生殖道感染者的支原体感染状况及耐药性研究

　　摘    要：　目的:了解女性生殖道感染者的支原体感染状况及耐药性, 为临床治疗提供实验依据, 减少抗生素的滥用。方法:采用珠海迪尔公司试剂盒, 对我院2 897例疑似生殖道感染患者的标本进行支原体培养及药敏实验检测。结果:2 897例患者中2 265例支原体阳性 (78.2%) , 其中Uu阳性者1 536例 (53.1%) , Mh阳性者68例 (2.3%) , Uu+Mh阳性者661例 (22.8%) 。药敏实验显示, 对支原体敏感性高的抗生素分别为强力霉素、交沙霉素、美满霉素、四环素;耐药性高的药物分别为红霉素、左氧氟沙星、氧氟沙星、环丙沙星。结论:女性生殖道感染以Uu感染为主, 其耐药形势严峻, 临床治疗支原体感染应以药敏试验为依据, 合理选择抗生素;对于多耐菌株可探索中药治疗途径, 中西医结合降低细菌耐药率, 提高临床治愈率。

　　关键词：　女性生殖道感染; 支原体感染; 抗生素; 耐药性;

　　Abstract：　Objective:To analyze the infection and drug resistance of mycoplasma in female genital tract aiming to provide reliable experimental basis for clinical treatment and reducing bacterial resistance.Methods:2 897 cases with suspected reproductive tract infections were detected with Mycoplasma culture and drug sensitivity test using Zhuhai Deere Company kit.Results:The positive numbers of Mycoplasma were 2 265 (78.2%) among the 2 897 sample;1 536 cases (53.1%) were Uu positive;68 cases (2.3%) were Mh positive;661 cases (22.8%) were both Uu and Mh positive;the high susceptibility to 12 antimicrobial drugs in sequence were DOX, JOS, MIN, TET;the high resistance drugs in sequence were ERY, LEV, OFL, CIP.Conclusion:Uu infection is the main type in female genital tract infections and the situation of drug resistance is severe.The treatment of mycoplasma infection should based on the susceptibility test and rational selection of antibiotics.The treatment of multi-resistant strains may use Traditional Chinese Medicine, and integrated Traditional Chinese and Western Medicine may reduce the bacterial resistance rate, improve the clinical cure rate.

　　Keyword：　Female Genital Tract; Mycoplasma Infection; Antibiotic; Drug Resistance;

　　当今女性生殖道支原体感染率越来越高, 加之抗生素的广泛应用及滥用, 支原体的耐药率也愈来愈高, 由此给临床治疗带来一系列的困难。引起人类感染的支原体主要分为解脲脲原体 (Ureaplasmaurealyticum, Uu) 、人型支原体 (Mycoplasma hominis, Mh) , 它们可侵犯尿道及宫颈, 引起相应炎症。因此, 探讨女性生殖道感染者的支原体感染状况及耐药性有着极其重要的临床意义。

　　1 资料与方法

　　1.1 一般资料

　　研究对象来源于我院妇科2013年—2015年门诊及住院患者女性生殖道标本, 临床初步诊断均为生殖道感染, 年龄20~40岁。

　　1.2 标本采集

　　所有患者在服用抗生素前或停用抗生素1周后取样, 采样前均给予无菌生理盐水清洗阴道口, 用无菌棉签擦干宫颈多余黏液, 之后另一无菌拭子在宫颈管内1~2cm处取宫颈分泌物, 旋转拭子2周, 停留20s后取出拭子。注意拭子不能接触阴道壁, 取样后拭子置无菌试管内立即送检。

　　1.3 主要试剂及仪器

　　支原体分离培养药敏试剂盒 (珠海迪尔生物工程有限公司) 主要由支原体培养基和检测卡组成。每份检测卡包括阳性对照孔、阴性对照孔、药敏孔及分离培养孔, 药敏孔抗菌药物为四环素TET、左氧氟沙星LEV、红霉素ERY、交沙霉素JOS、强力霉素DOX、环丙沙星CIP、氧氟沙星OFL、美满霉素MIN、罗红霉素ROX、阿奇霉素AZI、克拉霉素CLA、司巴沙星SPA。

　　1.4 检测方法

　　按照试剂盒说明书的要求进行操作:用无菌吸头吸取培养基100μL加入空白孔, 将采集的标本拭子插入培养瓶, 在靠近液面上方的瓶壁挤压旋转拭子数次, 使拭子中样本渗入, 充分混匀接种标本中的培养基, 取100μL加入检测卡的各孔中 (除C-孔) , 各孔滴加2滴无菌矿物油, 盖上检测卡盖, 置35℃~37℃孵箱培养, 每种药物设高 (上孔) 、低 (下孔) 两个浓度, 48h后观察结果。

　　1.5 结果判断

　　阴阳性结果判定标准:黄色或橙黄色→阴性 (-) ;清晰透明红色→阳性 (+) ;混浊红色→污染, 上孔 (-) 下孔 (-) 为敏感 (S) ;上孔 (-) 下孔 (+) 为中度敏感 (I) ;上孔 (+) 下孔 (+) 为耐药 (R) 。注意:C-孔 (空白孔) 应为阴性, 若为阳性表示有污染, 本次试验无效;C+孔 (对照孔) 阴性 (48h) , 可报告无Uu和Mh生长;C+孔 (对照孔) 阳性, 应观察和记录其余各孔的结果。

　　1.6 统计学处理

　　采用SPSS19.0软件进行统计学分析。两组数据间采用t检验差异分析, 多组数据间采用方差分析中的多重比较分析。以P<0.05为差异有统计学意义。

　　2 结果

　　2.1 支原体检测阳性分离率

　　结果2 897例患者中2 265例支原体阳性 (78.2%) , 其中Uu阳性者1 536例 (53.1%) , Mh阳性者68例 (2.3%) , Uu+Mh阳性者661例 (22.8%) , 见表1、图1。

　　表1 女性生殖道支原体感染分布表

　　2.2 支原体感染的耐药情况

　　在相应的药敏实验结果中, 女性支原体感染者对所选抗生素敏感性较高的有强力霉素、交沙霉素、美满霉素及四环素, 敏感性较差的为红霉素、左氧氟沙星、氧氟沙星及环丙沙星, 见表2、图2。

　　3 讨论

　　支原体是一类原核微生物, 在性成熟的女性生殖道中有Uu、Mh正常寄居, 仅当达到一定数量后才会致病。引起人类感染的支原体主要分为Uu及Mh, 它们可侵犯尿道及宫颈, 引起相应炎症:若上行感染, 可引起子宫内膜炎、盆腔炎、输卵管炎[1];垂直传播时可致子宫内感染, 引起早产、流产、胎儿宫内发育迟缓、低体重儿, 甚至死胎等不良后果。当前, 随着我国生育二胎政策的放开, 二胎的优生也显得尤为重要。因此, 探讨女性生殖道感染者的支原体感染状况及耐药性不仅有着重要的临床意义, 对我国出生人口素质的提高也将有着极其重要的推动作用。

　　图1 女性生殖道支原体感染类型分布与构成

　　图2 不同类型支原体感染患者对12种抗生素的敏感性对比 (P0.05)

　　本次研究的2 897例患者中2 265例为支原体阳性, 阳性率高达78.2%, 一方面可能是由于女性生殖道的特殊生理结构;另一方面, 女性生殖道内环境及其p H值对支原体的生存更适合。研究结果显示, Uu型感染者最多, 占67.8%;其次为Uu+Mh混合感染, 占29.2%;Mh型感染最少, 仅为3.0%, 这与国内外相关文献报道是一致的。从相应的药敏试验中可以发现:女性支原体感染者对所选抗生素敏感性较高的有强力霉素、交沙霉素、美满霉素及四环素, 敏感性较差的为红霉素、左氧氟沙星、氧氟沙星及环丙沙星。临床治疗支原体感染时, 常经验性地使用喹诺酮类、大环内酯类抗生素, 导致了此类抗生素的滥用, 特别是喹诺酮类药物的盲目使用, 导致支原体染色体上旋转酶基因突变, 引起其DNA旋转酶靶位改变, 使得喹诺酮类药物阻断支原体DNA复制能力大大降低, 最终导致支原体对喹诺酮类药物的耐药性大大增强;而由于四环素类抗生素可透过胎盘屏障进入胎儿体内, 沉积在牙齿和骨的钙质区内, 引起胎儿牙齿变色, 牙釉质再生不良及抑制胎儿骨骼生长, 且可能有致畸胎作用, 所以临床中极少使用, 由此可能导致了四环素类抗生素对支原体的敏感性比较高。

　　表2 支原体感染患者对12种抗生素的药敏实验结果

　　因此, 针对女性生殖道感染的现状, 微生物实验室在液体培养支原体阳性率高的情况下, 应及时优化实验方案, 比如液-固培养相结合、PCR分子鉴定等手段, 提供及时可靠的科学实验数据。临床治疗时, 我们应该减少抗生素的不合理使用及滥用, 加大医疗宣传力度, 制定相应的政策, 避免经验用药, 根据正确的药敏结果, 选择合理有效的抗生素, 规范治疗;出现多重耐药感染时, 应考虑联合抗生素用药, 或者是中药与西药合用等方式, 降低细菌临床耐药率。

　　参考文献:

　　[1]Manhart LE.Mycoplasma genitalium:An emergent sexually transmitted disease[J].Infect Dis Clin North Am, 2013, 27 (4) :779-792.
　　[2]Bayraktar MR, Ozerol IH, Gucluer N, et al.Prevalence and antibiotic susceptibility of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum in pregnant women[J].Int J Infect Dis, 2010, 14 (2) :90-95.
　　[3]Guven MA, Dilek U, Pata O, et al.Prevalance of Chlamydia trochomatis, Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis infections in the unexplained infertile women[J].Arch Gynecol Obstet, 2007, 276 (3) :219-223.
　　[4]Francesco MAD, Caracciolo S, Bonfanti C, et al.Incidence and antibiotic susceptibility of Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum isolated in Brescia, Italy, over 7 years[J].J Infect Chemother, 2013, 19 (4) :621-627.
　　[5]Ona S, Molina RL, Diouf K.Mycoplasma genitalium:An Overlooked Sexually Transmitted Pathogen in Women[J].Infect Dis Obstet Gynecol, 2016, 2016 (3) :4 513 089-4 513 097.
　　[6]Korte JE, Baseman JB, Cagle MP, et al.Cervicitis and genitourinary symptoms in women culture positive for Mycoplasma genitalium[J].Am J Reprod Immunol, 2006, 55 (4) :265-275.
　　[7]Oakeshott P, Aghaizu A, Hay P, et al.Is Mycoplasma genitalium in women the"New Chlamydia?"A community-based prospective cohort study[J].Clin Infect Dis, 2010, 51 (10) :1 160-1 166.
　　[8]梁培松, 王结珍.某地区泌尿生殖道支原体培养及药敏分析[J].国际检验医学杂志, 2012:23 (3) :1 615-1 617.
　　[9]余璟璐, 江丽莉, 陈东红, 等.丽水地区连续五年泌尿生殖道支原体感染监测及药物敏感性分析[J].中国卫生检验杂志, 2012, 18 (4) :2 748-2 750.
　　[10]王艳军, 雷海云.乌鲁木齐市2560例泌尿生殖道支原体感染及耐药性分析[J].国际检验医学杂志, 2014:10 (2) :1 220-1221.
　　[11]韦柳华, 刘滨, 莫善颖, 等.3年非淋菌性尿道炎患者支原体感染及耐药性变迁[J].中华医院感染学杂志, 2009, 15 (2) :2 513-2 515.
　　[12]Manhart LE, Jensen JS, Bradshaw CS, et al.Efficacy of Antimicrobial Therapy for Mycoplasma genitalium Infections[J].Clin Infect Dis, 2015, 61 Suppl 8 (3) :S802-817.
　　[13]Bebear CM, Renaudin H, Charron A, et al.In vitro activity of trovafloxacin compared to those of five antimicrobials against mycoplasmas including Mycoplasma hominis and Ureaplasma urealyticum fluoroquinolone-resistant isolates that have been genetically characterized[J].Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44 (9) :2 557-2 560.
　　[14]Vernillo AT, Rifkin BR.Effects of tetracyclines on bone metabolism[J].Adv Dent Res, 1998, 12 (2) :56-62.
　　[15]Haggerty CL, Totten PA, Astete SG, et al.Failure of cefoxitin and doxycycline to eradicate endometrial Mycoplasma genitalium and the consequence for clinical cure of pelvic inflammatory disease[J].Sex Transm Infect, 2008, 84 (5) :338-342.
　　[16]Horner P, Blee K, Adams E.Time to manage Mycoplasma genitalium as an STI:but not with azithromycin 1g[J].Curr Opin Infect Dis, 2014, 27 (1) :68-74.
　　[17]Tagg KA, Jeoffreys NJ, Couldwell DL, et al.Fluoroquinolone and macrolide resistance-associated mutations in Mycoplasma genitalium[J].J Clin Microbiol, 2013, 51 (7) :2 245-2 249.
　　[18]Chrisment D, Charron A, Cazanave C, et al.Detection of macrolide resistance in Mycoplasma genitalium in France[J].J Antimicrob Chemother, 2012, 67 (11) :2 598-2 601.