化工工程师论文(精选范文10篇)之第七篇
摘要:利用单因素试验筛选培养基碳氮源及氮源分别为玉米粉及豆柏粉, 正交试验确定最佳培养时间为2天时, 最佳液体发酵条件转速200r/min, 温度30℃, 装液量为50ml∕250ml, 起始p H5.0.
关键词:白地霉; 液体发酵; 生物量; 正交实验;
1、绪论
白地霉是一种常见的真菌,[1]菌体细胞含有蛋白质,具有十分重要的经济价值。[2,3,4,5]目前对白地霉液体发酵系统研究报道较少,本实验计划通过摇瓶液体培养法,确定白地霉药瓶液体发酵的最佳培养基和最佳培养条件,进一步确定最佳的放大培养工艺,为提高营养成分和有效成分提供理论数据。[4,5]
2、供试菌种与方法
2.1 供试菌种
白地霉保藏菌种:由长春医学高等专科学校提供。
2.2 试验方法
2.2.1 碳源筛选
碳源选择葡萄糖、玉米粉、可溶性淀粉、纤维饲料、麸皮,氮源为蛋白胨,其余成份不变。按10%接种量接入100ml培养基中,转速150r/min, 29℃培养3d,测其生物量。
2.2.2 氮源筛选
氮源选择蛋白胨、豆柏粉、鱼粉、棉子饼粉、尿素,碳源为葡萄糖,其余成份不变。10%接种量接入100ml培养基中,转速150r/min, 29℃培养3d,测其生物量。
2.2.3 发酵周期试验
碳源及氮源分别为为葡萄糖及蛋白胨,配制摇瓶液体培养基,培养温度为29℃,150r/min,接种量10%,装液量100ml,培养1d、2d、3d、4d、5d,并测定其生物量。
2.2.4 液体发酵条件的优化[7]
利用玉米粉和豆柏粉为碳氮源,配制摇瓶液体培养基,设计四因素 (温度、转速、装液量、起始p H) ,分别培养2天。正交试验确定最佳组合。
表1 正交试验设计方案
2.2.5 生物量测定[8]
将发酵液用40目筛过滤、抽滤,用蒸馏水反复冲洗,60℃烘干至恒重,精确称重,计算生物量。
生物量 (g/L) =菌丝体干重 (g) /发酵液体积 (ml) ×1000
3、结果与分析
3.1 碳源筛选结果
表2 碳源对生物量的影响
从表2可知:碳源利用率为葡萄糖>玉米粉>纤维饲料>可溶性淀粉>麸皮,其中玉米粉成本较低,可用作工业发酵。
3.2 氮源的筛选结果
表3 氮源对生物量的影响
从表3可知,氮源利用率蛋白胨>豆柏粉>鱼粉>棉子饼粉>尿素,其中豆柏粉成本较低,可用作工业发酵。
3.3 发酵周期试验结果
表4 发酵周期及生物量的变化值
白地霉液体摇瓶发酵曲线图
由表4和上图可知:白地霉菌丝体生物量第2天与第3天量基本一致,第4天开始衰退。从时间成本考虑,选择2天作为最佳培养时间。
3.4 液体发酵条件的正交试验结果
表5 正交试验结果
由表5可知,对生物量的影响因素为转速>装液量>温度>起始p H.最佳培养条件为转速为200r/min,温度为30℃,装液量50ml/250ml,起始p H5.0.
4、结论
本实验通过单因素试验确定白地霉液体发酵的适宜碳源及氮源为玉米粉及豆柏粉,最佳培养时间为2天。通过正交试验确定白地霉最佳液体深层发酵条件为:转速200r/min,温度30℃,起始p H5.0,装液量50ml/250ml.
参考文献
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