药学论文
齐墩果酸（oleanolic acid）和熊果酸（ursolicacid）同属五环三萜酸类化合物，它们又是同分异构体，因此药理作用几乎相同。现已证实齐墩果酸和熊果酸都具有抗炎、降糖、调脂、抗肥胖、抗动脉粥样硬化药理作用[1-4],有望成为抗代谢综合征新药。代谢综合征可诱发神经系统方面的并发症，如脑中风、疼痛、糖尿病脑病、痴呆等。我国正在步入老龄社会，尤其是很多大城市已经进入老龄社会，老年性神经精神疾病如老年痴呆、帕金森病等发病率快速增长，而目前又缺乏安全有效、毒副作用低的防治老年性神经精神疾病药物。齐墩果酸和熊果酸除了通过抗代谢综合征阻滞神经系统并发症外，已有大量实验研究发现齐墩果酸和熊果酸具有神经保护作用。本文综述齐墩果酸和熊果酸保护神经细胞、镇痛、抗精神失常、改善学习记忆等神经精神药理方面的研究进展，为齐墩果酸和熊果酸防治老年痴呆、帕金森病和抑郁症的研发提供依据。
1 对离体神经细胞的保护
β 淀粉样肽、过氧化氢、谷氨酸、6-羟基多巴胺等都具有神经毒性作用，能直接损伤神经细胞引起的神经元凋亡和神经功能障碍。齐墩果酸和熊果酸对这些神经毒素引起的离体神经细胞损伤都有保护作用。
1.1 对抗 β 淀粉样肽的神经毒性
PC12 细胞源自大鼠髓质嗜铬细胞瘤，为神经源性细胞，具有多巴胺能神经特性，被广泛用作神经细胞体外模型，常被用来筛选神经保护药物。齐墩果酸（20、40、80 mg/L）预处理 PC12 细胞，可浓度相关地对抗 β 淀粉样肽诱导乳酸脱氢酶渗漏，提高 PC12 细胞存活率，降低细胞凋亡率。这种神经保护作用可能与齐墩果酸促进抗凋亡基因 bcl-2 表达，抑制促凋亡基因 bax 表达有关[5].Hong 等[6]报道熊果酸0.5~125 μmol/L浓度相关的抑制β淀粉样肽诱导 PC12 细胞产生活性氧，从而减少 DNA 断裂和细胞凋亡。也可通过抑制上游激酶 ERK1/2、p38和 JNK 磷酸化，阻滞核因子-κB（NF-κB）的 p65亚单位核易位，抑制 β 淀粉样肽诱导 PC12 细胞表达诱生型一氧化氮合酶和环氧化酶-2,阻止神经炎症反应发生[7].Wilkinson 等[8]报道熊果酸阻滞 β 淀粉样肽与小神经胶质细胞结合并抑制活性氧生成。用表达人 CD36 的中国仓鼠卵巢细胞实验，发现熊果酸浓度相关地阻滞β淀粉样肽与其受体CD36结合，浓度增至 20 μmol/L 时作用达到峰值，最大抑制率为 64%,认为熊果酸通过阻滞 β 淀粉样肽与 CD36结合，抑制前炎性细胞因子和神经毒活性氧产生，从而阻断神经变性发生。
1.2 对抗过氧化氢的神经毒性
Yu 等[9]报道熊果酸0.05~2 mg/L通过诱生抗氧化酶过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶和抑制脂质过氧化反应，对抗过氧化氢损伤 HEI-OC1 听觉细胞。Rong 等[10]报道齐墩果酸 1、10 μmol/L 可对抗过氧化氢损伤 PC12 细胞，表现为显着降低乳酸脱氢酶活性和丙二醛水平，逆转低下的线粒体膜电位、琥珀酸脱氢酶和超氧化物歧化酶活性、还原型谷胱甘肽水平，从而提高 PC12 细胞存活率。Cho 等[11]报道齐墩果酸通过对抗过氧化氢升高细胞内钙离子浓度和活性氧生成，抑制过氧化氢诱导大鼠皮质神经元凋亡。
1.3 对抗谷氨酸、6-羟基多巴胺的神经毒性
当熊果酸在低浓度（5~15 μmol/L）时对抗谷氨酸受体激动剂红藻氨酸诱导大鼠海马神经元自由基形成、线粒体膜电位下降[12].熊果酸在 0.5、1mmol/L 高浓度时还显着对抗去极化试剂 KCl 升高大鼠大脑皮质神经细胞内钙离子浓度，抑制谷氨酸大量释放，保护神经细胞免受兴奋性神经毒物的伤害[13-14].宋小丹等[15]报道齐墩果酸1、10、100 μmol/L都能对抗谷氨酸诱导大鼠海马神经元钙离子超载性损伤。Ndlovu 等[16]报道低浓度 6-羟基多巴胺预处理过的 PC12 细胞具有预适应的保护作用，能对抗高浓度 6-羟基多巴胺的神经毒性。齐墩果酸能增强这种预适应保护作用，进一步提高 PC12 细胞的存活率、降低凋亡率。上述离体实验显示齐墩果酸和熊果酸是通过抗氧化、抗炎，阻滞 β 淀粉样肽、过氧化氢或谷氨酸等对神经细胞的伤害，产生神经保护作用的。
2 对整体动物脑损伤的保护
整体动物实验显示齐墩果酸和熊果酸对缺血性、出血性、化学性（D-半乳糖、氟化钠、氯化钴等）以及免疫性脑损伤具有保护作用。
2.1 对缺血性或出血性脑损伤的保护
预先 ig 齐墩果酸 25、50 mg/kg 可显着延长结扎双侧颈总动脉小鼠的存活时间。也能减轻大脑中动脉闭塞大鼠的神经症状、脑梗死面积、脑水肿，降低缺血脑组织的丙二醛水平和提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性[10].Li 等[17]报道由于熊果酸能诱导大脑中动脉闭塞小鼠的神经症状、减少脑梗死体积、脂质过氧化反应，促进缺血性脑组织核因子红细胞系 2 相关因子 2（Nrf2）表达，抑制炎性细胞因子把关受体 4（TLR4）、NF-κB 表达，而熊果酸对敲除基因的 Nrf2-/-小鼠的大脑中动脉闭塞性脑缺血没有保护作用，认为熊果酸是通过激活Nrf2 和抑制 TLR4 通路产生抗氧化和抗炎作用，保护脑神经免遭缺血性伤害。
Zhang 等[18-19]也报道熊果酸通过抑制 TLR4 介导的炎症通路，即抑制 TLR4、细胞间黏附分子-1、NF-κB、p65、白介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子、诱生型一氧化氮合酶和基质金属蛋白酶-9表达，上调脑皮质抗氧化水平和抑制脂质过氧化反应，减轻实验性蛛网膜下出血大鼠的早期脑损伤（脑水肿、血脑屏障受损、神经细胞凋亡和神经症状）。提示齐墩果酸和熊果酸有防治缺血性和出血性脑中风的作用。
2.2 对化学性脑损伤的保护
D-半乳糖可诱生活性氧，产生氧化应激、糖基化和炎症反应，可导致神经变性。给小鼠喂 70 d 含0.05%、0.1%、0.2%齐墩果酸的饲料，能剂量相关地对抗 D-半乳糖抑制小鼠脑谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶表达及活性，对抗脑内活性氧和蛋白碳酰水平升高，也能对抗 D-半乳糖提高脑内醛糖还原酶表达及活性、以及丙酮醛、戊糖素（pentosidine）、羧甲基赖氨酸水平，也能抑制D-半乳糖上调 NF-κB p65、Bax、活化的半胱天冬酶（caspase）-3 表达和活性，下调 Bcl-2 表达，产生抗神经细胞凋亡作用[20].Lu 等[21]报道熊果酸也阻止D-半乳糖诱导小鼠脑损伤，降低 D-半乳糖升高的小鼠前额皮质中的晚期糖基化终产物（AGEs）、活性氧和蛋白碳酰水平及抑制 AGE 受体表达和 NF-κBp65 核易位，对抗 D-半乳糖上调诱生型一氧化氮合酶、环氧化酶-2 表达，降低 IL-1β、IL-6 和肿瘤坏死因子水平，减少星形细胞和活化的小神经胶质细胞数，抑制神经胶质纤维酸性蛋白和 CD11b 表达，从而改善 D-半乳糖诱导的小鼠行为障碍。作者认为熊果酸是通过抑制 AGEs/AGE 受体/NF-κB 通路激活，对抗 D-半乳糖引起的脑炎症反应，产生脑保护作用的。
Sarkar 等[22]报道给大鼠连续 ig 齐墩果酸 5mg/kg 可对抗氟化钠引起的氧化应激性脑损伤，改善氟化物引起的脑代谢功能改变，阻滞氟化物中毒引起的大脑、桥脑、小脑、延脑 4 个脑区的酸性、碱性、中性蛋白和 DNA、RNA 含量以及蛋白水解酶（内转酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶）活性下降，阻滞脑组织中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性升高以及丙二醛、游离氨基酸氮、一氧化氮水平升高和羟自由基产生，并提高脑组织中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽还原酶及还原型谷胱甘肽水平。齐墩果酸也能预防脑内直接注射氯化钴引起的大鼠局灶性脑缺氧，抑制神经胶质细胞活性，改善脑神经细胞形态学改变，提高神经细胞存活能力[23].
2.3 对免疫性脑损伤的保护
实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）是炎性去髓磷脂性疾病，系免疫反应失控引起的神经胶质细胞活化和中枢神经组织破坏的结果，可作为人类多发性硬化的动物模型。齐墩果酸和熊果酸具有抗炎和免疫调控作用[1].Martin 等[24]报道齐墩果酸是通过防止血脑屏障被破坏，阻滞炎性细胞浸润至中枢神经系统，改善 EAE 病程。齐墩果酸可减少 EAE小鼠的瘦蛋白分泌，上调血清和脊髓中 Th2 细胞因子表达，降低 Th1 和 Th17 细胞因子水平。齐墩果酸也抑制抗髓磷脂抗体生成而影响体液免疫。体外实验还发现齐墩果酸通过阻滞 ERK 和 rS6 磷酸化，抑制小胶质细胞增殖、吞噬能力和前炎症介质合成。
Xu 等[25]认为熊果酸是通过选择性抑制 RORrt 蛋白功能，极大减少发育中的和已分化的 Th17 细胞的IL-17 表达，改善 EAE 病程。Liu 等[26]报道给坐骨神经损伤小鼠模型 ip 熊果酸 2.5、5、10 mg/kg,可剂量相关地促进受损坐骨神经的 S100 mRNA 和蛋白的表达，提高有髓神经纤维数和平均直径，促进神经再生。Li 等[27]报道齐墩果酸和熊果酸增强神经生长因子刺激 PC12D 细胞的轴突快速生长。提示齐墩果酸和熊果酸有望成为防治氧化应激性、炎性和免疫性神经变性疾病。