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探讨DcR3与膀胱移行细胞癌的发生和发展的关系

来源:学术堂 作者:韩老师
发布于:2014-05-24 共1889字
论文摘要

  诱捕受体3(decoy receptor3, DcR, 3)是近年来研究发现的肿瘤坏死因子受体超家族成员,目前相关研究表明,人类多种肿瘤中DcR3蛋白有这不同水平的表达,且其与肿瘤的病理分级及临床分期有着密切的关系.

  但是,DcR3在膀胱移行细胞癌血清中的表达,国内外研究较少。本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血清DcR3的水平,探讨DcR3与膀胱移行细胞癌的发生和发展的关系。

  1 材料与方法
  
  1.1 研究对象
  选取2010年9月~2011年12月青海大学附属医院收治经病理组织学检测确诊的膀胱移行细胞癌患者80例作为研究组,男性 44 例,女性 36 例,年龄 26~74(56.60±11.67)岁,>60岁42例,<60岁的38例。膀胱移行细胞癌病理分级按照2004年WHO分级标准,其中乳头状瘤24例、低度恶性倾向尿路上皮乳头状瘤32例、乳头状尿路上皮癌(低分级)16例、乳头状尿路上皮癌(高分级)8例。临床分期按照2002年WHO制定的TNM分期法分为Ⅰ期23例,Ⅱ期36例,Ⅲ期15例,Ⅳ期6例。以已知健康体检人群,年龄25~75(51.3±15.6)岁为对照。

  1.2 方法
  对所有患者进行血清学检测DcR3.检测的方法:上述患者入院后采空腹外周静脉血5 ml,室温静置后取上层血清,标记后分装在-80℃冰箱冷冻保存。ELLSA法检测Human DcR3 ELISA试剂盒购自上海研鑫生物科技有限公司。实验严格按试剂盒说明书上的步骤进行操作。按比例配制各种试剂(缓冲液、清洗液等),倍比稀释标准蛋白,按顺序将已稀释的血清样本和各浓度标准蛋白分别加入对应孔中,滴入生物素-结合物,室温孵育120 min,洗板后滴入抗生物素蛋白链菌素一辣根过氧化物酶,室温孵育60 min.洗板,加入四甲基联苯胺,室温避光10~20 min,加入终止液,以630 nm和450 nm双波长用酶标仪测量吸光值,根据标准曲线,计算出各样本孔浓度值,乘以稀释倍数测出所有患者血清DeR3水平。

  1.3 统计学分析
  采用SPSS 17.0统计学软件。计量资料以均数±标准差表示,统计学方法采用t检验。

  2 结果
  
  2.1 实验组和对照组血清DeR3水平的比较
  膀胱移行细胞癌患者血清中 DcR3(183.43 ±78.45 pg/m1)的水平明显高于正常人(116.65±97.43 pg/m1),差异有统计学意义(P<0.05)。

  2.2 膀胱移行细胞癌患者血DcR3清水平与膀胱移行细胞癌病理分级及临床分期的关系
  膀胱移行细胞癌患者血清DcR3水平与肿瘤的TNM分期、病理分级密切相关(P<0.05,表1);与患者的年龄、性别无关(P>0.05,表2)。【表1.表2】
论文摘要论文摘要
  
  3 讨论
  
  膀胱癌是泌尿系最常见肿瘤,也是全身比较常见的肿瘤之一,其中90%以上为移行细胞癌,鳞状细胞癌和腺性细胞癌较少见。大部分患者可通过手术和放化疗进行治疗,但是其复发率高达70%,2年内复发和转移率高达50%.目前临床上术前依靠超声、CT、X线钡餐等影像学以及膀胱镜检查诊断淋巴结和临近脏器转移及肿瘤浸润深度,但是这些相关检查均具有创伤大、费用高、准确性差等缺点,大多数患者只有在术后行病理学检查才能明确诊断.组织病理学相关指标的检查已成为未来肿瘤诊断的重要手段。尤其是对早期肿瘤的诊断更有着重要的意义。

  DcR3 又称肿瘤坏死因子受体-6B,是近年来发现的一种肿瘤坏死因子受体(TNFR),与TNFR基因超家族成员具有同源性的表达序列标签,能和肿瘤坏死因子超家族成员Fas配体、肿瘤坏死样配体1A及肿瘤坏死因子配体超家族成员14配体(LIGHT)相结合,抑制其与受体淋巴毒素?

  受体和 人肿瘤坏死因子受体超家族成员14(HVEM/TR2)的特异性结合,对它们介导的细胞凋亡起负调控的功能。DcR3由271个氨基酸组成。由于缺乏跨膜序列,因此属于分泌性蛋白分子.

  DcR3可以与凋亡因子FasL特异性结合,使恶性肿瘤细胞避免FasL依赖的细胞毒作用,从而阻断肿瘤细胞凋亡.研究表明,DeR3在正常组织DeR3的表达水平低,但在乳腺癌、肾癌、卵巢癌、胃癌等恶性肿瘤,以及系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病患者者血清DcR3水平有不同程度的升高。研究证实以DcR3为靶点,制作DcR3反义RNA、DeR3中和抗体、DeR3疫苗等方法,通过降低血清DcR3的表达来阻止肿瘤细胞的增殖,从另一个方面表明DeR3与肿瘤的发生与发展过程有着密切的关系.

  本研究结果表明,膀胱移行细胞癌患者血清DeR3的水平明显高于正常人,由此可证明血清DcR3对于膀胱癌的诊断有这一定的重要的意义。研究结果还表明,膀胱移行细胞癌的TNM分期越高、病理分级越高,患者具血清中DcR3的水平就越高,而患者血清中DcR的水平与年龄、性别无关。可见,当患者膀胱癌病情加重时,血清DcR3是增高的。提示DeR3表达水平可能与膀胱癌的恶性程度有关。

  通过本实验研究结果说明,检测膀胱癌患者血清DcR3的水平,可以作为膀胱癌早期诊断、判断其恶性程度、病情进展的重要指标之一。通过检测血清DcR3水平,可以对患者更准确地进行TNM分期、病理分级提供一定的理论依据。

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