推拿对阳虚大鼠模型的干预效果分析

　　阴平阳秘是健康标志，阴阳失调是疾病根源[1].

　　阴阳失调包括天人阴阳失调和人体自身阴阳失调两大类。传统中医在研究人体自身体内阴阳失调方面积累了大量经验，发明了多种治法和方药，而在天人阴阳失调方面，虽然形成了传统中医时间生物学[2],但在治疗上多局限于择时用药和择时针刺[3].廖品东教授根据中医天人合一理论，率先提出"旦助阳暮益阴"治法，并在治疗老年夜间尿频、失眠等[4]

　　方面取得良好的效果。笔者观察了"旦助阳暮益阴"治法指导推拿对阳虚大鼠模型的干预。现报告如下。

　　1实验动物

　　SD大鼠40只，清洁级，体质量200~220g,雌雄各半，检疫合格。

　　2实验方法

　　2.1动物分组[5]随机将其分为：推拿旦助阳暮益阴组（A组）、中药旦助阳暮益阴组（B组）、传统补阳组（C组）和空白对照组（D组）4组，每组10只（考虑意外死亡脱落）.自由饮食，统一编号，单笼词养。

　　2.2动物造模参照刘旭光等[6]"氢考型阳虚造模法":A、B、C3组连续9d于17∶00按5mg/100g体质量给予氢化可的松灌胃，休整3d.大鼠表现为怕冷、耸毛、肢体蜷缩、神疲、反应迟钝、消瘦、皮毛疏松失去光泽等类似阳虚症状[7],提示造模成功。

　　2.3干预方法A组：用胶布固定磁珠于拇指指端，7:00关元穴3揉1振，19:00三阴交穴3揉1振（位置参看林文注《实验针灸学》[8]）.每穴每次3min.
　　
　　B组：7:00灌喂旦丸（附片、桂枝、山药、泽泻等）,19:00灌喂暮丸（枣皮、熟地黄、五味子、牡丹皮等）[9].

　　C组：7:00和19:00分别灌服旦暮混合丸（旦丸与暮丸所有药物混合）各1次，每毫升含0.75g生药，每只大鼠每次灌服1mL.所有药物由中药制剂室提供。D组：不造模，不治疗，早晚灌服蒸溜水1mL.

　　以上各组连续干预14d.

　　2.4检测指标1）体温节律：每日8:00、12:00、16:00、20:00、24:00和次日4:00共6个时间点，用电子体温计从肛门插入直肠内2cm,3min读取读数，精确到0.1℃。2）耐寒能力[10]:末次体温测定完毕1h后，将大鼠逐只放入1000mL容量的广口瓶中，置于-8℃低温冰箱内，记录大鼠自放入冰箱至昏迷与至死亡的时间，计算每组大鼠的平均死亡时间。3）体质量：精密电子秤称重，精确到1g,造模前、造模后和治疗后各测定1次。4）一般情况：包括大鼠精神、活动状态、皮毛色泽、进食量等。

　　2.5数据处理采用SPSS18.0统计软件包。方差齐则采用Dunnett法，方差不齐则采用Tamhane'sT2法。组间比较采用成组t检验。采用kaplan-Meier法对各组大鼠耐寒能力进行分析。体温节律分析采用余弦法。以P<0.05作为差异有统计学意义。

　　3实验结果

　　3.1余弦法分析体温节律见表1.

　　A、B、D组P<0.05,提示节律存在。C组P>0.05,提示体温无节律。C组与其它3组组间比较P<0.05,提示体温节律差异有统计学意义。

　　A、B、D组体温节律曲线非常近似，都与C组明显不同。推拿旦助阳暮益阴A组，基础体温水平最高（见图1）.

　　3.2各组大鼠体质量变化比较结果见表2.

　　造模前各组大鼠体质量比较差异无统计学意义（P>0.05）.造模后A、B、C组大鼠体质量组间比较差异无统计学意义，但与D组比较差异有统计学意义（P<0.05）,说明造模成功。治疗后A、B组与D组比较差异无统计学意义（P>0.05）,表示体质量恢复到正常。虽然C组体质量增加，但与D组比较差异有统计学意义（P<0.05）,说明体质量未恢复到正常。

　　3.3各组冻死时间比较结果见表4.

　　4讨论

　　"旦助阳"指平旦运用助阳的方法助阳以升，"暮益阴"指日西（暮）运用益阴的方法益阴以敛阳，理论上这种方法有益于天人阴阳合一[11],有益于24h内人体阳气的升降出入。从实验结果看，采用旦助阳暮益阴的A、B组，对大鼠日体温节律恢复、体质量增加和耐寒能力提高等方面确实比传统补阳法好。传统补阳法以金匮肾气丸为代表[12],方中既有桂枝、附片、山药、泽泻等补阳药，又有山茱萸、熟地黄、牡丹皮（本实验去茯苓加北五味子）等补阴药，阴中求阳而实现补阳。实验表明虽然它对阳虚大鼠体质量、基础体温和耐寒能力等指标有改善，但阳药与阴药合用，阳药似火，阴药似水，水火互相制约[13-14],定对阳药与阴药的本来效应产生影响。阳药平旦用，阴药日暮用，仍是阳中求阴，阳药与阴药独立成方，没有相互间的干扰而提高了疗效。这是对传统"阴中求阳、阳中求阴"理论的发展，值得临床进一步探索和运用。

　　关于"旦助阳暮益阴"治法在指导内科用药方面，已经有了很多案例[15].导师承担的国家自然科学基金项目更在阳虚与阴虚大鼠模型中得到证实[16].但其是否能在针灸和推拿中运用目前尚无报导。关元之温补[17],三阴交之养阴[18]为学术公认，这一配对符合"旦助阳暮益阴"治法要求，故本实验A组将关元和三阴交配对，平旦振揉关元，日暮振揉三阴交。从实验结果来看，它在对大鼠日体温节律恢复、体质量增加和耐寒能力提高等方面不输给B组和C组，提示："旦助阳暮益阴"治法理论同样可以指导外治法。

　　参考文献：
　　[1]沈耿杨，吴丽丽。"阴平阳秘"之思想探微[J].世界中医药，2012,7（2）:99-101.
　　[2]孙杰，贾玉红，姜妙娜，等。中西医观解读时间生物学[J].现代生物医学进展，2009,9（11）:2194-2196.
　　[3]李振，宁飞，李倩，等。脏时相调法针刺治疗失眠临床观察[J].中国中医药信息杂志，2010,17（5）:69-70.
　　[4]廖品东，陈学先，罗敏，等。旦助阳、暮敛阴治疗老年功能性夜间尿频的临床观察[J].中国中医药信息杂志，2002,9（12）:47-63.
　　[5]刘兆兰，刘宝全，李兰花，等。动态随机分组方法介绍及应用[J].中西医结合学报，2011,9（3）:246-251.
　　[6]刘旭光，宋开源，刘雨星，等。不同时辰针刺对"阴虚"、"阳虚"大鼠体温昼夜节律影响的研究[J].成都中医药大学学报，2004,27（1）:21-23.