总香豆素的提取方法与应用

　　香豆素又称香豆精，是顺式邻羟基桂皮酸的内酯，具有芳香甜味。它的衍生物广泛分布于植物界。它们约有1000种，是重要的天然化合物之一。其中一部分是以苷类的形式而存在的，如香豆素、补骨脂素在植物体内是以邻羟基桂皮酸苷的形式存在的；又如香草木犀和樱桃叶中含有的香草木犀苷就是邻羟基桂皮酸的β-D-葡萄糖苷，它在酶的作用下，水解并环合成内酯，因而徐徐地散发着香气。香豆素大多数来自高等植物，在豆科、兰科、芸香科、伞形花科、木犀科、茄科和菊科植物中比较多。少数来自低等植物、动物和微生物。香豆素是植物药材的一种有效成分，常见于伞形花科的许多药材中，如白芷、前胡、蛇床子、茴香等，还存在于补骨脂、佛手、秦皮、续随子、枳实等许多植物药材中。

　　一、总香豆素的提取方法
　　
　　1 简单香豆素的水蒸气蒸馏法
　　
　　对于挥发性较强的香豆素类，可用水蒸气蒸馏法或压榨法从药材中提取挥发油；然后再以水蒸气蒸馏除去挥发油，再以有机溶剂结晶和重结晶，可得总香豆素。

　　2 总香豆素的浸出方法
　　
　　浸出总香豆素要根据药材中的成分，香豆素的结构和物理化学性质，选择浸出溶剂。在香豆素的提取生产中，可选用的溶剂有轻汽油、乙醚、苯、氯仿、乙醇、碱性水溶液。

　　（1）轻汽油浸出法。对药材中的非香豆素性脂溶性物质含量较少的，而且香豆素的极性较小的，可用轻汽油加热浸出法。例如，从白花前胡、白芷、蛇床子和独活中浸出呋喃香豆素，可用轻汽油浸出。如果药材中含有较多的脂肪油，可先以冷氢汽油浸出脂肪油，再以热轻汽油进行逆流浸出香豆素。

　　（2）乙醚浸出法。药材粉碎后用乙醚浸出，所得乙醚浸出液，如溶液太黏，加适当量乙醚稀释。然后将乙醚浸出液置冷冻室中放置，观察有无结晶析出，如果有结晶量较多，加温并追加乙醚使溶，在置冷冻室冷却，使结晶析出。滤出结晶后的母液再浓缩，再冷却结晶，如此可再分批提出结晶，有可能获得不同的香豆素类。

　　（3）乙醚浸出物的水蒸气蒸馏法。

　　乙醚浸出液如析不出结晶，则将此溶液或将已析出结晶后的乙醚母液再回收乙醚浓缩，并充分挥发溶剂，进行水蒸气蒸馏，除去可能存在的精油。残留液趁热时过滤，将热水滤液放冷，滤取析出的沉淀。热水不溶部分经干燥，以石油醚数次温浸，将石油醚浸液浓缩放置，待析出的香豆素结晶，石油醚不溶物另外收集处理。

　　（4）混合溶剂浸出法。许多香豆素在实验室中以乙醚浸出，如含呋喃香豆素和吡喃香豆素的白芷、独活、蛇床子等。在香豆素的提取生产中用乙醚浸出成本较高，且沸点低、易燃、易爆，生产很不安全，所以最好不用乙醚。不用乙醚需要采用极性与乙醚相近的溶剂，如氯仿或低极性溶剂的混合溶剂。混合溶剂可用轻汽油、苯与乙醇的混合溶剂系统，比例可根据实验选择。

　　（5）乙醇浸出法。对含有香豆素苷或极性较大的香豆素成分的中药材，需要用乙醇作浸出溶剂。例如，从中药秦皮浸出秦皮香豆素等（6）碱水浸出法。中药粉末以0.5%氢氧化钠的水溶液加热在50℃进行逆流浸出，浸出液冷却后加酸调pH到弱酸性，即可析出总香豆素。如果不析出或不完全析出，可加食盐盐出。

　　3 总香豆素的分离方法
　　
　　总香豆素的分离方法有结晶法、萃取法、碱酸处理法、分离法等。

　　（1）结晶法。有一些游离总香豆素的分离方法比较简单，轻汽油或其他非极性有机溶剂浸出液浓缩液冷却后，可析出总香豆素的结晶。以混合溶剂浸出含香豆素的中药材的浸出液，浓缩后如不出现结晶可回收全部溶剂后，转溶于石油醚并除去不溶物后，再析出总香豆素。

　　（2）粹取法。在植物药材的轻汽油浸出液或其他非极性有机溶剂浸出液中，有时含有酸性物质，可用稀碳酸氢钠水溶液萃取除去。如果被提取的香豆素含有羟基，可用稀氢氧化钠水溶液萃取，向萃取所得水溶液中加入酸调pH到弱酸性，可析出酚羟基香豆素。以碱性水溶液作浸出溶剂，所得的香豆素碱水浸出液可加酸调pH到酸性，析出香豆素，再以非极性有机溶剂萃取，浓缩有机溶剂萃取液，可得总香豆素。

　　（3）碱酸处理法。取不能析出总香豆素的有机溶剂浸出物，加稀氢氧化钠水溶液微微加热溶解，滤除水不溶物。向滤液加稀酸调pH到弱酸性，析出总香豆素。在使用这种方法精制时，要注意防止对碱敏感的物质受到破坏。

　　（4）分离法。含有香豆素又含有有机酸的有机溶剂，先以稀碳酸氢钠水溶液萃取有机酸类成分，再以稀氢氧化钠水溶液萃取酚性成分。氢氧化钠萃取液酸化析出物，可得羟基香豆素类。有机溶液中的中性成分加氢氧化钾乙醇溶液在室温中进行皂化，皂化完成后，加水并在减压下蒸去乙醇。残渣以乙醚萃取，除去其中的不皂化物。然后将碱液随后酸化，再以乙醚萃取。所得乙醚萃取液再以冷的稀碱液除去皂化后生成的酸性成分，香豆素则留存在乙醚液中，浓缩乙醚后析出结晶。如不直接析出结晶，再行真空蒸馏，分成几个馏分再待结晶。

　　二、香豆素的应用
　　
　　1 抗菌作用香豆素本身并无抗菌作用，在它的衍生物中，不少具有抗细菌和抗真菌作用。

　　2 抗凝血和止血作用双香豆素的某些类似品，是临床上实用的一种抗凝血药物，用以防止血栓形成并消除血块。

　　3 中枢神经作用香豆素的中枢神经作用以退热作用最强，并有安眠和镇静等抑制作用；而一般香豆素的安眠剂量与中毒剂量差距不大。

　　4 女性激素作用自三叶豆草中提出的香豆拟雌内酯，有显着的女性激素作用。

　　参考文献
　　
　　[1] 倪根珊 . 药物分类及药物学概论 [M].北京：解放军出版社，1988.
　　[2] 林启涛 . 中草药成分化学 [M]. 北京：人民卫生出版社，1997.