甘肃鼢鼠骨骼中氨基酸的含量测定

　　氨基酸的测定有多种方法，以前我们用的较多的是比色法[1],由于比色法准确性不高，结果也易受外界因素干扰，所以现在我们很少用它来测定氨基酸的含量了。现在我们常用的是氨基酸自动分析仪法[2]和HPLC法[3].HPLC法测定准确度高，但测量成本较高，多样本测量费用太大，而且对操作人员技术要求也较高。而氨基酸自动分析仪法操作简单、准确、自动化程度和灵敏度高，便于多样本数据的测定。本文利用121MB型氨基酸自动分析仪（美国贝克曼公司）测定甘肃鼢鼠骨骼中氨基酸的含量，为进一步开发甘肃鼢鼠骨骼药用价值提供最基础的数据资料。

　　1 实验材料

　　1.1 实验动物

　　1岁龄以上甘肃鼢鼠10只（体重200±20g），雌雄不限，采集地点：陕西延安，采集时间：2013年10月。

　　2 实验方法

　　2.1 骨骼的制备

　　甘肃鼢鼠麻醉处死，半小时内剥皮剔肉，取下所有的骨骼，去离子水冲洗3~5遍，于30℃恒温箱中烘干，用粉碎机充分粉碎后再碾磨，装袋备用。

　　2.2 样品液配制

　　准确称取样品100mg于烧杯中，先加入6mol·L-1HCL充分搅拌，然后110℃水解22h,放置冷却，待测。

　　2.3 样品检测

　　待测样品依次放入121MB型氨基酸分析仪（美国贝克曼公司），测定样品中各种氨基酸含量。

　　2.4 数据统计
　　

　　一份样品检测3次检测结果以平均值表示。

　　3 实验结果与讨论

　　3.1 甘肃鼢鼠骨骼中氨基酸含量的质量分数如表 1 所示。

　　由表1可知，甘肃鼢鼠骨骼中常见氨基酸含量丰富，其中药用价值较高的羟脯氨酸含量较高，这是由甘肃鼢鼠的食性决定的，甘肃鼢鼠是一种地下鼠，它主要靠挖掘采集食物，喜欢植物的根和一些埋在地下的植物，比如马铃薯、萝卜等，其次喜食含粗纤维、粗脂肪较多的落叶松、油松等林木的根部[4],其体内的羟脯氨酸可能来源于这些食物，是长期食用它们沉积在骨骼里的结果，而植物中氨基酸的含量与它生长的土壤有关[5].

　　4 结论

　　在多样本氨基酸分析方面，氨基酸自动分析仪有简单易操作的优势，准确度也较高，可以直接对氨基酸进行分析，避免了其他物质和衍生物的干扰，能快速、准确地定量氨基酸。本实验对甘肃鼢鼠全身骨骼氨基酸进行了测定，发现药用价值高的羟脯氨酸含量较高，而羟脯氨酸被认为是虎骨中药用价值最高的氨基酸[6],所以甘肃鼢鼠骨骼具有开发成新一代虎骨替代品的潜质。

　　参考文献：
　　[1]李景红，杨再山，孟祥晨。比色法检测乳中掺加的动物胶原水解蛋白。中国乳品工业[J].2007,35（9）：50-52.
　　[2]陈雄伟，王桂芬。用835-50型氨基酸自动分析仪对羟脯氨酸的测定方法。氨基酸杂志[J].1985,4:5-6.
　　[3]高建华，宁正祥。禽畜皮和鱼鳞的基本成分及氨基酸组成分析。现代食品科技[J].2007,23（12）：77-79.