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正交试验优化桔梗总皂苷提取工艺(本科) (药学)

来源:学术堂 作者:姚老师
发布于:2014-11-05 共1711字

  题目:正交试验优化桔梗总皂苷提取工艺

  目 录

  摘要(详见正文)

  关键词

  前言

  1 实验材料

  1.1 药材
  1.2仪器
  1.3试剂

  2 方法与结果

  2.1 桔梗总皂苷的测定方法
  2.1.1 对照品的配制
  2.1.2 供试品溶液的制备
  2.1.3 含量测定
  2.2 浸膏得率测定方法
  2.3 正交试验设计
  2.3.1 药材吸水率考察
  2.3.2 正交试验设计
  2.3.3 正交试验及结果分析
  2.4 验证实验

  3 讨论

  参考文献

  致谢


  前言:

  桔梗为桔梗科植物桔梗Platycodon grandif1orum ( Jacq. )A. DC.的干燥根,其主要活性成分为桔梗皂苷。桔梗性平,味苦、辛,具有宣肺,利咽,祛痰,排之功效,用于咳嗽痰多,胸闷不畅,咽痛音哑等 [1]。现代药理学研究表明,桔梗皂苷具有抗炎、祛痰、保肝、降血糖、抑制脂肪吸收、抗氧化、抗菌、抗肿瘤等广泛的药理作用[3]。目前, 提取桔梗总皂苷的主要方法有水提法、超声法、超临界CO2提取法等[4]。为了制定科学经济的桔梗最佳提取工艺,本文以桔梗总皂苷为考察指标,采用正交实验法对桔梗的提取工艺进行研究。

  1 实验材料

  1.1 药材

  品名:桔梗
  批号:90721
  生产企业:安徽海鑫中药饮片有限公司

  1.2 仪器

  UV757紫外可见分光光度计(上海精科)
  DZF-200型真空干燥箱(上海浦东跃欣科学仪器厂)
  AG285型电子天平(德国METTLER公司)
  旋转蒸发器RE-52A(上海亚荣生化仪器厂)
  玻璃仪器

  1.3 试剂

  桔梗皂苷D A0321(成都曼斯特生物制品有限公司)
  其他试剂均为分析纯

  2 方法与结果

  2.1 桔梗总皂苷含量测定方法

  2.1.1 对照品溶液的配制

  精密称取桔梗皂苷D对照品 4.03 mg,臵10ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度(0.403mg/ml)。

  2.1.2 供试品溶液的制备

  精密移取相当于0.5g药材量的水提液1ml,加水至20ml,使其充分溶解,用水饱和的正丁醇溶液萃取5次,每次20ml,合并正丁醇液,回收正丁醇至干,残渣加甲醇溶液溶解并定容至10ml,为供试品溶液。

  2.1.3 含量测定

  精密量取对照品溶液0.4ml,供试品溶液0.4ml, 分别臵具塞试管中,水浴挥干,冷却,加10%香草醛溶液0.5ml,加60%浓硫酸5ml[2],摇匀,60℃水浴保温15min, 取出,冰水浴冷却,随行试剂做空白,在474nm波长处分别测定吸光度,计算含量。

  2.2 浸膏得率测定方法

  精密吸取样品液20 ml,臵于已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,臵于70?真空干燥箱中干燥,至恒重后于干燥器中冷却30 min,迅速称重,计算,即得。

  2.3 正交试验设计

  2.3.1 药材吸水率考察

  称取干燥药材25g臵于烧杯中,加一定量的足量水,等药材药材完全被浸透后,倒出多余水分,计算出吸水率,结果药材吸水率为150%。

  2.3.2 正交试验设计

  论文摘要

  2.3.3正交试验及结果分析

  称取桔梗药材饮片27份,每份25.0g,按照L9(34)正交试验表进行试验,每组试验平行三次。各提取液均浓缩至50ml,按供试品制备方法和含量测定方法进行试验。正交试验结果见表2、表3,方差分析结果见表4、表5。

  论文摘要

  通过比较计算的F值与临界F值的大小,本实验所考察的三个因素(溶剂量、提取时间、提取次数)中其中提取次数具有显著性的差异。优选出的最佳方案为A1B1C3,即用6倍量水,提取时间为1h,提取次数为3次。

  论文摘要
论文摘要

  通过比较计算的F值与临界F值的大小,本实验所考察的三个因素(溶剂量、提取时间、提取次数)中提取次数具有显著性的差异。另外从数据的直观分析,提取时间也影响桔梗总皂苷的提取,且提取时间越长,提取的越充分。所以优选出的最佳方案为A1B3C3,即用6倍量水,提取时间为2h,提取次数为3次。其显著性大小为C>B>A。即提取次数>提取时间>溶剂用量。  结合出膏率与提取总皂苷含量,得最佳提取方案为A1B3C3,即用6倍量水,提取时间2小时,提取次数为3次。 2.4验证试验  为了考察所选择最佳工艺的稳定性,对其进行验证。称取桔梗3份,每份25g,按A1B3C3方案,即用6倍量水提取3次,每次2小时。提取液浓缩至50ml,取20ml,水浴蒸干。

论文摘要

 

  3、讨论

  3.1 本试验结果提示,提取桔梗总皂苷宜采用少量溶媒,长时间、多次数的提取工艺。

  3. 2 考虑到第一次提取时药材对水会有所吸附,所以设计提取方案时第一次所加的水量把吸水率加了进去。

  3.3 本实验的方法学系采用本教研室以做的研究成果。并且在试验中发现,在测量吸光度时,冰水浴冷却后应快速测量,时间过长会对测量结果有较大影响。

  3.4 本法有操作简单、快速、生产成本低的优点,适合工业生产。

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