ÃâÒßѧÂÛÎÄ

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Veroϸ°ûÅàÑøÖƱ¸É­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾ÊµÑéÑо¿

À´Ô´£ºÖйúÉúÎïÖÆƷѧÔÓÖ¾ ×÷ÕߣºÁõË«¾ü;ÁõÑÒËÉ;ËïºêÁÁ
·¢²¼ÓÚ£º2018-05-29 ¹²4560×Ö
¡¡¡¡ÕªÒª£ºÄ¿µÄ ±È½Ï3 Lתƿ¼°14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø²¡¶¾ÖƱ¸µÄÉ­ÁÖÄÔÑ×Ãð»îÒßÃçµÄ²úÁ¿¼°ÖÊÁ¿¡£·½·¨ ·Ö±ð²ÉÓÃ3 Lתƿ¼°14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑøVeroϸ°û£¬ 3 LתƿÅàÑøϸ°û96 hºó¸ÐȾSZVÖêÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾ £¨MOI=0.01¡¢0.04¡¢0.1¼°0.4£© , ÅàÑøÖÁ8096 hÊÕ»ñµÚ1´Î£¬ ÿ¸ô48 hÊÕ»ñ1´Î £¨500 m L/´Î£© ;14 LÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑøVeroϸ°û7 dºó¸ÐȾSZVÖêÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾ £¨MOI=0.01¡¢0.04¡¢0.1¼°0.4£© , ¸ÐȾºó96 h¿ªÊ¼Á÷¼Ó²¡¶¾Î¬³ÖÒº£¬ ²¢ÊÕ»ñ²¡¶¾Òº£¬ ÿ24 hÊÕ»ñ1015 L.Á½ÖÖÅàÑø·½Ê½ÊÕ»ñµÄÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾Òº¾­³¬ÂËŨËõ¡¢β-±ûÄÚõ¥Ãð»î¡¢Öù²ãÎö´¿»¯ºó»ñµÃÒßÃçÔ­Òº£¬ ²¢½øÐÐÏà¹Ø¼ì¶¨¡£½á¹û 4ÖÖMOI¸ÐȾVeroϸ°û£¬ ²ÉÓÃ3 Lתƿ·½Ê½ÅàÑø¿ÉÁ¬ÐøÊÕ»ñ67´Î£¬ ²¡¶¾Òº²úÁ¿Îª33.5 L, ÊÕ»ñҺƽ¾ùµÎ¶ÈΪ7.4 lgLD50/m L;²ÉÓÃ14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¿ÉÁ¬ÐøÊÕ»ñ14 d, ²¡¶¾²úÁ¿140160 L, ÊÕ»ñҺƽ¾ùµÎ¶È¸ß´ï8.4 lgLD50/m L.Á½ÖÖ·½·¨ÖƱ¸É­ÁÖÄÔÑ×Ãð»îÒßÃçÔ­Òº¸÷ÏîÖÊÁ¿Ö¸±ê¾ùºÏ¸ñ£¬ ÇÒ14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÖƱ¸Ô­ÒºµÄЧÁ¦¼°µ°°×º¬Á¿ÓÅÓÚ3 Lתƿ¡£½áÂÛ Ó¦ÓÃÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¹¤ÒÕÖƱ¸Veroϸ°ûÉ­ÁÖÄÔÑ×Ãð»îÒßÃçµÄ²úÁ¿¼°ÖÊÁ¿¸ßÓÚתƿÅàÑø¹¤ÒÕ£¬ ±¾ÊµÑéΪÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÖƱ¸Veroϸ°ûÉ­ÁÖÄÔÑ×Ãð»îÒßÃçµÄ´ó¹æÄ£Éú²ú¼°¹¤ÒոĽøµì¶¨ÁË»ù´¡¡£
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¡¡¡¡±¾Ñо¿Í¨¹ý²ÉÓÃ3 LתƿºÍ14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷Á½ÖÖÅàÑø·½Ê½ÅàÑøVeroϸ°û£¬ ²¢ÓÃÓÚÖƱ¸É­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾ÊÕ»ñÒº£¬ ¾­´¿»¯ºó»ñµÃÉ­ÁÖÄÔÑ×Ãð»îÒßÃ磬 ²ÎÕÕ¡¶ÖйúÒ©µä¡·Èý²¿ £¨2010°æ£© [8]ÒªÇó¼°±¾¹«Ë¾×Ô¶¨±ê×¼½øÐмì²â£¬ ²¢½«½á¹û½øÐбȽϣ¬ ÏÖ±¨µÀÈçÏ¡£
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¡¡¡¡14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷¹²¼ÓÈëƬ״ÔØÌå300~500 g, 121¡æ¸ßѹÃð¾ú1 h, ÎÞ¾úÑéÖ¤ºÏ¸ñºó£¬ °´ £¨4~6£© ×109¸ö/m LµÄÃܶȽ«148´úVeroϸ°û10 L½ÓÖÖÓÚÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÄÚ£¬ ϸ°ûÅàÑøζÈÉ趨Ϊ37¡æ£¬ p HÉ趨Ϊ7.0, DOÉ趨Ϊ70%, µ÷ÕûתËÙΪ80 r/mim.½ÓÖÖϸ°û24 hºó¿ªÊ¼Á÷¼Óϸ°ûÉú³¤Òº£¬ ÅàÑø7 d £¨ÖÁϸ°ûƽ̨ÆÚ£© , ·Ö±ð°´MOI=0.01¡¢0.04¡¢0.1¡¢0.4½ÓÖÖSZVÖêÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾£¬ ÓÃϸ°ûά³ÖÒº½øÐÐÅàÑø£¬ ½«ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑøζÈÉ趨Ϊ33¡æ£¬ p HÉ趨Ϊ7.4, DOÉ趨Ϊ70%, תËÙΪ100 r/min.¸ÐȾ80~90 hºó¿ªÊ¼Á÷¼Ó²¡¶¾Î¬³ÖÒº£¬ ²¢ÊÕ»ñ²¡¶¾Òº£¬ ÿ24 hÊÕ»ñ10~15 L, ÊÕ»ñËÙ¶ÈÓë²¹¼Óά³ÖÒºËÙ¶ÈÏàͬ£¬ ²¢È¡Ñù¼ì²â£¬ ÓÚ-70¡æ¶³´æ¡£
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¡¡¡¡2.2.1 3 LתƿÅàÑø
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¡¡¡¡Í¼1 3 LתƿÅàÑøVeroϸ°û¼°¸ÐȾɭÁÖÄÔÑײ¡¶¾ºóµÄÉú³¤×´Ì¬ £¨¡Á10£© Fig 1.Growth of Vero cells in 3 L rolling bottle after infection with TBE virus £¨¡Á10£©
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¡¡¡¡Í¼2 MOI¶Ô3 LתƿÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾µÎ¶ÈºÍÊÕ»ñ´ÎÊýµÄÓ°ÏìFig 2.Effect of MOI on titer and harvest times of TBE virus in 3 L rolling bottle
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¡¡¡¡2.2.2 14 LÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø
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¡¡¡¡SZVÖêÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾°´4ÖÖ²»Í¬MOI¸ÐȾVeroϸ°û£¬ ¾ù¿ÉÁ¬ÐøÊÕ»ñ14 d £¨¹²14´Î£© , ²¡¶¾²úÁ¿140~160 L, ÊÕ»ñҺƽ¾ùµÎ¶È¸ß´ï8.4 lg LD50/m L.MOI=0.01¡¢0.04¡¢0.1¡¢0.4ʱ×î¸ß²¡¶¾µÎ¶È·Ö±ðΪ9.00¡¢8.90¡¢8.75¡¢9.00 lg LD50/m L, ¾ù¿É´ïµ½½Ï¸ß²¡¶¾µÎ¶È £¨8.0 lg LD50/m L£© , µ«´ïµ½½Ï¸ßµÎ¶ÈµÄʱ¼ä²»Í¬£¬ ·Ö±ðΪ11¡¢9¡¢7¡¢8 d.¼ûͼ3.
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¡¡¡¡Í¼3 MOI¶Ô14 LÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾µÎ¶ÈºÍÊÕ»ñ´ÎÊýµÄÓ°ÏìFig 3.Effect of MOI on titer and harvest times of TBE virus in 14 bioreactor
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¡¡¡¡2.2.3 Á½ÖÖÅàÑø·½Ê½ÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾µÎ¶ÈºÍÊÕ»ñ´ÎÊýµÄ±È½Ï
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¡¡¡¡Í¼4 Á½ÖÖ·½Ê½ÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾µÄ±È½ÏFig 4.Titers of TBE virus cultured by two methods
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¡¡¡¡2.3 ÒßÃçÔ­ÒºÖ÷Òª¼ì¶¨½á¹û
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¡¡¡¡Á½ÖÖ·½Ê½ÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾ÖƱ¸µÄÒßÃçÔ­Òº¾­¼ì²â£¬ ¸÷ÏîÖ¸±ê¾ùºÏ¸ñ£¬ ÇÒ14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÖƱ¸ÒßÃçµÄЧÁ¦¼°µ°°×Öʺ¬Á¿ÓÅÓÚ3 Lתƿ£¬ ͬʱËÞÖ÷µ°°×²ÐÁôÁ¿¼°Å£ÑªÇåµ°°×²ÐÁôÁ¿¾ùµÍÓÚ3 Lתƿ¡£¼û±í1.
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¡¡¡¡±í1 ÒßÃçÔ­Òº¼ì²â½á¹ûTab 1.Control tests on bulk of TBEV
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¡¡¡¡Veroϸ°ûÅàÑø¿É²ÉÓÃתƿ¡¢ÀºÊ½Æ¬×´ÔØÌ塢΢ÔØÌåµÈ·½Ê½½øÐÐÅàÑø[9], ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¹¤ÒÕ»ñµÃµÄϸ°ûÃÜ¶È½Ï´ó£¬ ÇÒƬ״ÔØÌå¿ÉÎü¸½ÍÑÂäµÄϸ°ûºÍËÞÖ÷µ°°×£¬ Ò׵õ½½Ï¸ßÖÊÁ¿µÄÊÕ»ñÒº[10].±¾ÊµÑé²ÉÓÃ3 Lתƿ¼°14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷·Ö±ðÅàÑøÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾£¬ ²¢½øÐжԱȷÖÎö£¬ ½á¹ûÏÔʾ£¬ 14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷¹¤×÷Ìå»ýΪ10 L, Ϊ3 Lתƿ¹¤×÷Ìå»ýµÄ20±¶£»14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ƽ¾ù²¡¶¾µÎ¶ÈΪ8.4 lg LD50/m L, 3 Lתƿƽ¾ù²¡¶¾µÎ¶ÈΪ7.4 lg LD50/m L;14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÊÕ»ñ´ÎÊýΪ14´Î£¬ ²¡¶¾²úÁ¿140~160 L, 3 Lתƿ½öÄÜÊÕ»ñ6~7´Î£¬ ²¡¶¾Òº²úÁ¿Îª3~3.5 L.±íÃ÷14 LÀºÊ½ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÖƱ¸ÒßÃçÔ­ÒºµÄ²¡¶¾µÎ¶È¡¢²¡¶¾²úÁ¿¡¢ÒßÃçÖÊÁ¿¾ù´ó·ùÌá¸ß[11].ͬʱ£¬ ÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÅàÑø¹¤ÒյIJúÆ·ÖÊÁ¿Åú¼ä²îÒìС£¬ ÄÜÔ´ÏûºÄÉÙ£¬ ÀͶ¯Á¦Ç¿¶ÈС£¬ Éú²úЧÒæÃ÷ÏÔ¸ßÓÚתƿÉú²ú¹¤ÒÕ[12].
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¡¡¡¡ÀûÓÃ14 LÉúÎï·´Ó¦Æ÷½øÐÐVeroϸ°ûÅàÑøÖƱ¸É­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾£¬ ¿É»ñµÃ¸ü¸ß²¡¶¾µÎ¶ÈµÄ²¡¶¾ÊÕ»ñÒº£¬ Éú²ú¹ý³ÌÒ×ÓÚ¿ØÖÆ£¬ ÄÜ´óÁ¿½µµÍÀͶ¯³É±¾£¬ Ìá¸ßµ¥²ú¡£ÇÒ²¿·ÖÖ¸±êÓÅÓÚ3 LתƿÅàÑø¡£±¾ÊµÑéΪÉúÎï·´Ó¦Æ÷ÖƱ¸Veroϸ°ûÉ­ÁÖÄÔÑײ¡¶¾Ãð»îÒßÃçµÄ´ó¹æÄ£Éú²ú¼°¹¤ÒոĽøµì¶¨ÁË»ù´¡¡£
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