中文摘要
滩涂贝类养殖业是我省渔业经济的重要支柱，近年来养殖品种、养殖模式日益多样化，养殖技术逐渐进步，产量不断增多。但是随着贝类养殖业的高速发展和养殖环境污染等问题，病害愈发严重。其中弧菌病对贝类养殖业带来严重危害。因此贝类弧菌的流行情况和防控技术是亟待解决的科学问题。
本研究开展了对2017年和2018年山东滨州、青岛、烟台、威海、东营等7个沿海养殖地区养殖的菲律宾蛤仔、蛏子、斑纹棱蛤、扁玉螺、脉红螺、扇贝、毛蚶、牡蛎和贻贝等弧菌的流行病学调查。通过对分离弧菌的分析比较，了解贝类弧菌病的流行性。并对分离率较高的3种弧菌进行了药敏试验，研究其耐药情况，同时研究了各弧菌毒力基因的携带情况。
本研究共分离细菌155株，属不同的27种，其中弧菌24种，其他菌3种。分离出的弧菌包括溶藻弧菌( Vibrio alginolyticus)、哈氏弧菌( Vibrio harveyi)、副溶血弧菌( Vibrioparahaemolyticus)、杭州弧菌（Vibrio hangzhouensis）、需钠弧菌( Vibrio natriegens)、Vibrioowensii、Vibrio chagasii等。其他菌包括Photobacterium damsetae、Enterobacter cloacae和Photobacterium swingsii。
统计结果表明，检出率比较高的是哈氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血弧菌，分别为23%、24%和9%；弧菌总体的检出率为95%，其他菌为5%。其中哈氏弧菌和溶藻弧菌每年检出率都在20%以上，其他弧菌的检出率相对而言较低。不同贝类中弧菌的检出率也不相同，副溶血弧菌在贻贝、毛蚶和蛏子中的分离率较高，分别为62%，18%和22%；哈氏弧菌在四角蛤、毛蚶和菲律宾蛤仔中分离率较高，分别为38%、35%和28%；溶藻弧菌在牡蛎、蛏子和菲律宾蛤仔中的分离率较高，分别为41%、36%和21%。不同地区中弧菌的检出率是不同的，其中哈氏弧菌在滨州、东营和潍坊的检出率较高，为25%，44%和28%；溶藻弧菌在日照，威海，烟台的检出率较高为52%，43%和37%；副溶血弧菌在滨州和日照的检出率较高为18%和13%。
本试验对这两年分离率较高的3种弧菌进行了药敏试验。使用氨苄西林、阿莫西林、哌拉西林、头孢呋辛、头孢噻吩、链霉素、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、恩诺沙星、萘啶酸、红霉素、四环素、复方新诺明、氟苯尼考和氨曲南这些药敏片。药敏结果表明，氟苯尼考和萘啶酸对弧菌的敏感率达到100%；复方新诺明、红霉素对弧菌的敏感率达到95%，并且没有耐药菌株的出现；恩诺沙星、四环素、氨曲南等抗生素对弧菌的敏感率也达到了90%以上，没有耐药菌株；90.8%和86.2%的弧菌对氨苄西林和阿莫西林表现为耐药，分别只有2%和1%表现为敏感；弧菌对头孢噻吩和卡那霉素敏感率在50%左右，耐药率分别是18.4%和10.3%；哌拉西林的耐药率是8%；本试验对分离的各弧菌进行了毒力基因检测。检测的毒力基因包括tdh、trh、ure C、lux R、Omp W、vvh A和vac O等。结果表明，哈氏弧菌中tox R基因、pap6基因、lux R基因携带率较高分别为47%、39%和28%；副溶血弧菌中vsc C2基因携带率最高为35%，而ure C基因和trh基因的携带率为14%和21%；溶藻弧菌中Omp W基因携带率较高，为29%。
本试验通过对2017年和2018年山东省贝类弧菌病的流行病学调查，掌握贝类弧菌病的流行情况，为弧菌病的防控提供了依据；通过对弧菌的药敏试验，为对贝类弧菌病的药物防治提供了科学方法；同时检测主要毒力基因在一些分离的弧菌中的分布，为毒力菌株的鉴定提供相关资料，同时为有效地预防弧菌传染病的大面积暴发提供科学依据，具有重要研究意义。
关键字： 贝类；弧菌；流行病学；药敏试验；毒力基因。
Abstract
The beach shellfish breeding industry is an important pillar of the fishery economy of our province. In recent years, the breeding varieties and modes have become increasinglydiversified, the farming technology has gradually improved, and the output has been increasing. However,with the rapid development of shellfish farming and pollution of farming environment, the disease is becoming more and more serious. Among them, vibriosis causes serious damage to the shellfish breeding industry. Therefore, the epidemiological survey of shellfish Vibrio is necessary, and prevention technology of that is urgent to be solved.
This study carried out an epidemiological survey of Vibrio in Ruditapes philippinarum,Razor clam, Speckle arrises clam, Glossaulax didyma, Rapana venosa, Pectinidae, Anadarasubcrenata, Oyster and Mytilidae from seven coastal aquaculture areas, mainly in Binzhou,Qingdao, Yantai, Weihai and Dongying in Shandong during 2017 and 2018.Through theanalysis and comparison of isolated Vibrio, understanding the epidemic of shellfish vibriosis.The drug susceptibility test was carried out on three kinds of Vibrio with high separation rate,and the drug resistance was studied. At the same time, the distribution of virulence genes ofeach Vibrio was studied.
In this study, a total of 155 strains of bacteria were isolated, belonging to 27 different species, including 24 species of Vibrio and 3 species of other bacteria. The isolated Vibrio includes Vibrio alginolyticus, Vibrio harveyi, Vibrio parahaemolyticus, Vibrio hangzhouensis,Vibrio natriegens, Vibrio owensii, Vibrio chagasii and so on. The other bacteria include Photobacterium damsetae, Enterobacter cloacae and Photobacterium swingsii.
The statistical results show that the detection rate of Vibrio harveyi, Vibrio alginolyticus and Vibrio parahaemolyticus was higher, which were 23%, 24% and 9% respectively. Theoverall detection rate of Vibrio was 95%, and other bacteria were 5%. The detection rate of Vibrio harveyi and Vibrio alginolyticus was annually above 20%, and the detection rate of other Vibrio was relatively low. The detection rate of Vibrio in different shellfish was different. The separation rate of Vibrio parahaemolyticus in Mytilidae, Anadara subcrenata and Razor clam was high, which were 62%, 18% and 22% respectively. The isolation rate of Vibrio harveyi in Mactra veneriforimis, Anadara subcrenata and Ruditapes philippinarum was higher, which were 38%, 35% and 28% respectively. The isolation rate of Vibrio alginolyticus in Oyster, Razor clam and Ruditapes philippinarum was 41%, 36% and 21%, respectively.
The detection rates of different Vibrio in different regions were different, and the detection rate of Vibrio harveyi in Binzhou, Dongying and Weifang was higher, which were 25%, 44% and 28% respectively. The detection rate of Vibrio alginolyticus in Rizhao, Weihai and Yantai was 52%, 43% and 37%. The detection rate of Vibrio parahaemolyticus in Binzhou and Rizhao was 18% and 13%.
In this study, the susceptibility test was carried out on three kinds of Vibrio with high separation rate in the past two years using ampicillin, amoxicillin, piperacillin, cefuroxime,cefotaxime, streptomycin, gentamicin, kanamycin, amikacin, enrofloxacin, nalidixic acid,erythromycin, tetracycline, compound sulfamethoxazole, florfenicol and aztreonam. The drug susceptibility results showed that the sensitivity of florfenicol and nalidixic acid to Vibrio reached 100%. The sensitivity of compound sulfamethoxazole and erythromycin to Vibrio reached 95%, and no drug-resistant strains appeared. Antibiotics such as nozafloxacin,tetracycline and aztreonam were more than 90% sensitive to Vibrio and no resistant strains.90.8% and 86.2% of Vibrio showed resistance to ampicillin and amoxicillin, only 2% and 1% showed sensitivity respectively. The sensitivity of Vibrio to cefotaxime and kanamycin was about 50%, the resistance rates were 18.4% and 10.3%, respectively and the resistance rate of piperacillin was 8%.
In this test, virulence genes were detected in the isolated Vibrio. The virulence genes detected include tdh, trh, ure C, lux R, Omp W, vvh A, and vac O. The results showed that the detection of tox R gene, pap6 gene and lux R gene in Vibrio harveyi was 47%, 39% and 28%,respectively. The detection rate of vsc C2 gene in Vibrio parahaemolyticus was up to 35%,while the detection rate of ure C gene and trh gene was 14% and 21%. The detection rate of Omp W gene in Vibrio alginolyticus was 29%.
Through the epidemiological investigation of shellfish vibriosis in Shandong Province during 2017 and 2018, we mastered the epidemic situation of shellfish vibriosis, providing a basis for the control and prevention of vibriosis. Sensitivity test provides a scientific method for drug control of shellfish vibriosis. At the same time, the distribution of major virulence genes was detected in some isolated Vibrio species, providing relevant information for the identification of virulence strains, and offering a scientific basis for effectively preventing large-scale outbreaks of vibriosis, which has important research significance.
Keywords: Shellfish; Vibrio; Epidemiology; Drug Sensitivity Assay; Virulence gene。
1、前言
海洋覆盖着地球表面积的71%，占地球总水量的97%，一直以来就是生命的摇篮。我国水产品养殖量占世界水产品养殖总量的65%，近些年来海水养殖发展迅速，现在水产品的人工养殖量已经取代了传统捕捞成为最主要的产出方式（马昊楠，2015）。水产品是人们食用蛋白质的重要来源，过去十几年是我国水产行业发展最快的时期之一，同时也是水生动物疾病流行、水环境遭到严重破坏的一个时期。我国的水产行业快速发展，贝类的养殖在水产品中有举足轻重的地位，尤其是北方海域的贝类养殖更是推动了当地的经济发展。随着水产品的人工养殖迅速发展，使得海洋滩涂养殖业不断发展（BangeraR, 2013）。在经过藻类和虾类发展高潮之后，贝类的养殖发展较为迅猛，生产量大幅度提升，养殖形式也变得越来越好，逐渐在世界海水养殖业中占大量比例，并且带动了沿海地区的经济发展。
贝类结构上都可以分为头、足、内脏囊及外套膜4部分，具有很高的经济价值和食用价值，广受人民的喜爱，使贝类养殖业高速发展，其中还得益于人工养殖技术的改进，工厂化养殖的兴起，我国不仅拥有广袤的陆地面积，还有900多万亩的滩涂面积，但是由于长此以往的民情和技术的落后，开发利用率很低，大面积的养殖滩涂贝类是一项良好的经济措施，目前我国对于贝类养殖的认识正在提高，人们已经意识到发展经济贝类的养殖拥有良好的前景，目前而言，我国对于一些贝类的养殖技术更加的成熟，贝类一般是以藻类及有机物质为食，河口内弯一带有机物质丰富，饵料充足，是良好的养殖场所，浅海养殖贝类不需要投饵，可养海面辽阔，滩涂养殖成本低收入高都是贝类养殖的好方法，此外有的地区还建立了工厂化养殖，使得养殖贝类更加的规模化。
由于贝类养殖的养殖方式和品种多样化、养殖范围和养殖密度的不断增大，贝类产量的也逐渐增多。但是由于人们盲目的追求高产量，同时缺乏合理的养殖观念，使得现在养殖环境的恶化，贝类的养殖面临着多重考验，水环境的恶劣，养殖空间的不足，以及不规范养殖导致贝类的免疫力下降。贝类病害问题也变得愈发严重，主要表现为病原微生物种类的不断增多、传播的范围逐渐变广、发病频率的不断提高、传播速度的不断变快、死亡率增高，使得经济损失严重。
其中，弧菌引起的弧菌病对贝类的养殖造成了不小的损失。弧菌多存在于海洋、河口环境中和动物体内（Han, J. E., 2015）。是海洋中常见的细菌之一，是对水产养殖业影响最大的致病菌之一。至今，已有副溶血性弧菌、溶藻弧菌、哈氏弧菌、需钠弧菌、鳗弧菌、霍乱弧菌、魔鬼弧菌等多种弧菌病病原菌在贝类养殖中被发现，主要发病贝类为魁蚶、扁玉螺、扇贝、蛏子和菲律宾蛤仔等（陈晓燕，胡超群，陈偿，张吕平，任春华等，2003）。弧菌病可以造成的贝类死亡，而现在在养殖过程中贝类死亡的现象日益严重，因此需要加强对弧菌病的了解，对水产养殖业的发展有重大意义（简纪常，吴灶和，陈刚，曾敏玲等，2003）。
1.1、弧菌的研究进展。
1.1.1、弧菌简介与弧菌形态。
弧菌（Vibrio）属于弧菌科（Vibrioaceae），是一种革兰氏阴性菌，有鞭毛但是没有芽孢，可以运动且可以弯曲成弧形，是一种短杆状细菌。弧菌广泛存在于水体中，主要在河口、海洋和海洋生物体内，是在海洋环境中生存的细菌类群，它有很强的抗逆性和适应性。弧菌是一种有机化能营养菌，有呼吸型代谢和发酵型代谢两种代谢方式，兼性营养菌，无严格的营养要求，可在一般培养基上迅速生长；（Faruque S. M., 2008）其中一些种类会引起食源性感染，通常与食用未煮熟的海鲜有关。在盐水中发现，弧菌属对氧化酶呈阳性反应，是一种兼性厌氧菌，不形成孢子。弧菌生长温度15℃-37℃，最适温度为28℃左右，p H范围6.0-9.0的碱性环境。某些菌株在缺少Na Cl的情况下不生长。弧菌主要在TCBS平板和2116E平板上生长。在2116E平板上生长的时候菌落呈乳白色、有凸起、边缘光滑。在TCBS平板上生长的时候菌落呈黄或者绿色（王凤青、孙玉增等，2018）。
1.1.2、弧菌致病机理。
弧菌是存在于海洋环境中的细菌类群，在海产品的养殖中具有严重的危害，有很多学者研究了其致病机制。最早研究弧菌的致病机制都是先在发病的动物体力分离弧菌，再感染健康的动物来研究其致病性。但是，随着生物分子学和生物技术的发展，病原菌致病性的科学研究变得越来越多，人们对其认识也变得更加深切。动物病害防治的关键在于对病原菌致病机制的研究，弧菌的致病机制被大量的国内外学者进行研究，有很多的科学成果。
黏附、侵袭、体内增殖及产生毒力因子等步骤是弧菌的致病过程（田丽花，2015）。通过吸附作用弧菌并入侵鱼体的皮肤、鳃、侧线和肠道，其代谢产物会破坏机体局部或者全身的正常代谢以及干扰机体的机能，并对机体造成组织损伤（陶保华，胡超群，任春华，2000）。
1.2、弧菌的主要致病因子。
目前已知的主要毒力因子有鞭毛（Naka H., 2011）、铁捕获系统（Welch T. J., 2005）、外膜蛋白（Croxatto A., 2007）、蛋白酶（Mo Z., 2010）、铁载体（Ruwandeepika H. A. D.,2012）和溶血素（Mou X., 2013）等。
1.2.1、胞外产物蛋白酶。
胞外产物广泛存在于病原弧菌中，而且不同的弧菌产生不同的胞外产物。胞外产物ECP中部分蛋白酶类以及外毒素是与致病有关的毒力基因。弧菌胞外产物中的主要毒力因子胞外产物蛋白酶，表现出很高的丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶活性，且有明显的菌株特异性。弧菌通过其本身分泌的胞外酶来干扰宿主机体的稳定，使病原菌在宿主体内开始繁殖，并随血淋巴运动到宿主全身，破坏宿主的凝血系统酶活性，造成血细胞溶解，最终致使宿主石斑鱼身体溃烂而死亡（陈雅芳等，2006）。因此研究人员可以通过研究控制丝氨酸蛋白酶和半胱氨酸蛋白酶等酶活的相关方法来达到抑制弧菌胞外蛋白酶活性，从而达到抑制弧菌疾病的目的。
1.2.2、溶血素。
溶血素作为主要的致病因子，在致病性弧菌中分布较广泛（Zhang X. H., 2005）。是衡量其毒力的重要指标，与出血性败血症联系密切，会造成溶血现象这是由于红细胞细胞膜破裂释放了血红蛋白造成的，并且Ca2+和Mg2+离子可以增强溶血的活性。大多数副溶血性弧菌临床分离株在血琼脂上显示溶血，被称为神奈川现象（KP），该现象被认为与人类副溶血性弧菌的致病特性密切相关。弧菌的溶血素基因多属于TLH和HLX溶血素基因家族（王淑娴等，2007） 。
致病性副溶血性弧菌的tdh基因（或其同系物trh）有两个拷贝，表明这种外毒素对机体生存的重要性。tdh的成熟形式由165个氨基酸组成，包括一个单分子内二硫键，但在其它生物体中没有发现与tdh有密切同源关系。通过定点诱变测定了arg46、gly62、trp65和gly90残基对溶血的影响。tdh还具有肠毒素活性，心脏毒性和致死作用（FraneescoR., 2000）。
1.2.3、铁载体。
铁是微生物生长和繁殖必不可少的物质，弧菌也和其他微生物一样，对铁有绝对的需求。铁以铁（Fe3+）和铁（Fe2+）两种状态存在，并且可以参与氧化还原电位范围广泛的电子转移。铁对细菌细胞中许多关键酶的功能至关重要，包括用于合成DNA前体的核糖核苷酸还原酶、用于电子传输的细胞色素和用于产生能量的三羧酸（TCA）循环酶。在这些酶中，铁辅助因子可能是血红素、铁硫簇，或者更不常见的是铁原子。弧菌所需的铁量因细胞的生理和代谢而不同，但在0.1μm至5.0μm范围内的培养基中的浓度为试验室条件下细菌的最佳生长提供了足够的铁（Ju C. H., 2006）。在p H为7的培养基中生长的霍乱杆菌中的每个细胞积累的铁原子与在类似条件下生长的大肠杆菌细胞中的数量相似。
尽管铁很丰富，但在大多数环境中都不容易获得，铁的形态和溶解性受环境以及可能与铁形成络合物的阴离子的影响。铁在中性或稍高的p H值下在氧存在下的溶解度较低，主要以氢氧化铁的形式存在。弧菌所在的海水环境是微碱性的（p H7.5至8.4），远低于大多数微生物所需的浓度。为了维持正常生长，弧菌物种已经进化出一系列广泛的铁运输系统，使细菌能够在每个栖息地中竞争这种基本元素。这些系统包括高亲和力的铁结合化合物（铁载体）的分泌和吸收，以及铁结合到宿主复合物的转运系统。铁和亚铁的转运体不与铁载体复合，也常见于弧菌。编码这些系统的一些基因显示出水平传播的证据，并且获取和整合额外铁运输系统的能力可能使弧菌物种更快速地适应新的环境生态位。铁太少会阻止细菌的生长，而铁太多则是致命的。
病原弧菌能在宿主体内生长和繁殖，其获得铁主要通过两种途径，其中一种途径是病原弧菌通过产生外毒素进而破坏红细胞并且产生并释放血红素，例如鳗弧菌；另外一种途径就是产生铁载体，例如弧菌可以产生一种螯合剂，具有亲铁性，其可作为一种铁载体，并且可以在各种蛋白中摄取铁，比如在转运蛋白中。（李桂仙等，2019）。
1.2.4、 T3SS。
III型分泌系统（T3SS）具有细胞毒性(Ham H., 2008)和肠毒性(Burdette D. I., 2008)，基因编码的大小大约为40kb，主要存在于染色体的毒力岛上，是副溶血弧菌主要的致病因子之一(Dickenson N. E. 2010)。副溶血弧菌最早的全基因组序列表明，副溶血弧菌的III型分泌系统具有T3SS1和T3SS2两套(Tauomori K., 2002)。T3SS1主要的作用是细胞毒性作用，主要是引起一些细胞效应，通过吞噬作用导致细胞死亡。T3SS1有42个基因，30个开放阅读框，并且存在于所有已测过全基因组序列的分离株中8。
T3SS1级联调节系统是由Exs D、Exs E和Exs S蛋白组成的，并且T3SS1基因的表达需要Exs A的作用(Kodama T., 2010. Zhou X., 2008. Zhou X., 2010)。而使T3SS1发挥毒性最主要的蛋白是Vop Q(Sreelatha A., 2013)。Vop Q主要的功能是增强IL-8的分泌以及通过诱导自噬囊泡来抵御巨噬细胞对病原微生物的吞噬作用。并且VopQ可以破离子平衡，使自噬体聚集导致宿主细胞自噬(Burdette D. L, 2009)。Vop Q蛋白对Hela细胞也有毒性作用(Ono T., 2006)。
T3SS2的主要作用是肠毒性作用，主要是破坏肠道组织以及产生少量的细胞毒素，从而引起腹泻。胆盐会引起副溶血弧菌转录因子Vtr A调控Vtr B的表达，并且导致T3SS2基因和tdh、trh基因的表达(Kodama T, 2010)。因为T3SS2的肠毒作用可以使副溶血弧菌作为一种致病病原菌。目前，已经被报道过的T3SS2效应蛋白有Vop C(OkadaR., 2014)、Vop V(Hiyoshi H., 2011)、Vop L(Zahm J. A., 2013)、Vop A(Trosky J. E., 2007)、Vop T(Vop Z和VPA1380(Calder T., 2014)。
1.2.5、毒力调控基因。
和毒力相关的调控基因tox R广泛存在于弧菌中。tox R基因是一个高度保守的基因，其主要作用是调控菌毛和一些外膜蛋白在内的基因以及编码弧菌肠毒素基因。tox R基因可以转录调控霍乱毒素的ctx基因，在霍乱弧菌中被发现（Miller, V. L., 1996）。一方面它可以通过编码的一种转膜蛋白对ctx基因、编码TCP纤毛的tcp基因、编码外膜蛋白的omp U和omp T基因其调控作用（Di Rita, V.J，1997）。另一方面它可以刺激其他毒力调控基因tox T，并且tox T基因可以产生编码的tox T蛋白，其可以直接调控弧菌的致病因子（陈建平等，2000）。但是omp U基因对tox R基因的活性相对于toxT基因的活性要高得多，所以omp U基因的tox R调控不需要tox T的协同（Champion,G. A., 1997）。tcp P基因的表达产物调控tox T的表达，当tox R不存在的时候，tcp P的过度表达可以促进tox T的表达（Hase, 1998）。
研究表明，弧菌中广泛存在着tox R基因，比如霍利斯弧菌（Vuddhakul V., 2000）、河流弧菌（Conejero M. J. U., 2003）、和哈氏弧菌（Chakraborty R., 2006）等弧菌中都存在着tox R基因。通过研究这些弧菌中的毒力调控相关基因tox R发现，它可以调控一些毒力基因的表达，但是在不同弧菌中其调控方式不同（Lee S. E., 2000;陈建平等，2000）。
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1.3、弧菌的危害.
1.3.1、弧菌对人的危害
1.3.2、弧菌对贝类的危害
1.4、弧菌病的防治
1.4.1、 生物防治
1.4.2、 药物防治
1.4.3 、综合防治
1.5 、流行病学调查
1.5.1、 流行病学的基本内容
1.5.2、细菌病流行特点
1.6、研究目的与意义
2、材料与方法
2.1、试验材料
2.1.1、 试验菌株
2.1.2、 主要试剂及试剂盒
2.1.3、 主要仪器
2.1.4、试验所用溶液及其配制
2.2、试验方法.
2.2.1 、样品采集
2.2.2、弧菌分离纯化及保存
2.2.2.1、弧菌的分离
2.2.2.2、弧菌的纯化
2.2.2.3、弧菌的保存
2.2.3、革兰氏染色
2.2.4 、弧菌16SrRNA鉴定
2.2.4.1、引物的合成
2.2.4.2 、DNA模板的提取
2.2.4.3 、PCR扩增
2.2.5、序列分析及序列上传
2.2.6、菌株耐药性检测
2.2.6.1、菌株
2.2.6.2、试剂
2.2.6.3、药敏纸片
2.2.6.4、药敏纸片扩散法(K-B 法)
2.2.7、毒力基因的检测
2.2.7.1、副溶血弧菌毒力基因
2.2.7.2、哈氏弧菌毒力基因
2.2.7.3、溶藻弧菌毒力基因
2.2.8、数据分析
3、结果
3.1、弧菌形态特征
3.2、菌株鉴定结果
3.2.1、生化鉴定
3.2.2 、16S rRNA鉴定结果
3.2.3、测序鉴定结果
3.2.4.上 传序列结果
3.3、弧菌流行病学数据分析
3.4、药敏试验结果
3.5、毒力基因检测结果
3.5.1、副溶血弧菌毒力基因检测结果
3.5.2、哈氏弧菌毒力基因检测结果
3.5.3、溶藻弧菌毒力基因检测结果
4、讨论
5、结论
1.查明哈氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌分离率最高，总分离率达56%。
2.弧菌对氟苯尼考、萘啶酸、四环素、恩诺沙星和复方新诺明敏感率达到90%以上。对氨苄西林和阿莫西林的耐药率在90%左右。
3.副溶血弧菌vsc C2携带率最高为35%；哈氏弧菌tox R基因携带率最高为47%；溶藻弧菌Omp W携带率最高为29%。
参考文献
