比较 （±s, ×109/L）
3 讨论
3.1 测定方式
本研究中100例健康者与300例患者的血小板计数测定结果不同， 经仪器测定与手工测定比较有差异， 可见在血小板计数的实际测定中要对超出仪器测定阈值的标本进行手工复查， 来保证其测定结果的准确性。
3.2 放置时间
研究显示， 血小板计数会随着血液放置时间的延长而降低， 这是由于血小板容易聚集、黏附和破坏， 并且放置的时间越长， 所受到的破坏越多[3].本研究结果显示， 仪器法组与手工法组血标本放置的时间不同血小板计数比较有差异， 可见， 于采血后2h内完成血小板计数测定的必要性。
3.3 标本污染
标本测定中片面追求测定速度、经济利益， 反复使用测定杯会增加测定结果。测定杯的反复使用会增加杯壁的残留， 致使测定结果偏高。此外， 测量中不及时盖好加过抗凝剂的杯盖， 将标本外露， 会将空气汇总的微小颗粒带入杯中， 影响测定的准确性。
3.4 仪器因素
血液细胞分析仪连接不紧会发生漏电， 致使测定后的血小板计数高于正常水平， 而电压是否恒定也会影响正常的结果。
3.5 其他因素
在同一个血液分析仪中， 红细胞计数和血小板计数是经同一系统鉴别的， 但是当平均红细胞体积 （MCV） <70fl时， 仪器会提示有上限区域干扰， 红细胞直方图会显示小红细胞[4], 致使测定结果高于正常的血小板计数。
参考文献
[1] 杨佳， 余永红， 龚金莲， 等。血脂对全血细胞计数 （CBC） 结果的影响[J].江西医学检验， 2011, 18 （7） :109-110.
[2] 肖景珠， 赵慧斌， 李峰， 等。血细胞分析仪计数血小板的影响因素分析[J].临床检验杂志， 2012, 13 （4） :198-199.
[3] 张霞。Sysmex XT-1800i血细胞分析仪白细胞不分类报警信息与镜检结果对比分析[J].中国医药导报， 2012, 15 （14） :106-107 .
[4] 黄昌志， 秦雪。血常规H750五分类血液分析仪与传统手工法若干项目结果比对[C].全国临床免疫检验研讨会暨第六届全国临床免疫学术会议论文汇编， 2012.
原文引用：杨健。血液分析仪测定血小板计数的影响因素研究[J].临床合理用药杂志，2013,6（27）：14-15.
第三篇：血细胞分析仪测定血小板计数的影响因素分析
作者：霍美珍
作者单位：大同市第二人民医院
摘要：目的：分析血细胞分析仪测定血小板计数的主要影响因素。方法：选取该院2015年17月行健康体检的50例志愿者， 分别采集其静脉血与末梢血行血小板计数测定， 同时依次采用手工法与仪器法完成检测， 再将不同时间测定血小板计数值进行比较， 总结上述3种不同情况对检验结果的影响， 并评估血细胞分析仪测定血小板计数的主要影响因素。结果：50例健康志愿者的静脉血标本血小板计数测定结果为 （164.87±5.68） ×109/L, 末梢血标本测定结果为 （162.19±5.14） ×109/L, 组间差异无统计学意义 （P<0.05） .手工法与仪器法在采集即刻及静置8 h的血小板计数测定结果比较差异均无统计学意义 （P<0.05） , 仪器法检验中静置10 min、1 h、2 h与4 h的血小板计数测定结果同采集即刻与静置8 h结果比较差异具有统计学意义 （P<0.05） .结论：临床检验血小板计数时需严密关注采集部位与标本放置时间等因素， 经全自动细胞分析仪测定血小板异常时， 可酌情考虑手工计数法的应用， 以避免血小板计数测定误差的发生。
关键词：血小板计数 血细胞分析仪 影响因素
血小板是所有血细胞中体积最小的细胞， 它是从骨髓巨核细胞的细胞质脱落之片段所形成的， 它具有很好的聚集和黏附功能， 参与机体的自行止血和凝血过程， 对维护人体健康具有重要的作用。但它自身容易被破坏、易受到其他疾病因素的干扰， 因此对血小板及其相关参数进行测定， 可以对疾病的临床诊断及治疗提供有效的依据。血细胞分析仪是临床检验的常用仪器， 应用其开展血液检验具有操作便捷、工作效率高、数据精准以及重复性良好等优点[1], 但检验过程中仍存在众多外部因素会对测定结果形成不良影响， 有效控制检验影响因素已成为临床检验科室的重点研究课题。为进一步明确血细胞分析仪检验血小板计数的临床影响因素， 本研究将50 份血液标本在不同状态下的测定结果进行比较， 现报道如下。
1. 资料与方法
1. 1 一般资料
选取本院2015 年1 ~ 7 月行健康体检的50 例志愿者为研究对象， 分别获取其静脉血与末梢血， 且各血液标本均无污染发生。本组志愿者中男28 例， 女22 例， 年龄9 ~ 69 岁， 平均 （ 36. 72 ± 4. 13） 岁。
1. 2 方法
采用SYSMEX XP - 100 全自动血液分析仪以及其配套实际， 应用EDTA - K2 抗凝剂， 根据检验操作规范完成硫酸铵稀释液配制。空腹清晨抽取50 例志愿者的静脉血2 ml与末梢血120 μl, 再应用EDTA抗凝管给予储存待检。开展检验时依次行手工法与仪器法进行测定， 同时， 在手工法与仪器法检测时分别在采集即刻、静置10 min、1 h、2 h、4 h与8 h等不同时间点测定其血小板计数。各检测方式与各血液标本均给予3 次反复检测， 获取其均值后完成临床分析。
1. 3 观察指标
根据血液标本来源将其分为静脉血与末梢血， 依据检验方法划分手工法与仪器法， 再综合不同检验时间点测定结果， 依次进行统计学处理分析。
1. 4 统计学方法
采用SPSS 19. 0 统计学软件对数据进行分析处理， 计量资料以表示， 行t值检验， 计数资料采取率 （ % ） 表示， 行 χ2检验， P < 0. 05 为比较差异具有统计学意义。
2. 结果
2. 1 50 例健康志愿者不同血液标本来源的测定结果比较50 例健康志愿者的静脉血标本血小板计数测定结果为 （ 164. 87 ± 5. 68） × 109/ L, 末梢血标本测定结果为 （ 162. 19 ± 5. 14） × 109/ L, 组间差异无统计学意义 （ t= 0. 78, P > 0. 05） .
2. 2 50 例健康志愿者不同检验方法与不同时间点的测定结果比较
手工法与仪器法在采集即刻及静置8 h的血小板计数测定结果比较差异均无统计学意义 （ P < 0. 05） , 仪器法检验中静置10 min、1 h、2 h与4h的血小板计数测定结果同采集即刻与静置8 h结果比较差异具有统计学意义 （ P < 0. 05） , 但手工法检验中不同时间点的测定结果比较差异无统计学意义 （ P > 0. 05） , 详见表1.
3. 讨论
血小板是人体血浆中有效组成成分之一， 主要为骨髓中巨核细胞胞质所裂解脱落的小块胞质， 其无色、体积小， 并具有较高黏附性。在人体发生血管破损后， 其血液流出后其血小板同局部血管内皮组织会出现明显的接触性反应， 使得大量血小板附着于血管壁部位。临床采用血细胞分析仪测定血小板计数时， 由于抗凝管表面与血浆标本也会出现接触性作用， 促使抗凝管壁存在大量血小板黏附与聚集等情况， 是临床检验结果偏差的主要诱发原因， 进而在手工法或仪器法测定血小板计数时均会出现数据偏高表现。
本研究分别采集健康志愿者的静脉血与末梢血， 经临床检验表现两种血液标本的测定结果无显着差异， 但实际检验工作中采集末梢血的危险程度相对较高， 在采集速度与针扎深度不当等情况下会影响到检验结果的准确性， 进而在血液标本采集时尽量选择静脉血而采集末梢血时务必维持血液自然流出状态， 保证针扎深度为3 mm, 以缓解检验误差风险。既往研究认为检验中应用抗凝剂类型对测定结果也会形成一定程度影响[2], 本研究中采用EDTA - K2 符合国际检验标准， 并未出现影响表现。同时， 本研究分别应用手工法与仪器法开展血小板计数检验， 结果表现仪器法在采集即刻与标本静置8h时的测定结果发生明显变化， 同手工法检验结果比较具有明显差异。两种检验方法的数据差异表现样本采集即刻抗凝剂可影响到血小板形态表现， 促使其体积迅速扩大， 此时间点进行仪器分析会影响实际测定结果； 经样本放置10 min后血小板形态逐渐恢复正常， 使其检验结果发生显着变化； 但标本放置时间超过8h后血小板计数仍会呈现逐渐下降趋势。提示不同检验方法对标本放置时间的要求各不相同， 而应用血细胞分析仪检测时务必控制标本放置时间， 方可缓解检验结果偏差情况。另外， 依据研究相关结果总结， 采用全自动血细胞分析仪测定血小板计数时， 检验医师同临床医师需维持密切联系状态， 对检验精确性也有积极作用。
综上所述， 临床检验血小板计数时需严密关注采集部位与标本放置时间等因素， 经全自动细胞分析仪测定血小板异常时， 可酌情考虑手工计数法的应用， 以避免血小板计数测定误差的发生。
参考文献
[1]杨健。血液分析仪测定血小板计数的影响因素研究[J].临床合理用药杂志， 2013, 6 （27） :14-15.
[2]张伟红， 陈斌， 蔡梦珊， 等。SYSMEX XE-5000血液分析仪血小板准确计数的相关分析[J].检验医学， 2014, 29 （7） :741-744.
原文引用：霍美珍。血细胞分析仪测定血小板计数的影响因素分析[J].大家健康（学术版），2016,10（05）：75.