杜仲叶绿原酸浸出溶剂筛选

　　2.2 杜仲叶绿原酸浸出溶剂筛选

　　2.2.1 试验材料

　　见附录表 2.36，2.37。

　　2.2.2 试验方法

　　2.2.2.1 浸出溶剂配制

　　试验配制四组绿原酸浸出溶剂：第一组为体积分数 10%到 90%的甲醇溶液各 10mL。第二组，乙醇体积分数从 10 个百分点到 20 个百分点溶液各 10mL。第三组体积分数 10%到 90%的丙酮溶液各 10mL。最后一组为蒸馏水 10mL。

　　2.2.2.2 单因素试验设计

　　取杜仲叶粉末 28 份，每份 0.5g，分别加入上述配制好的不同浓度甲醇、乙醇、丙酮及水溶液，调 pH 为 4，室温浸泡 1.5h，70℃水浴加热 30 分钟，进行单因素试验。因素表如下：

　　2.2.2.3 绿原酸含量测定

　　上述绿原酸提取液冷却后定容到 10mL，滤过、离心，再次定容到 10mL 取上清液 250μL 加水定容到 10mL 待测。记录绿原酸峰面积，代入标准曲线，计算绿原酸得率，最后以绿原酸的得率(绿原酸含量与所用杜仲叶的质量之比)作为评价指标。

　　2.2.3 结果与分析

　　2.2.3.1 检测结果分析

　　由表可知，四种浸出溶剂对杜仲叶绿原酸浸出得率最高的是 40%丙酮溶液，绿原酸得率为 0.9430%。其次是体积分数为 30%乙醇溶液，绿原酸得率为 0.9057%。再次是体积分数为 20%的甲醇溶液，绿原酸得率为 0.8471%。水做浸出溶剂，绿原酸得率为 0.7032%，提取效果不如以上三种有机溶剂好。

　　2.2.3.2 检测结果色谱图分析

　　由于水做杜仲叶绿原酸浸提液，绿原酸得率与其他三种方法相差很大，故舍去。以下是甲醇、乙醇和丙酮各自最适浓度下绿原酸浸提物的色谱图。检测波长 300nm，其它色谱条件同前述 HPLC 检测法。

　　由图可知，检测波长 300nm 时，分别用 20%甲醇，30%乙醇，40%丙酮溶液做杜仲叶绿原酸浸提溶剂时，三种溶剂的浸提物色谱图峰形一致，且绿原酸峰面积占总峰面积百分比依次为 81.583%， 81.168%，80.424%，百分比差异很小。

　　2.2.4 讨论

　　2.2.4.1 浸出溶剂种类与绿原酸得率高低原因分析

　　本试验，水做浸出溶剂，绿原酸得率较低，可能绿原酸在水中发生了水解或异构；40%丙酮溶液做浸出溶剂，绿原酸得率较高，这可能与丙酮和丙酮-水体系对植物多酚具有很强溶解性有关。

　　2.2.4.2 最终选择体积分数为 30%乙醇溶液做浸出溶剂的原因

　　分别用 20%甲醇，30%乙醇，40%丙酮溶液做杜仲叶绿原酸浸提溶剂时，三种浸提物绿原酸定量结果可知，得率最高的是 40%丙酮溶液，其次是 30%乙醇溶液；提取液色谱图分析可知，三种浸提液色谱图峰形一致，且绿原酸峰面积占总峰面积百分比差异很小，说明三种浸提液所含杂质很少且种类一致；考虑到丙酮易挥发，有毒及有害残留，试剂的用量大、价格贵和工业化的可能性小，而乙醇用量相对少，绿原酸得率同丙酮相比相差不多，再加上乙醇相对更安全环保，利于工业化推广等综合因素，确定杜仲叶绿原酸的最佳浸出溶剂为 30%乙醇溶液。

　　2.2.5 小结

　　本试验通过对绿原酸浸出溶剂种类及体积分数筛选，最后得出结论，体积分数 30%的乙醇溶液为杜仲叶绿原酸浸出的最适溶剂。