微生物论文
随着现代教育技术的发展，高校对多媒体教学设备的使用日益普及〔1〕,话筒是多媒体教学系统中扩音系统的组成部件之一。话筒中无微生物生活的必须介质，不是微生物生存的理想环境，但是在话筒使用过程中，口腔及鼻咽腔中的微生物会随着唾液和呼出的气体降落在话筒头部表面，空气中的尘埃也会附着于话筒表面。有关气溶胶的研究表明，来源于呼吸、谈话、咳嗽、喷嚏的颗粒中携带有病原体〔2 -4〕.为了解教学用话筒头部球面微生物分布和种属特征，本研究于 2010年 4 月选取山西某高校多媒体教室话筒，检测了话筒头部球面微生物分布情况。结果报告如下。
1 材料与方法
1. 1 材料
于 2010 年 4 月取山西某高校多媒体教室全部话筒共 16 部，根据采样时间距最近 1 次话筒使用时间的时长依次编号 1 ~16.
1. 2 方法
1. 2. 1 试剂与仪器 呼吸道病毒抗原 7 项荧光检测试剂盒（ 美国 DHI 公司产品） ; 肺炎支原体 PCR 检测试剂盒、肺炎衣原体 PCR 检测试剂盒、沙眼衣原体 PCR 检测试剂盒（ 上海之江生物科技有限公司产品） ; MCO-15AC CO2培养箱（ 日本SANYO 公司） ; OLYMPUS BX51 荧光显微镜（ 日本 OLYMPUS公司） ; MJ RESEARCH PTC-100 基因扩增仪（ 美国 Mj RE-SEARCH 公司） ; AlphaEase FC 凝胶成像系统（ 美国 Alpha In-notech 公司） .
1. 2. 2 标本采集与培养 使用无菌生理盐水润湿的无菌棉拭子，无菌操作擦拭话筒头部球体表面 1 次，将棉拭子置于装有 5 mL 肉汤培养基的试管中，充分振荡混匀后，取 50 μL 接种于兔血琼脂平板、巧克力琼脂平板，用接种环铺满 90 mm平皿。血琼脂平板 37 ℃ 培养 48 h,巧克力琼脂平板 37 ℃CO2培养箱培养 48 h.
1. 2. 3 细菌学检测 采用常规细菌生化和免疫凝集方法进行细菌种属鉴定〔5〕.细菌总数和各种群数计数与种群分类同时进行。细菌总数计算方法为： 细菌菌落总数 N（ cfu/cm2）= 100 × （ n ÷ 话筒球面表面积） ,其中 N 为话筒头部表面单位面积上细菌数（ cfu/cm2） ,n 为平皿中所有菌落数（ cfu） ; 不同种群占有率按百分比计算。
1. 2. 4 呼吸道病毒检测 取 1. 2. 2 中充分振荡混匀的肉汤培养基标本 2 mL,离心后留沉淀，沉淀经磷酸盐缓冲液 3 次洗涤后溶解于 0. 5 mL PBS 中作为病毒学检样。使用呼吸道病毒抗原 7 项荧光检测试剂盒检测 7 种呼吸道病原体抗原，包括腺病毒，呼吸道合胞病毒，流感病毒 A、B 型，副流感病毒1、2、3 型。所有操作均按试剂盒要求进行。
1. 2. 5 其他微生物检测 采用 PCR 法对肺炎支原体、肺炎衣原体、沙眼衣原体的特异性 DNA 核酸片段进行扩增后凝胶电泳检测。所有操作均按试剂盒要求进行。
1. 3 统计分析
使用 SPSS 13. 0 软件进行描述性统计分析。
2 结 果
2. 1 细菌学分布特征（ 表 1） 16 个话筒头部球面分别检出细菌 2 ~ 6 个菌属，3 ~ 9 个菌种，其中以葡萄球菌属、链球菌属、奈瑟菌属、棒状杆菌属、芽胞杆菌属为主，分别占 17. 33%~ 59. 77% 、21. 21% ~ 88. 89% 、15. 78% ~ 23. 54% 、5. 67% ~11. 12% 、2. 08% ~ 12. 36% ,其他占 4. 35% ~ 30. 09% .话筒使用后 10 min 内采样标本（ 1 ~3 号） 细菌菌落数为 178. 87 ~260. 60 cfu / cm2; 话筒使用后 20 min ~8 h 内采样标本（ 4 ~14号） 细菌菌落数为 23. 69 ~90. 03 cfu/cm2; 采样时间距上次话筒使用超出 18 h 标本（ 15 ~ 16 号） 细菌菌落数为 10. 66 ~11. 85 cfu / cm2; 单因素方差分析显示，话筒使用后 10 min 内、使用后 20 min ~8 h 内、使用超出 18 h 的 3 组标本间细菌总数差异有统计学意义（ P =0. 000） ; 话筒头部球面细菌总数随着采样时间距最后 1 次话筒使用时间的延长呈下降趋势。【表1】
2. 2 细菌种类 共检出细菌 9 种，其中分离出表皮葡萄球菌15 株，分离率 93. 75% （ 15 /16） ; 溶血葡萄球菌 3 株，分离率18. 75% （ 3 /16 ） ; 血浆凝固酶阳性葡萄球菌 5 株，分离率31. 25% （ 5 /16） ,其中 2 株鉴定为金黄色葡萄球菌，分离率12. 5% （ 2 /16） ; 咽峡炎链球菌 3 株，分离率 18. 75% （ 3 /16） ;唾液链球菌 9 株，分离率 56. 25% （ 9/16） ; 血链球菌 1 株，分离率 6. 25% （ 1/16） ; 干 燥 奈 瑟 菌 3 株，分 离 率 18. 75%（ 3/16） ; 枯草芽孢杆菌 7 株，分离率 43. 75% （ 7/16） ; 蜡样芽孢杆菌 1 株，分离率 6. 25%（ 1/16） .
2. 3 呼吸道病毒抗原阳性 16 份棉拭子标本中，检出腺病毒抗原阳性 9 份，检出率为 56. 25%; 呼吸道合胞病毒 14 份，检出率为 87. 5%; 流感病毒 A 型 11 份，检出率为 68. 75%; 流感病毒 B 型 13 份，检出率为 81. 25%; 副流感病毒 1 型、2 型各 7 份，检出率均为 43. 75%; 副流感病毒 3 型 11 份，检出率为 68. 75%.
2. 4 其他微生物 16 份棉拭子标本中，采用 PCR 法检出沙眼衣原体阳性 1 份，阳性率为 6. 25%.肺炎支原体、肺炎衣原体未检出阳性。
3 讨 论
调查结果显示，多媒体话筒头部球体表面存在着比较丰富多样的微生物群落，其中分离到的细菌多数是口腔与鼻咽腔常驻正常菌群及环境中的菌群，但其中存在呼吸道感染的常见致病菌与条件致病菌〔6〕,金黄色葡萄球菌、咽峡炎链球菌是常见的急性咽炎病原菌，金黄色葡萄球菌还可引起气管炎、肺炎、中耳炎等，表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、唾液链球菌、血链球菌为条件致病菌，机体免疫力低下时可引起化脓性感染。呼吸道病毒抗原成分阳性率较高，这一结果不能说明标本中存在有比较多的活病毒，但可说明话筒头部表面曾经附着或附着有呼吸道病毒，尤其是在呼吸系统感染高发季节与话筒使用频率高时，话筒是一个潜在的呼吸系统感染的传播媒介。此外还检出沙眼衣原体阳性 1 份。
话筒在社会生活中使用较为普遍，如家庭影院、社会公益活动、演出活动与 KTV 练歌房等。鉴于 2003 年高致病性禽流感病毒株（ H5N1） 的出现与 2009 年甲型流感病毒（ H1N1）引起的流感大流行，有关流感病毒与其他呼吸道病原体传播模式，引发了新一轮研究热潮，这有利于更深入地了解疾病发病机制，并可指导感染控制策略的制定〔2,7 -8〕.目前，尚无病原体经话筒传播的直接例证，但话筒是一个潜在的呼吸系统感染的传播媒介，定期的消毒和清洁处理是必要的。
参考文献
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