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探讨益气活血法治疗盆腔炎性疾病的作用机理

来源:未知 作者:7号编辑
发布于:2014-06-30 共4748字
论文摘要

  盆腔炎性疾病是妇科常见疾病之一,世界卫生组织估计,性传播疾病泛滥导致全世界每年新增3亿3千多万患者,其中有10%~20%将发展成为盆腔炎性疾病,已成为社会公共问题。盆腔炎性疾病是指女性上生殖道的一组感染性疾病。若未能及时、彻底治疗,可致不孕、输卵管妊娠、慢性盆腔痛及炎症反复发作。因患者体质较差,病情迁延以及妊娠产褥感染、术后、慢性炎症所致的瘢痕粘连以及盆腔充血而致下腹疼痛,痛引腰骶。从而严重影响妇女的生殖健康,且增加家庭与社会负担。近年来,中医药研究得到了较大进展,并得到妇科界的重视。本研究从瘀、虚为主要病机立论,改变中药中益气与活血药物配伍的比例,通过动物实验,应用补中益气、活血化瘀为主要功效的益气活血汤剂治疗盆腔炎性疾病,研究益气活血汤剂对机械损伤加混合菌感染法制备的盆腔炎性疾病大鼠模型的病理组织形态学及炎性因子变化,进一步验证其有效性及药物安全性,探讨此方治疗盆腔炎性疾病的作用机理,为益气活血法防治盆腔炎性疾病在临床上进一步推广使用奠定理论基础。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 实验动物Wistar雌性大鼠100只,体重(200±20)g(北京华阜康生物科技股份有限公司)。动物合格证号:SCXK(京)2009-0004。
  
  1.2药品与试剂。
  
  1.2.1中药。
  
  益气活血汤剂A方1∶2:炙黄芪10g,党参10g,甘草6g,丹参20g,赤芍15g,延胡索10g,没药10g,红藤30g,白芍10g,忍冬藤30g,川楝子10g,香附10g,柴胡6g。
  
  益气活血汤剂B方1∶1:炙黄芪30g,党参10g,甘草6g,丹参15g,赤芍15g,延胡索10g,没药6g,红藤30g,白芍10g,忍冬藤30g,川楝子10g,香附10g,柴胡6g。
  
  益气活血汤剂C方2∶1:炙黄芪30g,党参20g,甘草10g,丹参10g,赤芍10g,延胡索10g,没药3g,红藤30g,白芍10g,忍冬藤30g,川楝子10g,香附10g,柴胡6g。
  
  由天津中医药大学第二附属医院统一熬制成汤剂。
  
  1.2.2 菌液
  
  埃希氏大肠杆菌和金黄色葡萄球菌以2∶1比例溶于无菌超纯水,配制浓度为3.0×109个/mL混合菌悬液(购于北京标准物质网-北京北纳创联生物技术研究院)。
  
  1.2.3 试剂盒
  
  白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、TNF-α、IgG及IgM酶联免疫分析(ELISA)试剂盒(购于天津灏洋生物技术有限公司)。
  
  1.2.4 麻醉剂
  
  10%水合氯醛溶液。
  
  1.3 主要实验仪器
  
  ELX800酶标仪、石蜡包埋机、石蜡切片机、光学显微镜、电子天平、恒温水浴锅、高速低温离心机、-30℃超低温冰箱。
  
  1.4 实验方法
  
  1.4.1 模型制备
  
  用10%水合氯醛溶液腹腔注射麻醉大鼠(0.3mL/100g),麻醉满意后,动物取仰卧位,固定头和四肢于操作台上,腹中部皮肤去毛,碘伏消毒。取下腹正中切口,长约1cm,沿腹正中线剪开进腹,在膀胱后方找出子宫,暴露并固定住子宫,用1mL注射器抽取0.4mL混合细菌悬液,向双侧宫腔内各注入0.2mL菌液。在注入菌液之前用注射器机械损伤子宫内膜组织,然后注入菌液至双侧子宫内,注射完成后抽出注射器,用直镊捏住针眼,停留半分钟左右,以防止菌液流出。将子宫回纳腹腔,用1'丝线分别缝合腹壁和皮肤。假手术组动物开腹后,不做任何处理,随即关腹。术后动物自由饮水,普通饲料饲养,不使用抗生素。
  
  1.4.2 分组
  
  分组:未孕成年Wistar大鼠100只,体重(200±20)g。按体重用SPSS11.5统计软件完全随机法随机取15只用做空白组(D组)、10只用做假手术组(E组),其余用于造模。饲养14天后用随机方法分为4组,即益气活血比为1∶1组(B组)20只、益气活血比为1∶2组(A组)20只、益气活血比为2∶1组(C组)20只、和模型组(F组)15只,共计6个实验组。
  
  1.4.3 给药
  
  治疗组A组、B组、C组于造模后的第14天开始给药,以人的标准体重60kg换算成250~300g体重大鼠的每日用药量,采用人与动物的体表面积计算法换算,治疗组给予药液,每日1次,连续给药。
  
  正常组、模型组、假手术组均给予相应的蒸馏水灌胃,正常饲养,无特殊处理。
  
  1.4.4 取材与标本制备
  
  取材订于给药后的第15d清晨以及第22d清晨两次。第一次取材随机从每组中取出一半的大鼠,剩下的动物继前饲养,直到第22d全部取材为止。取材前一天禁食,取材时10%水合氯醛溶液腹腔麻醉,抽取腹主动脉血液约8mL置于无抗凝剂的试管内,37℃水浴30min,离心机(2500r/min)离心20min取上清液分装,置-30℃保存。
  
  1.5 观察指标及测定
  
  取血后的大鼠暴露子宫,取双侧子宫,剔除结缔组织,放入10%中性福尔马林溶液固定,观察子宫组织病理学的变化。
  
  1.6 统计学方法
  
  采用SPSS11.5统计软件。先从对大鼠成活率进行卡方检验。
  
  2 结果
  
  2.1 宏观上观察
  
  实验中死亡大鼠统计:造模当天无死亡大鼠,从第2天开始到第10天,平均每天死亡大鼠为1.9只,除了两只因肺炎以及另外3只发现时已经被啃食无法做死亡的分析外,其余大鼠均因盆腔感染致死;造模的第14天开始灌药,此后无因盆腔感染死亡的大鼠。见表1。

论文摘要  
  结论:可认为益气活血药物在治疗模型的Wsitar大鼠的盆腔炎性疾病有效。
  
  2.2 子宫组织学肉眼观察
  
  空白组:子宫未见明显充血及水肿,子宫结构清晰,无宫腔增粗及积液,与腹腔周围组织无粘连;假手术组:
  
  子宫未见明显异常,结构清晰,与腹腔及周围组织无粘连;模型组:子宫充血水肿严重,有炎性液体渗出,隐约可闻及腥臭味;治疗14d,子宫表面轻度充血、水肿,少数模型出现纤维组织粘连;治疗21d,子宫未见充血水肿,少数有纤维组织粘连,大部分痊愈。光镜观察:模型组可见腺体萎缩,间质轻度增生,少量淋巴细胞、中性粒细胞,较多嗜酸性粒细胞侵润,波及基层;治疗14d内膜间质纤维组织轻度增生,腺体轻度扩张,可见少量淋巴细胞及嗜酸性粒细胞;治疗21d,间质轻度增多,较多淋巴、嗜酸、少量中性粒细胞侵润,肌层灶性炎症,甚至近正常,偶见淋巴细胞、嗜酸性粒细胞。
  
  2.3 镜下观察
  
  (HE染色×100和HE染色成×400)见插页图1~9。
  
  2.4 实验大鼠死亡分析
  
  灌药前共死亡19只,平均每天1.9只,具体:模型组1只因手术伤口缝线开裂;3只同类被啃食,无法具体分析死亡原因;其余均死于盆腔感染。假手术组1只死于肺炎。灌药后共死亡3只,其中2只因灌药时灌入肺中死亡,另外1只因死于肺炎。分析死于盆腔感染的原因有3点:(1)手术操作不当,注射菌液不小心流到盆腔;(2)混合菌溶液浓度不稳定,同一只注射器反复使用;(3)缝合时操作未注意无菌操作,感染了盆腔组织。
  
  3 讨论
  
  本实验结果表明此益气活血汤剂治疗盆腔炎性疾病具有较显著的疗效,通过组织学观察结果还可说明,益气活血药物可以治疗盆腔炎性疾病,并且很大程度上提高了模型大鼠的生存率。益气活血汤剂可有效抑制炎性子宫组织水肿及内膜腺体扩张,说明此方药可减轻炎症反应,从而有效地修复受损组织,加快机体生理功能恢复。
  
  研究中采用了三组治疗方药,益气活血B方为基础方,其药物组成是根据名老中医治疗盆腔炎性疾病的经验方———银红丸(天津中医药大学第一附属医院院内制剂)加减化裁而成,且银红丸经过三十多年的临床应用,疗效确切。益气活血B方药物组成由健脾益气(炙黄芪、党参、甘草)、活血化瘀(丹参、赤芍、延胡索、没药)和清热解毒、疏肝理气(红藤、白芍、忍冬藤、川楝子、香附、柴胡)三组药物组成,其中益气组比活血组为1∶1,其剂量为临床常用剂量。而益气活血A方和益气活血C方是在益气活血B方基础上的改良方,益气活血A方中益气组比活血组为1∶2,益气活血C方中益气组比活血组为2∶1,这两种比例也是有据可循,均为临床上安全剂量范围内且为常用剂量,整个剂量加减变化过程中,清热解毒药及疏肝理气药物组成和剂量均保持不变。
  
  益气活血A方中用活血药重,意重在活血兼顾益气。丹参,味苦,性微寒,入心、心包、肝经,具有活血调经,祛瘀止痛、凉血消痈,除烦安神之功效。《本草纲目》谓其“能破宿血,补新血。”《本草便读》中:“丹参,功同四物,能祛瘀以生新……味甘苦以调经,不过专通营分……为调理血分之首药。”此外因盆腔炎性疾病缠绵难愈,易反复发作,患者常伴有焦虑情绪,丹参入心包经有除烦安神之功。赤芍:味苦,性微寒,归肝经,有清热凉血、散瘀止痛之功。《神农本草经》:
  
  “主邪气腹痛,除血痹,破坚积,寒热疝瘕,止痛,利小便”。《本草求真》:“赤则止有散邪行血之意……赤则能于血中活滞。”治疗血滞之痛经、癥瘕之腹痛,常与延胡索等配伍,加强散瘀止痛之功效。延胡索味辛、苦,性温。归心、肝、脾经。具有活血,行气,止痛之功效,是活血行气止痛之良药。《本草纲目》:“延胡索,能行血中气滞,气中血滞,故专治一身上下诸痛,用之中的,妙不可言。盖延胡索活血化气,第一品药也。”
  
  无论何种痛症,均可配伍应用。配伍香附等药可治气滞血瘀之痛经、月经不调、产后瘀滞腹痛。没药:味辛、苦,性平,归心、肝、脾经,具有活血止痛,消肿生肌之功效。《本草纲目》曰:“没药散血,皆能止痛。”《医学衷中参西录》中:“又善治女子行经腹疼,产后瘀血作痛,月事不能时下。”临床多用于治疗血瘀气滞较重之痛症。
  
  益气活血C方中用益气药比例大,意重在益气兼顾活血。党参:味甘,性平,归脾、肺经。具有补脾肺气,补血,生津之功效。《本草从新》曰:“补中益气,和脾胃,除烦渴。中气微虚,用以调补,甚为平安。”《本草正义》曰:“补脾养胃,润肺生津,健运中气,本于人参不相甚远”。炙黄芪:味甘,性微温,归脾、肺经,具有健脾补中升阳举陷,益卫固表,利尿,托毒生肌之功效。为补中益气要药。《医学衷中参西录》曰:“能补气,兼能升气,善治胸中大气(即宗气)下陷。”白芍:
  
  苦、酸,微寒。归肝、脾经。主养血敛阴,柔肝止痛。常配伍柴胡治疗血虚肝郁之疼痛。《本草求真》:“(白芍)有敛阴益营之力;能于土中泻木”。香附:辛、微苦、微甘,性平,归肝、脾、三焦经。主有疏肝解郁,调经止痛,理气调中之功效。善解肝气之郁结,味苦疏泄以平肝气之横逆,为疏肝解郁,行气止痛之要药。其《本草求真》谓之“能入肝胆二经,开郁散滞,活血通经,兼行诸经气分”。《本草纲目》谓之“气病之总司,女科之主帅”是血中之气药,善走能守,调经理气止痛。慢性盆腔炎患者常因病情迁延难愈而肝气不舒,导致气逆而上,故使用本品以疏理肝气,行气止痛。大血藤:苦,平。归大肠、肝经。主清热解毒,活血,祛风,止痛。
  
  《本草图经》:“攻血,治血块”。常与香附等药配伍,用治经闭痛经。柴胡:苦、辛,微寒。归肝、胆经。疏肝解郁,升举阳气。本品性善条达肝气,疏肝解郁。《本草纲目》:“平肝、胆、三焦、包络相火,妇人热入血室,经水不调”。川楝子:苦,寒,有小毒。归肝、胃、小肠、膀胱经。主行气止痛。每与延胡索配伍,用于肝郁气滞之胸腹诸痛。忍冬藤:又名银花藤,味甘,性寒。归肺、胃经。清热解毒,疏风通络。甘草:甘、平。归心、肺、脾、胃经。补脾益气,缓急止痛,调和诸药。常随证配伍用于血虚、血瘀等原因导致的脘腹挛急作痛。并发挥调和药性的作用,亦可矫正药味。《本草正》:“(甘草)得中和之性,有调补之功……,随气药入气,随血药入血,无处不往,故称国老”。常与黄芪等补脾益气配伍治疗脾气虚弱之证。
  
  诸药合用,共行肝、脾、心之气滞,益脾肺之气血,气血同治,动静结合,寒温并用,攻补兼施,既治又防,使本方充分体现祛瘀而不伤正,扶正而不敛邪,虚实、气血兼顾的配伍特点,共奏活血化瘀,理气止痛,益气之功效。

论文摘要
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  参考文献。
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