相同条件下，Silica-Br-C18和 Silica-C18-GMMA的蛋白质排阻回收实验数据见表 2.Silica-Br-C18通过 SI-ATRP 反应在硅胶表面只接枝 C18烷基链，疏水性较强，与 BSA 通过静电作用结合，其结合BSA 的量为 22. 9%.Silica-C18-GMMA 与 BSA 的结合量为 12. 4%,低于 Silica-Br-C18,这是因为该材料外表面的二醇基具有亲水性，对 BSA 具有屏蔽作用，使其不能进入内表面，说明新型反相限进材料对BSA 具有排阻能力。
2.3. 2 Silica-Br-C18-GMMA 材料对 SDM 和 OTC的吸附能力。
以 SDM 和 OTC 作为小分子模型，研究 Silica-Br-C18-GMMA 对小分子的吸附性能，结果见图 5.随着 SDM 初始浓度的增大，吸附量逐渐增大，当浓度大于 0. 9 mmol/ L 后趋于吸附平衡，最大吸附量为 18. 08 mg/ g.随着 OTC 初始浓度的增大，吸附量逐渐增大，当浓度大于 0. 15 mmol/ L 后，吸附量基本保持不变，最大吸附量为 4. 4 mg/ g.Silica-Br-C18-GMMA 材料内表面键合非极性的十八烷基链，与 SDM 和 OTC 的相互作用主要是疏水作用。从二者结构看，OTC 中含有 6 个羟基，极性大于 SDM,所以 OTC 的疏水作用小于 SDM,故 SDM 的吸附量大于 OTC 的吸附量；从空间位阻看，可能由于限进材料外表面具有大量羟基，分子量小的 SDM 更容易进入内表面与十八烷基链产生相互作用。SDM 和OTC 在新型反相限进材料上都有一定量的吸附，证明新型反相限进材料除了外表面具有亲水的二醇基之外，其内表面的 C18链具有萃取小分子物质的能力，体现出新型反相限进材料的双官能团特点。
2.4 实际样品的测定。
用 HPLC 检测处理过的牛奶样品，结果未检测到 OTC.以新型反相限进材料为萃取基质，进行OTC 加标回收试验。
使用新型反相限进材料结合 HPLC 分离富集并检测牛奶样品中的 OTC.图 6a 为 9 mg/ L OTC 标准溶液的色谱图，出峰时间为 9 min;图 6b 为牛奶加标 OTC（9 mg/ L）样品经新型反相限进材料处理的液相色谱图；图 6c 为牛奶空白样品。以 OTC 的峰面积 y 对质量浓度 x（mg/ L）做标准曲线，线性方程为 y=15. 907x-41 617,相关系数为 0. 992 7,表明OTC 在对应的 4 ~ 10 mg / L 范围内具有良好的线性关系。OTC 的平均加标回收率为 89. 19%（n = 3），其 RSD 为 3. 03%.
3 结论。
本文采用二步 SI-ATRP 技术将甲基丙烯酸十八烷基酯和 GMA 键合到硅胶表面，制得新型反相限进材料。傅里叶变换红外光谱分析、元素分析和热重分析数据均表明两种功能单体接枝成功。考察新型反相限进材料结合固相萃取小柱对蛋白质大分子的排阻性能，通过对比发现其对蛋白质的排阻效果良好；通过吸附实验发现其对结构不同的小分子物质具有一定的吸附能力，说明内表面的十八烷基链具有萃取能力。该材料作为吸附剂，用于分离富集牛奶样品中的 OTC,效果良好。该新型反相限进材料有望应用于含有白蛋白、免疫球蛋白或血纤维蛋白原等大量蛋白质的复杂生物样品的前处理和药物小分子的检测。
