林业论文
0 引言
国槐（Sophora japonica）原产于中国北方，属于豆科蝶形花亚科槐属（Sophora L.）落叶乔木，在园林中适用于行道树和庭荫树，适应性及抗性强，它的花和坚果可作为黄色染料，也可入药[1].花粉活力是花粉质量的重要生理指标及评估花粉细胞活性的依据之一，植物的受精与花粉的萌发率有十分重要的作用，细胞学实验和杂交育种的成败与花粉活力有关[2].花粉是植物种质的主要形式，它在有性繁殖中发挥着重要作用。不同种质间的花期不同，为了能更好地利用花粉，要对花粉进行不同条件的保存以延长花粉的寿命[3].研究花粉保存条件，可以解决制种中花期不同的问题[4],可以使植物在不同的花期进行授粉杂交，还可以使不在同一地点的植物进行杂交授粉，重要的是能延长花粉的寿命[5].木本植物种质资源保存的重要方法之一是花粉的保存，花粉保存也是开展人工杂交的重要技术环节。
花粉的寿命很短，为了在较长时间内保持花粉的生活力，需要花粉在特殊条件下进行保存。贮存花粉的方法有很多，但不同植物的花粉对贮存条件的要求也不相同[6].番茄花粉在低温下，花粉寿命延长，且花粉有相对高的存活率；雪松花粉在冰箱冷藏室保存数年，其花粉依然具有较高的存活率；而鹅掌楸花粉不宜贮藏在4℃条件下[7].就目前对国槐花粉的研究而言，仅限于花粉形态学方面的研究，如赵燕等[3]对其花粉的形态进行了比较，杨德奎等[5]对山东槐属植物的花粉亚显微形态进行研究，而对花粉保存方法及活力的研究很少报道。
笔者以国槐花粉为材料，研究其在不同培养基上萌发情况及花粉的萌发时间，讨论花粉在不同浓度的蔗糖和硼酸条件下的萌发情况，确定适合花粉保存的方法，旨在为研究槐属植物的杂交育种提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
在山东省林业科学研究院收集处于盛花期的国槐花粉。实验于2014年7月在山东省林业科学研究院实验室进行。琼脂、蔗糖生产于Biotopped公司，硼酸由河南焦作市化工三厂生产，显微镜由北京泰克仪器有限公司制造。
1.2 实验方法
1.2.1 花粉的采集及处理 选择当天盛开的花朵，将花粉磕到硫酸纸上，包好，放在剩有干燥剂的干燥器中分别放于室温（27℃左右）和冰箱冷藏室（4℃），保存待用。
1.2.2 培养基配方 采用琼脂培养基萌发法。按照蔗糖、琼脂、硼酸浓度设计6种培养基，配方如表1所示。
1.2.3 萌发时间的测定 将培养基滴于载玻片上并铺展开，将花粉粒均匀散在凝固的培养基上，每种培养基上的花粉量应保持大致相同，放置于25℃培养箱中培养，每隔10 min拿到光学显微镜下观察，每个处理3个重复，每个重复随机观察 5 个视野，以确定花粉萌发时间。
1.2.4 花粉萌发率的测定 按照 1.2.3 中的方法进行花粉培养，萌发60 min后，拿到光学显微镜下观察，每个处理3个重复，每个重复随机观察5个视野，观察花粉的萌发情况。选择花粉萌发率，计算见式（1），最高的培养基用作下一步实验。
花粉萌发率=（萌发花粉粒数目/观察的总花粉粒）×100%…… （1）
1.2.5 花粉保存方法的确定 每天在相同的时间将保存备用的花粉进行培养，萌发60 min后，拿到光学显微镜下观察花粉的萌发情况，每个处理3个重复，每个重复随机观察5个视野，直至花粉不再萌发。对比统计的2组数据，以确定于花粉的保存方法。