穿心莲内酯对高血脂兔的抗氧化及胆固醇代谢的作用

　　高脂血症由于血脂水平过高， 可引起动脉粥样硬化、 脂肪肝、 冠心病、 糖尿病、 肥胖症等严重影响人类健康的疾病， 是心脑血管疾病的诱发因素， 降脂治疗对预防和降低冠心病、 脑梗死等的发生率、 病死率具有重要意义。 高脂血症主要表现为脂质在血管内皮沉积引起动脉粥样硬化， 而动脉粥样硬化的进程比较缓慢， 往往容易受到患者忽视， 反而加重病情发展。

　　因此调整血脂水平及胆固醇代谢对延缓动脉粥样硬化等心血管疾病有积极作用， 而充分发挥中医药的特色和优势治疗高脂血症具有广阔的应用前景。

　　本实验在前期工作的基础上进一步研究穿心莲内酯对高血脂症新西兰兔的抗氧化及胆固醇代谢的作用， 为更全面的药效评价和更深入的机理研究提供依据。

　　1、 材料

　　1．1 动 物 SPF 级 新西兰家兔 ， 1．8 ～ 2．5 kg， 雌 雄各半 ， 由广东省医学实验动物中心提供， 实验动物生产许可证号 SCXK（粤） 2008－0002， 实验动物质量合格证号№4407207041。 动 物实验环境： 广东省中医研究所 SPF 级动物实验室， 设施使用许可证号 SYXK （粤） 2010－0059。

　　1．2 药物及试剂 穿心莲内酯， 广东省中医研究所制剂室提供，批号 20121109； 非诺贝特胶囊， 法国利博福尼制药公司， 批号16965； 血脂康胶囊 ， 北京北大维信生物科技有限公司 ， 批号20111108。 MDA 试 剂盒 、 SOD 试 剂盒 ， 南京建成生物工程研究所； 兔 ox－LDL 试剂盒、 兔 CETP 试剂盒、 兔 PLTP 试剂盒，上海博谷生物科技有限公司。 高脂饲料组成： 87．8％家兔基础饲料、 2％胆固醇、 10％猪油、 0．2％丙基硫氧嘧啶， 由广东省医学实验动物中心加工。

　　1．3 仪 器 5424 型小型高速离心机 （ 德 国 Eppendorf 公 司 ） ；Bio－RAD 680 酶标仪 （美国伯乐公司 ）； UV－2501PC 型紫外分光光度计 （日本 Shimadzu 公司）。

　　2、 方法

　　2．1 造模及给药 SPF 级新西兰兔 42 只， 雌雄各半 ， 随机分为空白对照组、 模型对照组、 非诺贝特组、 血脂康组、 穿心莲内酯高、 中、 低剂量组共 7 组， 每组 6 只。 新西兰兔先进行适应性饲养 1 周， 空白对照组给予普通饲料， 其余各组每兔每天给予高脂饲料 50 g， 造模喂养 4 周后按照分组继续进行高脂饲料喂养， 各给药组新西兰兔按剂量灌胃给予相应药物， 空白对照组、 模型对照组同法灌胃给予等体积蒸馏水， 连续给药 4 周。

　　2．2 指标测定 末次给药前各组新西兰兔禁食不禁水 16 h， 末次给药后 1 h 在耳动脉采血， 2 000 rpm 离心 10 min 制备血清，－80 ℃ 保 存 ， 黄嘌呤氧化法和硫代巴比妥酸显色法分别测定MDA 含 量 、 SOD 活 性 ； ELISA 法 测定 ox－LDL、 CETP、 PLTP的含量。

　　2．3 统 计学方法 采用统计软件 SPSS 15．0 对实验数据进行分析， 结果以 x ± s 表示， 统计学处理用单因素方差分析， 以 P ＜0．05 为差异有统计学意义。

　　3 结果

　　3．1 对抗氧化能力的影响 表 1 可 见 ， 给药后 ， 与空白对照组相比， 模型对照组新西兰兔血清 MDA、 ox－LDL 含量显著升高（P ＜0．01） ， SOD 活性明显降低 （P ＜0．01） ； 与模型对照组相比， 穿心莲内酯各剂量组新西兰兔血清 MDA、 ox－LDL 含量明显降低 （P ＜0．01）， 穿心莲内酯各剂量组新西兰兔血清 SOD 活性明显升高 （P ＜0．01）。

　　3．2 对胆固醇代谢的影响 表 2 可 见 ， 与空白对照组相比 ， 模型对照组新西兰兔血清 CETP、 PLTP 含量显著升高 （P ＜0．01）；与模型对照组相比， 穿心莲内酯各剂量组新西兰兔血清 CETP明显降低 （P ＜0．01）； 穿心莲内酯各剂量组新西兰兔血清 PLTP与模型组无明显差异 （P ＞0．05）。

　　4、 讨论

　　高脂血症可诱发氧化应激， 产生大量活性氧和自由基、 脂质过氧化物， 降低机体抗氧化能力。 CETP 是高密度脂蛋白（HDL） 的重要调控因子 ， 它可介导中性脂肪在脂蛋白之间的转运， 导致胆固醇酯从高密度脂蛋白 （HDL） 向极低密度脂蛋白 （VLDL） 和低密度脂蛋白 （LDL） 的净迁移， 使 HDL颗粒减小。 此外， CETP 还可促进 HDL2 向 HDL3 转化， 促进胆固醇逆转运。 但当 CETP 受到抑制时， ApoA－Ⅰ和 ApoA－Ⅱ的分解代谢受阻， HDL 升高， 胆固醇的逆转运亦相应增加。 PLTP在血浆中发挥脂质转运作用， 也在细胞高尔基体和内质网内参与脂蛋白的成熟与分泌。 PLTP 既参与 HDL 的代谢又影响 VLDL的产生， 当 PLTP 的活性受到抑制时可明显减少动物的动脉粥样硬化。

　　实 验结果显示 ， 穿心莲内酯能明显提高血清 SOD活力， 降低 MDA、 ox－LDL 含量， 由此增加抗氧化活力， 并能降低 CETP 的活性， 促进胆固醇逆转运， 促进 HDL 升高。 穿心莲内酯对 PLTP 结果无影响， 提示 PLTP 并非穿心莲内酯促进胆固醇代谢的途径。

　　前期研究已发现穿心莲内酯对新西兰兔实验性高脂血症的血脂水平具有明显的改善作用， 结合本实验研究， 提示穿心莲内酯对高血脂症新西兰兔调脂效应、 抗氧化能力及胆固醇代谢等均有明显改善作用， 达到调血脂及预防动脉粥样硬化形成的目的， 为将穿心莲内酯开发为有效物质明确、 作用机理清楚的创新药物提供了实验依据。

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