高效液相色谱法在中药有效成份分析中的应用,分析化学论文

高效液相色谱法，自上世纪世纪六十年代崛起，经过不断的发展，从理论、实践方面日臻完善，应用范围较广，涉及医药领域、环境保护、生命科学、石化等基础和应用领域。大多数有机化合物可以用HPLC 来分析测定。在药物分析机分离中的应用尤其广泛，发展尤其快速。按分离机理的不同，主要有：吸附色谱法、液-液分配色谱法、离子交换色谱法、分子排阻色谱法、亲和色谱法、手性色谱法等。高效液相色谱法自五年版《中国人民共和国药典》收载以来，在药物分析领域的应用发展迅速，药品质量控制中的作用日益突显，已发展成为一种主流的色谱分析方法。

1 高效液相色谱法在有效成分分析中的应用。

1.1 黄酮类化合物中的应用。

中药的成分复杂多样，多数含有黄酮类化合物，也是天然药物中非常重要的一类化合物，随着黄酮类化合物的广泛研究，其分析和分离的手段不断得到改进，高效液相色谱法在析和分离黄酮类化合物方面的应用也非常广泛。田娜等人采用制备液相色谱法，从荷叶中分离和制备了一类黄酮化合物。方法是采用 60%乙醇回流提取，粗提取液浓缩，以 D-101 柱与聚酰胺色谱分离，后经 SymmetryPrepTMC18 柱分离，采用水-乙腈为流动相，进行梯度洗脱，流速以5ml/min,最后分析出 3 种黄酮类化合物。利用紫外、红外、核磁共振、质谱等分析，确定以上三个化合物分别为紫云英苷、异槲皮苷和金丝桃苷。三种化合物的纯度都达到了 97%以上。其中紫云英苷为首次从荷叶中分离[1].Justesen 等采用液相质谱联用技术对 15 种药材中的黄酮进行了分析和分离，分析发现欧芹的芹菜素含量最高，达到了 510-630mg/100g[2].Chen 等研究漆树黄酮在小鼠体内的代谢，采用 HPLC 分离漆树黄酮及其代谢物，并采用质谱和 HPLC,最终确定了代谢产物的化学结构[3].

1.2 皂苷类化合物中的应用。

皂苷类成分也属于中药中常见的活性成分，多数没有紫外吸收，或者只有末端吸收，易受试剂干扰，因此使用紫外检测法有一定的局限性。采用用高效液相色谱与蒸发光检测器，可以有效检测皂苷类成分。在分析浙麦冬、川麦冬中麦冬皂苷 D 含量的应用较好[4],在对酸枣仁中酸枣仁皂苷的含量测定[5],柴胡中柴胡皂苷的含量测定[6],黄芪中黄芪甲苷的含量测定[7],天麻中天麻苷含量测定[8]都取得很好的分析效果。

2 HPLC-ELSD 在中药分析中的应用。

一方面中药的化学成分很多，结构复杂，其中一些成分不存在紫外吸收，有的只在紫外末端有吸收。另一方面，色谱分离困难和流动相存在干扰，致使紫外检测在定性定量方面的分析有一定的难度。而 ELSD 在一定程度上弥补了此方面的不足，因此应用较广在糖类成分、内酯类成分、皂苷类成分、氨基酸、萜类成分和生物碱类成分等其他成分分析中，得到了较好的分析效果[9].

3 结束语。

中药成分的复杂性和多样性却是现代中药研究者们所头疼的问题，同时也在制约中药制剂的发展和临床上的应用，中药的资源不断地丰富与发展，但质量却远远没有一个科学的量化标准体系，而实现这些就得通过精密的分析和检测手段。作者通过对相关资料的查阅，综述了高效液相色谱法在黄酮、皂苷、糖类等中药化学成分中的分析和分离方面的应用，HPLC 法具有良好的分离性能、选择性好、分析速度快、适用范围广、样品用量少、灵敏度高等诸多优点。

参考文献：

[1]田娜，刘仲华，黄建安，等。高效制备液相色谱法从荷叶中分离制备黄酮类化合物[J].色谱，2007（1）：88-92.

[2]Justesen UJ,knuthsen p.Composition of flavnoids in fresh herbsand calculation of flavonoid intake by use of herbs in traditionalDanish dishes [J].Food chemistry,2001（73）：245-250.

[3]Chen H,Zuo Y G,Deng Y W.Separation and determination offlavonoids and other phenolic compounds in cranberry juice by high-performance liquid chromatography [J].J.Chromatogr.A.2001,913:387-395.

[4]俞建平，马月光，邵建峰，等。ELSD-HPLC 法测定浙麦冬、川麦冬中麦冬皂苷 D 含量的方法研究 [J]. 中药新药与临床药理，2002,13（4）：253.

[5]李会军，李萍。高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷 A 及 B 的含量[J].药物分析杂志，2000,20（2）：82.

[6]陈妍。HPLC-ELSD 法测定柴胡中柴胡皂苷 a、d 的含量[J].天津药学，2002,14（3）：73.

[7]田南卉，杨国红，方颖，等。高效液相色谱-蒸发光散射器测定黄芪甲苷的含量[J].药物分析杂志，2000,20（3）：199.

[8]魏泱，丁明玉，李红霞。高效液相色谱-蒸发光散射和紫外检测法测定天麻中天麻甙含量[J].高等学校化学学报，2001,22（4）：563.

[9]黄永焯，王宁生。HPLC/ELSD 在天然药物分析中的应用[J].中药新药与临床药理，2001,12（6）：444.