固定底物酶底物法与多管发酵法在污水检查中的应用

污水检测论文精心编辑10篇之第七篇：固定底物酶底物法与多管发酵法在污水检查中的应用

　　摘要：随着现代科学技术的不断发展，关于对水中粪大肠菌群快速检测方法的相关研究逐渐受到社会各界的广泛关注，而其中用的最广泛的检测方法主要有两种：①固定底物酶底物法；②多管发酵法。本文主要通过以科立得试剂和传统方法使用检测地表水、水源水和污水水样为主要实验基础，根据固定底物酶底物法与多管发酵法的相关基础理论知识，从而来比较固定底物酶底物法对水中粪大肠菌群的实验检测结果以及多管发酵法对水中粪大肠菌群的实验检测结果，以此来选择出最适合水中粪大肠菌群快速检测的方法。

　　关键词：水中粪大肠菌群； 固定底物酶底物法； 多管发酵法；

　　0 引言

　　水中粪大肠菌群快速检测方法是否有效能够在关于对水中粪大肠菌群的检测方法起到一定程度的决定性作用，而固定底物酶底物法与多管发酵法这两种检测方法已经被国内环境监测部门针对性进行选用，与之前所选用的水中粪大肠菌群检测方法相比，这两种检测方法不仅仅解决了对实验结果的验证，从而在一定程度上能够对水当中的环境做出快速的检测，而且还能够将之前繁琐复杂的实验步骤做出相应的简化。所以，在进行水环境检测当中采用固定底物酶底物法与多管发酵法等快速检测方法是非常有必要的。

　　1 固定底物酶底物法与多管发酵法的相关概述

　　1.1 固定底物酶底物法的相关概述

　　固定底物酶底物法这一原理主要就是水中粪大肠菌群能够与β-半乳糖苷酶发生相关的化学反应，其中，β-半乳糖苷酶产生分解处出来的ONPG,ONPG能够使培养液呈现出黄色或者是淡黄色的状态，并且水中粪大肠菌群还会产生分解出MUG,当培养液处于366nm的紫外光下时，MUG会在其作用下产生相应的荧光，根据这一原理，我们就可以在水环境检测当中用于检测其样本当中是否含有水中粪大肠菌群、大肠菌群以及大肠埃希氏菌等等。固定底物酶底物法在水中粪大肠菌群检测方法当中是属于一种比较快速简便的检测方法，具有实验步骤操作简便、所进行的实验检测时间与其它实验检测方法比起来较短等的特点，这也是在当今时代其被广泛应用的原因，在将其用于水环境的样本检测时，通常会采用最可能数这一相关技术或者方法。

　　1.2 多管发酵法的相关概述

　　多管发酵法的快速检测原理主要就是根据水中粪大肠菌群通过进行乳糖的发酵，从而产生一定程度的酸类或者气类物质，我们可以通过应用相应的物质与其产生相关的化学反应，然后观察培养液所呈现出来的颜色来检测是否具有水中粪大肠菌群、大肠菌群以及大肠埃希氏菌等等，多管发酵法适用于各种各样的水环境当中的粪大肠菌群检测，但是与固定底物酶底物法相比起来就存在一定的缺陷，比如其检测的实验过程和实验步骤进行起来有一定程度的复杂程度，而且其所进行的实验检测时间和其他检测方法比起来会很长。但是一般来说，利用多管发酵法进行检测时，其检测结果还是非常准确的。

　　2 水中粪大肠菌群快速检测方法比较的实验材料与实验过程

　　2.1 实验材料与试剂

　　我们在进行水中粪大肠菌群快速检测方法比较的实验时，所需要的实验材料主要有以下几种：（1）用于固定底物的相关设施设备；（2）进行检测实验时相关的培养基，比如MMO-MUG培养基；（3）其他的实验材料和仪器，比如无菌取样瓶、平定量盘、培养箱等等。当然，这些实验材料和试剂都得在一定程度上符合《地表水环境质量标准检测方法》的相关规定。

　　2.2 实验过程

　　关于对水中粪大肠菌群快速检测方法-固定底物酶底物法与多管发酵法的比较，我们需要分为两方面同时进行，第一部分是固定底物酶底物法的检测方法：首先，我们需要在无菌取样瓶当中加入一定量的水样品，为了方便计算可以取100mL;其次，我们需要在其中加入科立得试剂，并对无菌取样瓶轻微的摇匀混合后，将混合的试剂全部都倒入到97孔无菌定量盘当中，并无菌定量瓶进行相应的封口；最后，将其放进温度合适的培养箱当中，根据培养一定的时间标准后对实验结果进行判断，如果培养液呈现黄色，在一定程度上就可以确定水样本当中含有粪大肠菌群，反之，则不含有粪大肠菌群。第二部分是多管发酵法的检测方法：首先，我们需要在无菌取样瓶当中加入一定量的水样品，为了方便计算可以取100mL;其次，将所取得水样加入到50mL三倍浓缩的乳糖蛋白胨发酵烧瓶当中，放入一定温度下的培养箱当中，通过检验其是否产气和产酸的相关情况来判断进行相应的判定，如果其既产气又产酸，保证其他条件不变的情况下，可以确定水样本当中含有粪大肠菌群，反之，则不含有粪大肠菌群。在进行这两部分的实验时，我们需要记录各部分的实验时间。

　　2.3 实验结果

　　我们需要根据固定底物酶底物法与多管发酵法所完成的实验结果进行一定程度的配对t检验，发现两组数据所产生的Correlation值都几乎接近于1,在一定程度上说明了其相关性很好，而且两种快速检测方法得到的检验结果一致，证明了固定底物酶底物法达到了与多管发酵法一样的检测结果。

　　3 结语

　　由于固定底物酶底物法与多管发酵法在水环境检测当中能够起到快速检测的作用，这两种方法都受到了当今社会的广泛关注，我们通过实验对两种快速检测方法进行相应的比较，可以根据实验结果发现固定底物酶底物法与多管发酵法相比较起来具有明显的实验操作更简便、实验检测时间更短、进行水环境监测实验所产生的污染较低等优势特点，并且能够在一定程度上精准的判断水环境中的微生物污染情况，所以，在之后的水环境检测当中必定会被广泛应用。

　　参考文献
　　[1]蒋娜，范磊。水中粪大肠菌群不同检测方法的比较[J].广东化工，2018,45（14）：211-212.
　　[2]杨晓冉，朱超，张付海，等。固定酶底物法测定水中粪大肠菌群的优点及影响因素[J].环境科学导刊，2017,36（05）：87-90.
　　[3]张济龙，何吉明，何敏。水中粪大肠菌群检测方法及其研究进展[J].青海环境，2012,23（2）：89-92.
　　[4]高瑞坤，汤琳，付强。水中粪大肠菌群快速检测方法-固定底物酶底物法与多管发酵法的比较[J].中国环境监测，2008（4）：39-41.
　　[5]魏梦楠。污水再生水中典型肠道病原菌的培养鉴定及定量检测研究[D].西安：西安建筑科技大学，2010.