高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量

　　阿司匹林肠溶片为非甾体类抗炎药，临床可用于抗血栓，也可用于治疗不稳定性心绞痛，是《国家基本药物目录》列入的品种。本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，该方法简单，快速，重现性好，回收率高，可用于该制剂的质量控制。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器：大连依利特 P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号 KQ5200E，功率 200W，频率 40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。

　　1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100113）；阿司匹林肠溶片（亚宝药业太原制药有限公司，批号：131210；石家庄康力药业有限公司，批号：121037；神威药业集团有限公司，批号：1306072），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件：色谱柱为 Hypersil ODS2 柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇∶0.5%乙酸溶液（37∶63）；流速：0.8ml·min-1；柱温：25℃；检测波长：267nm；理论板数按阿司匹林计不得少于 3000。
　　
　　2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置 100ml 量瓶中，加 1%醋酸甲醇溶解并定容制成100μg·ml-1的对照品溶液。

　　供试品溶液的制备：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约 0.03g，精密称定，置 100ml 量瓶中，用 1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。

　　阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。

　　2.3 专属性实验：在“2.1”色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各 10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果显示阿司匹林与其他组分色谱峰可完全分离，且阴性样品无干扰，色谱图见图 1。【图1略】
　　
　　2.4 线性范围：精密吸取对照品溶液（100μg·ml-1）2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml，分别置于 10ml 量瓶中，用 1%醋酸甲醇稀释至刻度，摇匀。浓度分别为 20、40、60、80、100、120 和 150μg·ml-1，在上述色谱条件下分别进样 10μL，测定峰面积 A 积分值，以浓度（Cμg·ml-1）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：A=5.0611C－11.278，r2=0.9991。试验结果表明:阿司匹林在20～150μg·ml-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。

　　2.5 精密度试验：分别精密吸取对照品溶液（100μg·ml-1）和供试品溶液（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）各 10μL，连续进样 6 次，分别测定其峰面积 A，结果对照品溶液 RSD 为1.4%，供试品溶液 RSD 为 1.5%。结果表明：该方法精密度良好，符合含量测定要求。

　　2.6 稳定性试验：取供试品溶液（石家庄康力药业有限公司，批号：121037），分别于 0、2、4、6、8、10h 进样，进样量为 10μL，测定峰面积，RSD 为 1.2%。结果表明：供试品溶液在 10h 内稳定性良好，符合含量测定要求。

　　2.7 重复性试验：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约 0.03g，精密称定，共 6 份，分别按供试品溶液制备方法制备，并测定含量，平均含量，RSD 为 1.1%。结果表明：该方法的重复性好，符合含量测定要求。

　　2.8 加样回收试验：取已知含量的供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）6 份，每份约 0.015g，精密称定，置量瓶中，分别精密加入阿司匹林对照品 3.6、4.5、5.4mg 各两份，按上述供试品溶液制备方法制备，分别测定，计算回收率。结果平均加样回收率为 101.2%，RSD 为 0.94%。结果表明：该方法的准确度良好，符合含量测定要求，见表 1。【表1】

　　
　　2.9 供试品的测定：分别取三个不同批号供试品约 0.03g，各两份，精密称定，按供试品溶液的制备方法制备溶液，分别测定，记录峰面积，计算阿司匹林的含量。供试品标示量均为 25mg/片-1，按照《中国药典》2010 版二部的规定，阿司匹林肠溶片含阿司匹林应为标示量的 95%～105%。结果见表 2。【表2】

　　
　　3 讨 论
　　
　　3.1 提取时间的选择：实验对超声提取的时间进行了考察，比较了 30min、40min、50min 结果，实验结果显示，超声 40min 已基本提取完全，故确定超声提取时间为 40min。

　　3.2 流动相的选择：通过参考文献，比较了不同的流动相：甲醇∶0.5％乙酸溶液（20∶80）、甲醇∶0.2％磷酸溶液（27∶73）、甲醇∶乙腈∶0.7％磷酸溶液（26∶2∶72），结果表明：用甲醇∶0.5％乙酸溶液（37∶63）为流动相保留时间适合，分离效果好。

　　参考文献
　　
　　[1]李克庆.测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量及游离水杨酸[J].中国药师，2006，9（10）：925-927.
　　[2]李飞玲.HPLC 与 UV 法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林及水杨酸含量[J].长治医学院学报，2011，25（1）：11-12.
　　[3]郑凯，潘延宁.高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林含量[J].微生物学杂志，2009，29（1）：110-112.
　　[4]徐新，廖思嘉，廖先智，等，高效液相色谱法测定阿司匹林含量[J].广州化工，2012，40（8）.