肺结核及肺外结核诊断中Tsport检测的作用

　　据我国流行病学调查结果显示 , 因结核病而死亡的人数年均高达 13 万余人 , 主要源于人体感染结核病菌后 , 其会对机体内的多器官组织造成较大伤害 , 且临床症状较为复杂 ,尤其当肺外结核所导致的临床症状不典型或病情呈隐匿性变化时 , 临床漏、误诊率极高 , 故而有必要加大结核病阳性检出率。本院在结核病诊断中 , 采用了 Tsport 法 , 其特异性与灵敏性较高 , 现报告如下。

　　1 资料与方法

　　1. 1一般资料 选取本院 2012 年 10 月 ~2013 年 10 月接收的疑似结核病患者 200 例 , 其中男 152 例 , 女 48 例 , 年龄7~85 岁 , 平均年龄 （48.5±10.4） 岁。表现为不明原因发热 ,但临床症状不明显 , 影像学检查显示正常。其诊断参照患者的临床表现、病原学检查、影像学检查、组织病理学检查结果以及抗痨治疗反应等。

　　1. 2方法 患者分别行 TST 法与 Tsport 法进行检测 , 具体方法如下。① TST 法：选取 0.1 ml 的 PPD（ 内含 5 U 结核菌素 ）行前臂尺侧皮内试验 , 2~3 d 后观察结果 , 硬结直径≥ 10 mm则视为阳性。② Tsport 法 :结核感染 T 细胞检测试剂盒由上海复兴长征医学科学有限公司提供。采集量如下 :>10 岁 ,8 ml静脉血；2~9岁儿童， 4 ml静脉血；<2岁儿童， 2 ml静脉血。

　　分离出外周血单个核细胞 （PBMC）， 将阳性对照物、阴性培养作者单位 :121000 辽宁省锦州市传染病医院结核内二科液、B 抗原滤液培养蛋白 10 以及 A 抗原早期分泌性靶抗原6 分别加入已包被抗 IFN-r 抗体微量板的 4 个孔中 ;将浓度为 2×105的 PBMC 加入 4 个孔中 , 于 CO2培养箱内放置 20 h （37℃环境下 ） ;PBS 溶液经处理后将抗 r 干扰素 （ 碱性磷酸酶标记 ）， 孵育 2 h （ 室温下 ）， PBS 溶液洗脱处理后显色 , 并以 PBS 溶液终止反应 , 而后计算点数 , 当测量孔点数比阴性对照组多出 5 个或是阴性对照组的 2 倍及以上时则视为阳性。

　　1. 3观察指标 观察并对比两种检测方法对结核诊断的特异性、灵敏性、假阴性率以及假阳性率。

　　1. 4统计学方法 采用 SPSS18.0 统计学软件对研究数据进行统计分析。计量资料以均数 ± 标准差 （x-±s） 表示 , 采用t检验 ;计数资料以率 （%） 表示 , 采用χ2检验。P<0.05 表示差异具有统计学意义。

　　2 结果

　　2. 1临床诊断结果 本组 200 例患者共有 62 例患者确诊。包括 53 例肺结核患者和 9 例肺外结核患者。

　　2. 2两种检测方法与最终诊断结果比较 采用两种检测方法后 , Tsport 法诊断肺结核及肺外结核的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数均明显高于 TST 法 , 差异均有统计学意义 （P<0.05）。
　　
　　3 讨论

　　中国是结核菌感染高负担国家 , 患者人数居全球第二位。结核病是一种慢性传染性疾病 , 病原体具有持久性。具体表现为“五多”, 即感染人数多、患病人数多、潜伏感染人数多、新发患者多、死亡人数多。其传染性、潜伏性、难清除性、再活动性、致病复杂性等防治难点使结核病防治成为首要任务。新发结核病例来自潜伏性结核感染人群 , 潜伏性结核感染人群数量巨大。新增活动性结核患者每年约 145 万人。控制活动性结核患者必须通过鉴别“高危人群”“预防性治疗”,“免疫接种”来控制潜伏性结核感染。传统的诊断结核病的方法有很多不足 , 临床实验室最常用的检测手段就是痰标本涂片的抗酸染色、BD-960 结核菌的快速培养及传统 L-J 罗氏培养 （ 罗培 ）、结核抗体检测等。痰涂片阳性检出率低 , 结核抗体检测特异性低 , 敏感度差 , BD-960 结核菌的快速培养与传统培养方法比较虽然缩短了检测时间 , 但其阳性检出率受标本采集等众多因素影响仍然不高。应用结核感染 T 细胞检测技术 , 可提高结核分枝杆菌的阳性率 ,24 h 报告检测结果 , 为临床疾病的准确快速的诊断提供理论依据。Tsport 试验对结核病的早期、快速、准确诊断明显优于 TST, 是特异性和灵敏度高的结核分枝杆菌辅助诊断试验。

　　其检测样本灵活 , 创伤性小 , 可对外周血、胸水、腹水、脑脊液、心包积液等标本进行结核感染 T 检测。可根据样本类型 , 进一步结合影像学检查可对肺外结核进行诊断或者是辅助诊断。对于临床症状不明显和影像学检查显示正常者 , 可通过结核感染 T 细胞检测对潜伏性结核分枝杆菌感染者进行预防性治疗或观察。对儿童结核病进行辅助诊断 , 克服了儿童干咳、无痰 （ 用其他方法几乎无法检测 ） 的弊端等对临床上痊愈的活动性结核病 , 应用 Tsport 技术控制其发生与再发生。本研究结果显示 , 患者行 TST 法与 Tsport 法进行检测后 ,Tsport 法诊断肺结核及肺外结核的灵敏性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、约登指数均明显高于 TST 法 , 差异均有统计学意义 （P<0.05）。

　　综上所述 , Tsport 检测是较灵敏和特异的快速检测结核分枝杆茵感染的方法 , 可用于结核病的快速诊断。对控制活动性结核的发生与再发生、潜伏性结核感染的预防、肺外结核的辅助诊断等具有重要意义。

　　参 考 文 献
　　
　　[1] 肖倩 , 黄旭峰 . T-spot.TB 试验快速检测结核杆菌感染的临床应用研究 . 实验与检验医学 , 2009, 27（3）：272-274.
　　[2] 白旭华 , 霍万学 . 结核杆菌感染 T 细胞介导免疫应答研究的新进展 . 微生物学杂志 , 2012, 32（1）：75-79.
　　[3] 荣兰香 , 马淑红 , 艾清 , 等 . T-spot.TB 试验与 PPD 试验对结核病患者诊断价值相关性比较 . 中国实验诊断学 , 2013, 17（8）：1475-1476.
　　[4] 孟小蓉 , 包勇 . 结核感染 T 细胞检测在结核病合并终末期肾病透析患者中的早期诊断价值 . 中华肺部疾病杂志 （ 电子版 ），2013, 10（3）：129-130.