苹果绿色防治试验材料与方法

　　2 试验材料和方法

　　2.1 试验时间及地点。

　　本研究中室内试验于 2013-2015 年在河北农业大学植物病害流行与综合防控实验室完成，田间试验是在国家现代苹果产业技术体系河北农业大学苹果病虫害防控试验园内完成。试验用树为 7 年生盆栽苹果树（2008 年定植，品种为"富士",基砧为八棱海棠，中间砧为 SH7），株行距为 0.7m×1m,使用滴灌灌溉，根据果树不同生长时期确定施肥量。所选腐烂病病斑大小相近，主要是发生在苹果树主干上。

　　2.2 试验材料。

　　2.2.1 供试试剂。

　　次氯酸钠，葡萄糖，盐酸，75%酒精等。

　　2.2.2 供试药剂。

　　2.2.3 主要仪器和设备。

　　主要仪器与设备：超净工作台，生化培养箱（SPX105 智能型生化培养箱），冰箱，电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）、湿热灭菌锅、鼓风干燥箱；烧杯、镊子、称量纸、滤纸、自封袋、量筒、移液枪、3WBD 型电动式常量喷雾器、养虫盒、医用 5ml 注射针筒、镊子、保鲜膜；频振式杀虫灯（YH-2 型交流电杀虫灯，北京宏达益德能源科技有限责任公司生产）、游标卡尺、白色粘虫板，水盆，铁丝等。

　　2.3 试验方法。

　　2.3.1 苹果树腐烂病绿色防控试验。

　　试验共设置 3 个绿色防控方法处理、一个常规化学药剂处理（阳性对照），以及 1 个空白对照。每组处理 5 个病斑，重复 3 次，共 70 个病斑。2014 年3 月 28-29 日对病斑进行处理，处理方法如下：

　　将发病苹果树腐烂病病斑用樊式刮刀彻底刮除干净，刮至木质部，边沿超出病斑变色组织 1 cm 以上，然后涂药或包壤土泥，范围超出健皮 2 cm 以上；用宽 10 cm保鲜膜紧密包扎，减少药剂和水分散失，防止包泥脱落。

　　于 2015 年 3 月 29 日调查处理病斑的治愈情况并使用游标卡尺测量形成愈伤组织的宽度。

　　2.3.2 频振式杀虫灯对苹果园害虫诱杀效果研究。

　　于 2014 年生长季 4 月至 9 月在苹果园内悬挂频振式杀虫灯，距地面高 2 m.杀虫灯自带感光元件，可自动开关，亮灯时间约为当日 19:30 至次日早上 5:30.每天上午对杀虫灯诱集的昆虫进行收集、冷冻杀死处理，然后再逐只进行统计调查。

　　通过查找害虫识别图谱，咨询老师同学等方式鉴定所诱昆虫种类，统计数量，分析预测害虫发生情况。

　　由于频振式杀虫灯对诱集到灯周围的昆虫并不能完全有效控制，遗漏的害虫可能会对杀虫灯附近果树危害加重。为增强诱虫效果，在 2014 年 7~8 月前后分别尝试采用悬挂粘虫板和水盆两种方法，来辅助加强对害虫的诱杀作用。

　　悬挂粘虫板：将白色粘虫板悬挂于临近杀虫灯且与灯相同高度的位置，每日统计记录粘虫板上的昆虫量，6 天更换一次粘虫板，共计 5 次。

　　悬挂水盆：在杀虫灯下方约 80cm 处悬挂一个中等大小塑料水盆，加入适量水，并添加少量洗衣粉，以便杀死落入的昆虫。每日统计记录水盆中诱集到的昆虫量，7 天更换一次水，共计 5 次。

　　2.3.3 几种生物农药防治梨网蝽药效试验。

　　本试验于 2014 年 6 月 5-13 日进行，所选试验树为富士品种，6 年生，受梨网蝽危害严重。

　　试验共设 3 个生物药剂处理：1.3%苦参碱水剂、7.5%鱼藤酮水剂、0.3%蛇床子素水剂处理；1 个常规化学药剂--50%氟啶虫胺腈 WG（阳性对照）处理，以及 1个清水对照。每处理 1 株树，3 次重复。全株均匀喷药，至药液形成液滴但不向下流动为度。分别在施药前，施药后 1 d、3 d 以及 7 d 时调查残存梨网蝽活虫数。每株按东、西、南、北、中各固定一根枝条，每根枝条固定调查 5 张叶片。

　　2.3.4 几种生物农药防治黄刺蛾幼虫药效试验。

　　本试验于 2014 年 8 月 12~19 日进行。试验共设 3 个生物药剂，处理分别是 1.3%苦参碱水剂、7.5%鱼藤酮水剂，1.5%除虫菊素 EW,1 个化学药剂阳性对照处理 48%毒死蜱 EC,1 个清水对照。使用喷壶将配好的药液均匀喷在不同树上，至药液形成液滴但不向下流动为度，待药液晾干后各处理分别取适量叶片，置于准备好的饲养盒内。从果园内受害较重的树上收集黄刺蛾幼虫，在养虫盒内饲养。每盒饲喂 30只黄刺蛾幼虫。分别在喂食叶片后 24 h、48 h 和 72 h 后调查残存活虫量，按照 2.3.3公式计算防效。

　　2.3.5 1.3%苦参碱水剂防治桑天牛幼虫药效试验。

　　本试验分别在 2013 年 7~9 月及 2014 年 7~9 月两个时间段内完成。对 1.3%苦参碱水剂设 4 个不同浓度处理：0.43 g/L,0.26 g/L,0.13 g/L,0.065 g/L;77.5%敌敌畏 EC2.58 g/L 处理作为阳性对照，1 个清水对照。

　　在苹果园内选取受到桑天牛幼虫蛀食为害的果树，选择有新鲜木屑样虫粪排出的虫孔，用医用注射针筒将配制好的药液注入，药量为 5 ml.每处理 4 只桑天牛幼虫，重复 3 次。不同农药及施药浓度均悬挂标签进行标记，15 d 后逐日检查防治效果，如连续 3 d 未见新鲜木屑排出，则说明桑天牛幼虫已被杀死，反之则认为未被杀死。按照 2.3.3 公式计算防效。

　　2.3.6 不同防控模式下果树主要害虫与天敌发生动态调查。

　　从 2014 年 5 月至 2014 年 9 月，每隔 10 d,对河北农大苹果试验园内绿色防控和常规防控模式下的苹果树上主要害虫和天敌的种类与数量进行调查。监测绿色防控与常规防控下苹果树体上主要昆虫种类与数量的差异变化情况。

　　调查方法为 5 点取样调查，每点固定选取 5 棵树，共计 25 棵；采取全株调查，调查树体上的主要害虫与天敌种类及数量。

　　2.4 数据处理。

　　试验数据均使用 Microsoft Excel 软件进行处理，用 DPS（Version 7.05）进行统计分析、多重比较，置信度 p=0.05.