第五章 不同品种卡特兰提取效果的比较
5.1 试验材料与方法
5.1.1 试验材料
试验材料为中国林业科学研究院培育的卡特兰品种‘绿晶灵’(Rlc.Village Chief North‘Green Genius’),‘大牛’(Rlc.Pamela Finney ‘Big Cattle’),‘seto’(Rlc.TriumPhal Coronation‘Seto ’),‘杨铭金童’(Rth.Shinfong Little Sun ‘Yong-Min Golden Boy’)。
5.1.2 试验方法
用第三章优化得到的 CTAB 方法对上述材料提取 DNA。
5.2 试验结果与分析
1、2、3、4 号样孔分别是‘绿精灵’,‘杨铭金童’,‘大牛’,‘seto’提取 DNA 得到的电泳图。从电泳图可以看出提取的四个品种的 DNA 质量较好,条带清洗,点样孔处无蛋白质污染,无 DNA 断裂,也没有 RNA 污染(见图 5-2)。
对紫外分光光度数值分析发现 OD260/OD280 都在 1.8 左右,OD260/OD230 都在 2.0左右,其中绿精灵的 OD260/OD280 大于 1.8,OD260/OD230 大于 2,表明 DNA 不含杂质,符合现有一切分子标记技术对 DNA 的要求(见表 5-1)。
5.3 小结
卡特兰品种不同,含有化学物质不同,在提取 DNA 试验过程中有所差异。在提取过程中,‘seto’的 CTAB 溶液显示的颜色带有紫色,而绿精灵等品种都是绿色。不过在最后电泳条带都很清晰,杂质较少,条带很亮,说明 DNA 合格。 紫外分光光度值OD260/OD280 比值均大于 1.8,OD260/OD230 均大于 2 说明 DNA 很纯净。虽然品种不同,提取过程当中有所差异,但是最后都能提取出符合要求的 DNA,只是含量有所差异。
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