协助梅毒的诊断的三种检测方法比较

　　梅毒是由苍白梅毒螺旋体 （treponema palliolum, TP） 感染的性传播疾病 , 临床表现较为复杂、多样、病程长 , 对人体危害严重 , 而且具有较强的传染性。目前本院主要采用三种检测方法协助梅毒的诊断 , 包括 TP-ELISA、TRUST 和 TPPA.本研究中对这三种检测方法进行对比研究 , 现报告如下。

　　1资料与方法

　　1. 1一般资料 纳入本研究中的 62 例患者均为在 2012 年1 月 ~2014 年 12 月在本院就诊 , 且快速血清反应素环状卡片试验（RPR）筛查阳性、TPPA确诊阳性， 包括男38例， 女24例，年龄 22~68 岁 , 平均年龄 （28.6±9.3） 岁。其中早期潜伏梅毒12 例 , 一期梅毒 21 例 , 二期梅毒 20 例 , 三期梅毒 9 例。

　　1. 2试剂与仪器 本研究中所使用的 TP-ELISA 试剂由上海实业科华生物工程有限公司提供 , TRUST 试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供 , TPPA 试剂盒由日本富士瑞必欧株式合社提供 , TP-ELISA 使用仪器为 Thermo MULTISKANASCENT 全自动酶联免疫分析仪。雷度 RT-6100 型酶标仪及 Egate2310 洗板机各 1 台。

　　1. 3检测方法 所有纳入本研究的患者于清晨空腹状态下抽取静脉血 5 ml 放置于促凝管中 , 离心 10 min 后分离上层血清后放在 1.5 ml 的 Eppendorff 管中备用 , 对全部患者的标本同时采用 TRUST、TPPA 和 TP-ELISA 三种检测方法检测血清标本的梅毒螺旋体抗体 , 按照试剂说明书的要求并严格遵守正规的操作程序进行检测 , 正确判断检测的结果。

　　1. 4观察指标 对三种检测方法各期梅毒的阳性检出率、灵敏度进行分析比较。

　　1. 5统计学方法 采用 SPSS18.0 统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差 （x-±s） 表示 , 采用t检验；计数资料以率 （%） 表示 , 采用χ²检验。P<0.05 表示差异具有统计学意义。

　　2结果

　　采用 TP-ELISA 检测方法早期梅毒阳性率为 83.3%（10/12），一期梅毒阳性率为 100.0%（21/21）， 二期梅毒阳性率为 100.0%（20/20）， 三期梅毒阳性率为 100.0%（9/9）， 合计阳性率为 96.8%（60/62）， 灵敏度为 96.8% ;采用 TPPA 检测方法早期梅毒阳性率为 91.7%（11/12）， 一期梅毒阳性率为 100.0%（21/21）， 二期梅毒阳性率为 100.0%（20/20）， 三期梅毒阳性率为 100.0%（9/9），合计阳性率为 98.4%（61/62）， 灵敏度为 98.4% ;采用 TRUST检测方法早期梅毒阳性率为 58.3%（7/12）， 一期梅毒阳性率为 71.4%（15/21）， 二期梅毒阳性率为 95.0%（19/20）， 三期梅毒阳性率为 77.8%（7/9）， 合计阳性率为 77.4%（48/62）， 灵敏度为77.4%.TRUST 检测方法对早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒阳性检出率明显低于 TP-ELISA 检测方法及 TPPA 检测方法的检出率 , 差异具有统计学意义 （P<0.05）， 其中 TPPA 对梅毒的阳性率检测最高。三种检测方法对二期梅毒阳性检出率差异无统计学意义 （P>0.05）。经统计学分析 , 采用 TP-ELISA检测方法及采用 TPPA 检测方法的灵敏度要明显高于 TRUST检测方法 , 差异具有统计学意义 （P<0.05）。

　　3讨论

　　血清学检测是发现和诊断梅毒最常用的方法 , 快速、准确的实验室诊断是治疗和控制梅毒蔓延的有效措施 , 科学、合理的检测方法可以提高检测的准确性， 避免漏诊的发生[1].TRUST 是采用牛心中提取的心磷脂、胆固醇、卵磷脂组成的性病研究室 VDRL 抗原重悬于含有特制的甲苯胺红溶液制成 , 是非特异性梅毒筛选试验[2], 由于该检测方法价格低廉、操作方便、检测迅速 , 在梅毒筛查工作中广泛应用。但是近些年来许多学者研究证实 , 该项检测敏感性不高 , 在梅毒感染的不同时期阳性检出率存在较大的差异 , 本研究中对于早期梅毒、一期梅毒及三期梅毒的阳性检出率分别为 58.3%、71.4% 及 77.8%, 而二期梅毒的检出率却为 95.0%, 与相关报道接近。因此作者认为TRUST并不适合应用于梅毒筛选试验，可用于对患者疗效的监测。TPPA 检测是将梅毒螺旋体株制成抗原 , 从而检查患者血清中的梅毒特异性抗体[3], 特异性和敏感性均较高 , 在梅毒诊断中具有较高的临床价值。TP-ELISA 检测法通过将基因重组表达的梅毒螺旋体抗原包被在微孔板上 , 采用双抗原夹心法测定[4], TP-ELISA 与 TPPA 在强特异性与高敏感性方面相近 , 操作简单 , 可以作为梅毒血清学诊断的首选检测方法 , 特别是在传染病医院进行大批量体检及大批量标本筛选时这两种检测方法是最适用的。本研究中采用 TP-ELISA 检测方法及采用 TPPA 检测方法的灵敏度要明显高于 TRUST 检测方法 , 而且 TPPA 检测方法阳性检出率最高 , 为 98.4%, 这个结果与相关报道相符。因此目前国内推荐的确诊梅毒最重要、最可靠的方法是 TPPA 检测 , 成为目前公认的梅毒确诊的首选检测方法[3].但是不足之处是该项检测操作繁琐 , 需要手工进行操作 , 用肉眼判断结果 ,有时会不可避免地出现主观偏差性 , 要求检验医师具有较高的操作水平 , 而且价格较贵 , 对于大量样本的检测不适合采用此方法 , 可适用于对 TRUST、TP-ELISA 等检测后阳性的标本进行验证[4].

　　综上所述 , 作者认为将三种检测方法联合应用 , 可减少漏诊及误诊的发生。

　　参 考 文 献

　　[1] 泽周艳 . 三种梅毒血清学检测方法在梅毒诊断中的应用评价 .大家健康 : 学术版 , 2012, 6（16）：36-37.

　　[2] 李娟， 李乐之。 探讨三种血清学检测方法在梅毒诊断中的应用。医学综述 , 2012, 18（10）：1542-1544.

　　[3] 游媛 , 陈岚 , 肖鄂 . 血清学实验室检查在梅毒临床诊断中的应用研究 . 吉林医学 , 2012, 33（20）：4282-4284.

　　[4] 谢文卫。 三种梅毒血清学检测方法对比分析。中国中医药咨讯，2011, 3（12）：298.