香蕉种植中印楝渣生物药肥的应用效果分析(2),植物保护论文

　　2 结果与分析

2.1 生防菌 HN11对香蕉枯萎病菌的抑制作用
平板对峙试验结果（图 1a）表明，生防菌解淀粉芽孢杆菌 HN11对香蕉枯萎病菌 Foc4有明显的拮抗活性，能有效抑制香蕉枯萎病 Foc4的菌丝生长，抑菌率为 721%.牛津杯法试验结果（图 1b）显示，以 NA和 Landy为培养基时，HN11菌株的发酵液对Foc4病原菌产生明显的抑菌圈，其中 NA培养基发酵液的抑菌圈最大；以察氏培养基 CDM发酵时，不能产生抑菌圈。这表明以硝酸钠为唯一碳源的 CDM培养基不利于生防菌 HN11产生抑菌活性物质；NA培养基是生防菌 HN11最佳的培养基，有利于生防菌发酵产生抑菌活性物质。
　　

　　图一。　　

　　2.2 生防菌与印楝渣的相容性
生防菌HN11在以印楝渣为唯一碳源的培养基中生长时，培养 48h后，发酵液 D600nm达到 0766,与葡萄糖相当（0745），但比可溶性淀粉（0823）低，比玉米粉（0583）高。此外，印楝渣的甲醇、乙酸乙酯和水提取液均没有对生防菌解淀粉芽孢杆菌 HN11产生抑菌圈。以上结果表明，解淀粉芽孢杆菌HN11与印楝渣具有良好的相容性，可以在以印楝渣作为唯一碳源的培养基中生长。因此，本研究以印楝渣作为生防菌 HN11的培养基和吸附载体制备印楝渣生物药肥。
　　
　　2.3 印楝渣生物药肥对香蕉生长的促进作用
印楝渣生物药肥对香蕉生长的影响见图 2,印楝渣未经发酵腐熟直接施用会对香蕉产生药害（图2a），而发酵腐熟制备的印楝渣生物药肥对香蕉没有产生药害现象（图 2b）。当印楝渣生物药肥的施用量（w）为 5%和 10%时，2个月后处理组香蕉的长势均好于对照。　

　　表一。　　

由表 1可知，2个处理组香蕉的鲜质量、干质量、株高和茎粗均有不同程度的提高，与对照的差异达到显着水平；但施用量（w）为 5%和 10%时，两处理组间的差异不显着。以上结果表明，印楝渣通过与生防菌 HN11发酵腐熟施用可以避免对香蕉产生药害，并且制成的印楝渣生物药肥能够明显地促进香蕉生长。
　　

　　图2. 　　

　　
　　2.4 印楝渣生物药肥对香蕉枯萎病的影响图 3为施用印楝渣生物药肥对香蕉枯萎病的影响。在不施用印楝渣生物药肥和不接种香蕉枯萎病Foc4病原菌情况下（图 3D），香蕉正常生长，没有枯萎现象，病情指数为 0.接种 Foc4病原菌而不施用印楝渣生物药肥时（图 3C），30d后该对照组香蕉大部分表现出枯萎症状，病情指数达到了 90%.当接种 Foc4病原菌并施用 w为5%和10%印楝渣生物药肥（图 3B、3A）时，30d后这 2个处理组香蕉大部分植株保持旺盛长势，仅少数植株的叶缘出现轻微枯黄现象，病情指数分别为 20和 25,与对照组差异显着。统计分析表明，施用 w为 5%和 10%印楝渣生物药肥对香蕉枯萎病的防病效果分别达到 722%和778%.以上结果表明，印楝渣生物药肥可以有效控制香蕉枯萎病的发生。

图三。

2.5 抑菌机理分析
与对照（图 4a）相比，添加印楝渣（图 4b）和生防菌株 HN11（图 4c）均能降低土壤中香蕉枯萎病菌的孢子数，生防菌 HN11的作用最明显，与对照的差异极显着（图 5）。这表明印楝渣生物药肥中的印楝渣和生防菌 HN11成分均对香蕉枯萎病菌起到抑制作用，其中生防菌 HN11是最主要的抑菌成分。进一步通过扫描电镜观察生防菌 HN11处理前后香蕉枯萎病菌菌丝形态结构的变化，结果见图 6.从图 6可以看出，对照组香蕉枯萎病菌菌丝表面光滑完整（图 6a），而经生防菌 HN11作用后，香蕉枯萎病菌菌丝表面粗糙，出现不规则皱褶，部分菌丝断裂、凹陷（图 6b）。
　　

　　图 4 .

　　图六。

　　
　　3 讨论与结论

土壤中香蕉枯萎病病原菌是引起香蕉枯萎病害的主要因素，而土壤中生防菌的含量是影响防病效果的关键因素[8,13].在香蕉枯萎病的生物防治上，生防菌如果没有一个合适的载体进入土壤后很难存活，因此单一或少数生防菌的施用难以达到有效的防治效果[14];将生防菌与充分腐熟的有机肥混合使用的防治效果较好[35,9].生防菌在有机肥协助下形成的“基质 -菌群”生态系统有利于调节土壤的微生态环境。改变香蕉根际土壤微生物的生态特征和物理化学特性，从而起到防病、抑病作用[8,14].
　　
　　本研究将印楝渣作为生防菌株 HN11的培养基进行发酵腐熟，制成印楝渣生物药肥使用，印楝渣不仅为生防菌株 HN11提供养分，还作为其吸附载体，保证其发挥作用，这与生防菌 HN11和印楝渣具有良好相容性有关，并且该生防菌可以在以印楝渣为唯一碳源的培养基中生长繁殖。印楝渣生物药肥的盆栽试验结果表明，印楝渣生物药肥不仅可以促进香蕉的生长，而且可以显着降低香蕉植株枯萎病的发病程度。施用 w为5%和10% 的印楝渣生物药肥处理组的病情指数比对照明显降低，这可能是由于印楝渣生物药肥中所含的生防菌解淀粉芽孢杆菌HN11在香蕉根际定殖后，对病原菌孢子萌发起到良好的抑制作用，破坏菌丝形态结构，保护香蕉根系免受病原菌侵入，起到防病作用，这与 Yuan等[9]的研究结果相似。
　　
　　有研究表明，印楝渣还含有少量的抑菌活性物质，对鹰嘴豆 GicerarietinumLinn.等植物的病害也有一定防治效果[1517].本试验也表明印楝渣对香蕉枯萎病菌起到一定的抑制作用，但是效果不如生防菌解淀粉芽孢杆菌 HN11明显，这说明生防菌 HN11是印楝渣生物药肥的主要药效成分，而印楝渣主要为生防菌繁殖以及香蕉生长提供营养物质，起到载体和肥效作用。印楝渣对香蕉生长的试验结果表明，未经发酵腐熟直接施用高剂量印楝渣（w大于5%）会引起香蕉伤苗、叶片枯黄、抑制香蕉生长。这可能是由未腐熟的印楝渣施入土壤后，发酵耗糖争氮，产生有毒物质引起的。赵欢欢等[18]研究也表明，植物废弃物（如茶枯）未经腐熟直接大量使用，不仅会减少香蕉结果率和果梳个数，而且使香蕉更易感染香蕉枯萎病和死亡。本研究将生防菌株 HN11添加到印楝渣中，既加快了印楝渣的腐熟进程，又克服了其直接使用会对植物造成伤苗的难题，还可起到防治香蕉枯萎病的作用。
　　
　　印楝渣作为杀虫植物的农副产品，资源较为丰富，与生防菌发酵制备生物药肥，使之合理使用，一方面可以变废为宝，避免资源浪费；另一方面可为香蕉枯萎病的生物防治提供技术支持。
　　
　　参考文献：
　　
[1] WUYL,YIGJ,PENGXX,etal.SystemicacquiredresistanceinCavendishbananainducedbyinfectionwithanincompatiblestrainofFusarium oxysporum f.sp.
cubense[J].JPlantPhysiol,2013,170（11）：10391046.
[2] 杨江舟，张静，胡伟，等。韭菜根系浸提液对香蕉枯萎病和土壤微生物生态的影响[J].华南农业大学学报，2012,33（4）：480487.
[3] 张志红，李华兴，韦翔华，等。生物肥料对香蕉枯萎病及土壤微生物的影响[J].生态环境，2008,17（6）：24212425.
[4] 匡石滋，李春雨，田世尧，等。药肥两用生物有机肥对香蕉枯萎病的防治及其机理初探[J].中国生物防治学报，2013,29（3）：417423.
[5] 肖相政，刘可星，廖宗文。生物有机肥对番茄青枯病的防效研究及机理初探[J].农业环境科学学报，2009,28（11）：23682373.
[6] ZHANGSS,RAZAW,YANGXM,etal.ControlofFusariumwiltdiseaseofcucumberplantswiththeapplicationofabioorganicfertilizer[J].BiolFertilSoils,2008,44:10731080.
[7] 何欣，郝文雅，杨兴明，等。生物有机肥对香蕉植株的生长和香蕉枯萎病防治的研究[J].植物营养与肥料学报，2010,16（4）：978985.
[8] 张志红，冯宏，肖相政，等。生物肥防治香蕉枯萎病及第 4期赖多，等：印楝渣生物药肥对香蕉生长和香蕉枯萎病的影响 35对土壤微生物多样性的影响[J].果树学报，2010,27（4）：575579.
[9]YUANJ,RUANYZ,WANGBB,etal.PlantgrowthpromotingrhizobacteriastrainBacillusamyloliquefaciensNJN6enrichedbioorganicfertilizersuppressedFusariumwiltandpromotedthegrowthofbananaplants[J].JAgricFoodChem,2013,61（16）：37743780.
[10]FUL,RUANYZ,TAOCY,etal.ContinousapplicationofbioorganicfertilizerinducedresilientculturablebacteriacommunityassociatedwithbananaFusariumwiltsuppression[J].SciRep,2016,6:27731.
[11]李国良，姚丽贤，杨苞梅，等。有机肥与生防菌结合防治香蕉枯萎病的初步研究[J].中国土壤与肥料，2012（2）：6772.
[12]许志刚。普通植物病理学[M].北京：中国农业出版社，2002:236262.
[13] SARAVANANT,MUTHUSAMYM,MARIMUTHUT.EffectofPseudomonasfluorescensonFusariumwiltpathogeninbananarhizosphere[J].JBiolSci,2004,4（2）：192198.
[14]蔡燕飞，廖宗文，章家恩，等。生态有机肥对番茄青枯病及土壤微生物多样性的影响[J].应用生态学报，2003,14（3）：349353.
[15]SINGHUP,SINGHHB,SINGHRB.Thefungicidaleffectofneam（Azadirachtaindica）extractonsomesoilbornepathogenofgram（Cicerarietinum）[J].Mycologia,1980,72（6）：10771093.
[16] SARAVANANT,MUTHUSAMYM,MATIMUTHUT.Developmentofintegratedapproachtomanagethefusarialwiltofbanana[J].CropProt,2003,22（9）：11171123.
[17]KUMARD,SINGHKP,JAISWALRK.EffectoffertilizersandneemcakeamendmentinsoilonsporegerminationofArthrobotrysdactyloides[J].Mycobiology,2005,33（4）：194199.
[18]赵欢欢，叶仲辉，杨文杰，等。茶枯对香蕉生长和香蕉枯萎病的影响[J].西南大学学报（自然科学版），2015,37（9）：2530.