高载药量的布地奈德缓释微粒制备及其影响因素(2)

　　而在本研究中， 作者用 5.0 mL 磷酸盐缓冲液 （pH7.25~7.30） 模拟肺液， 通过控制加入 Tween 80 的量在非漏槽和漏槽条件下分别考察了药物的体外释放行为。在非漏槽条件下 （0.5%和 1.0% Tween 80）， 药物在 1 h 时的突释量为 56.2%, 无显着性差异， 12 h时药物释放完全 （图 1）； 在漏槽条件下 （1.5% Tween 80），药物在 1 h 时的突释量高达 69.4%, 12 h 时药物释放度为 103.4%.

　　3 混合速度对药物回收率和含量均匀度的影响

　　制备所得微粒几何粒径较小， 在实际操作中凝聚性较强容易引起团聚， 因此加入乳糖混合以改善其流动性。粉末的混合需要混合容器的旋转运动或粉末内部叶轮的运动来提供动能。在工业生产应用中，制备以粗颗粒 （大多数是乳糖） 为药物载体的干粉吸入剂， 其混合操作一般采用两种不同的混合器， 一种是 V 型混合器如 Turbula, 另一种是高速叶轮混合器[12].在本研究中， 参照 Heng 等[13]报道， 涡旋混合器能提供混合容器的旋转运动， 可以作为一种实验室小试的混合装置制备干粉吸入剂。

　　固定微粒与乳糖质量比 1∶20, 混合时间 15 min,分别考察了混合速度为 500、1 000、1 500 和 2 000r·min1时对混合均匀性的影响， 结果见表 3.从表 3处方 1~4 数据可见， 混合速度对药物的回收率没有显着影响。当混合速度从 500 r·min1提高到 1 000r·min1时， 药物含量均匀度有所提高， 但混合速度从1 000 r·min1升至 1500 或 2000 r·min1时， 均匀度无显着变化， 说明 1000 r·min1的混合速度足以达到较好的含量均匀度。
　　
　　4 混合时间对药物回收率和含量均匀度的影响

　　固定微粒与乳糖质量比1∶20, 混合速度为1000r·min1, 考察混合时间的影响。从表 3 中处方 5、6、2、7、8 可见， 混合时间对药物的回收率无显着影响。

　　一定程度上增加混合时间有利于提高处方的药物含量均匀度 （处方 5、6、2）， 但过长的混合时间也没有进一步提高处方的药物含量均匀度 （处方 2、7、8）。因此， 从含量均匀度和操作简便省时的角度考虑， 后续实验中混合时间都固定为 15 min.

　　5 混合比例对药物回收率和含量均匀度的影响

　　固定混合速度为 1 000 r·min1, 混合时间为 15min, 考察微粒与乳糖的质量比的影响。从表 3 处方9、10、11、2 可见， 混合比例由 1∶1 降至 1∶5 时， 药物的回收率无显着变化； 由 1∶5 降至 1∶10 时， 回收率有轻微下降， 最后降至 1∶20 时， 回收率显着降低（P < 0.05）， 这可能与混合比例降低时微粒用量减少（混合物总量固定） 导致微粒损失比例增大有关。含量均匀度随着混合比例的变化有所差异， 但相对标准偏差值都小于 3.5%.

　　6 乳糖用量对粉末流动性的影响

　　微粒中加入乳糖进行混合以改善其流动性， 通过松密度及振实密度的测定来评价粉末的粉体学性质， 结果见表 1.未加乳糖时， 粉末的流动性非常差（卡尔指数为 35.21, 豪斯纳比为 1.54）； 加入等量乳糖进行混合后， 粉末的黏着力依然较强， 流动性不好（卡尔指数 30.33, 豪斯纳比为 1.44）； 加入 5 倍量乳糖进行混合后， 粉末的流动性已经有较大改善 （卡尔指数 19.82, 豪斯纳比为 1.25）； 继续增大乳糖用量，混合后的粉末流动性变化不大。

　　7 乳糖用量对粒子体外沉积分布的影响

　　NGI 能在较大气流速度范围内按空气动力学粒径大小将粒子进行分级， 为粒子在体内的沉积分布提供参考[15].从图 2 和表 2 可见， 微粒中加入等质量乳糖进行混合， 微粒在人工喉沉积较多， 可吸入组分百分比有所降低。当微粒与乳糖比例减小至 1∶5 和1∶10 时， 与纯微粒相比， 人工喉的截留作用减弱，因此可吸入组分百分比得以提高； 当微粒与乳糖比例从 1∶10 减少至 1∶20 时， 微粒在预分离器中的沉积明显增大， 使可吸入组分百分比显着降低 （P < 0.05），但与纯微粒相比， 可吸入组分百分比依然有所提高。

　　综上所述， 加入 10 倍量的乳糖与微粒进行混合时，微粒与乳糖的混合物中各种粒子相互作用达到一个最佳状态， 使得处方的可吸入组分百分比最高。

　　讨论本研究中纳米混悬液的制备主要是为了保证药物在微粒中的分散均匀性。当稳定剂用量不足时， 纳米粒表面因没有被稳定剂完全覆盖而容易发生聚集，粒径变大[16]; 当用量过大时， 稳定剂分子之间的吸引力又会大于其与药物粒子的吸引力， 同样会导致粒径增大， 稳定性不好[17].因此， 作者最终采用了0.1% （w/v） Tween 80 制备布地奈德纳米混悬液。

　　高压匀质联合喷雾干燥法制备所得的布地奈德微粒几何粒径较小， 分布较均匀， 密度较低， 适于肺部吸入且达到一定的体外缓释要求。通过加入乳糖以涡旋混合器混合的方式来改善处方的流动性， 一定程度上提高混合速度有利于提高含量均匀度， 因为要想将凝聚性较强的细粉粒子与粗粉载体混合成一种均匀混合物， 需要较高的能量使团聚的细粉粒子分开， 使其与载体之间的作用力大于粒子之间的凝聚力[18].一定程度上提高混合时间也有利于提高含量均匀度， 这可能是因为混合时间过低时微粒并没有与乳糖载体充分结合。混合时间过长时， 微粒与乳糖粒子大小、粒子形状或密度大小的不同导致两者分离的作用可能会增强[19], 微粒之间及微粒与容器内壁之间的不断摩擦生电也有可能起到一定的负面作用[20, 21], 不利于含量均匀度。

　　加入等质量乳糖与载药微粒进行混合时， 可能因为微粒与乳糖比例过大， 混合过程中微粒之间碰撞机会增大形成较多聚集体粒子[22], 使得可吸入组分百分比低于未加乳糖时。进一步提高乳糖用量， 乳糖表面活性较强的位点被微粒占据并饱和， 许多微粒以较弱的结合力与乳糖载体结合， 粒子在气流作用下很容易脱离， 进入肺深部[23], 因此可吸入组分百分比高于未加乳糖时。但乳糖用量过大时， 微粒相对用量较少， 与乳糖表面活性较强位点结合未饱和，在气流作用下不易分离， 因此被截留在口咽部。同时，也可能因为乳糖用量过大， 乳糖细粉相对含量增大，与微粒之间形成的聚集体难以进入肺深部[24], 因此可吸入组分百分比相对乳糖用量适中时偏低。

　　通过高压匀质联合喷雾干燥法制备了载布地奈德的壳聚糖微粒， 在非漏槽和漏槽条件下研究了其体外释放行为， 药物可缓慢从壳聚糖微粒中释放。但微粒粒径较小， 易引起团聚， 流动性差， 通过在壳聚糖微粒中加入乳糖以改善其流动性。采用涡旋混合器， 以药物回收率和含量均匀度为指标优化了混合速度、混合时间和乳糖比例， 在此基础上进一步考察了乳糖用量对粉体流动性和可吸入组分比例的影响。当加入 10倍量乳糖时， 药物回收率和含量均匀度均符合要求， 流动性较好， 可吸入组分百分比从 46.0%提高至 59.6%.涡旋混合法简单方便， 操作可行性较高， 可用于实验室小批量制备以乳糖为药物载体的干粉吸入剂。