鬼针草滴眼液对去势雄兔干眼症的治疗效果分析(2)

　　2.3治疗前后及两组间共聚焦显微镜结果

　　正常角膜上皮基底细胞显示为光暗细胞体，窄的细胞边界（附图A）。制作去势雄兔2月的干眼症模型后，角膜上皮基底细胞体积缩小，可见有呈亮光样的炎性细胞浸润（附图B）。经过鬼针草滴眼剂处理2月的B组在上皮基底层可见极少数的炎性细胞浸润，但与正常雄兔基底细胞比较，密度稍有降低（附图D），而经过PBS处理的A组在上皮基底层可见有大量的呈亮光样炎性细胞，上皮基底细胞密度明显增加（附图C）。炎症细胞进行计数发现，经过治疗2月后，A组上皮基底细胞和炎症细胞密度分别为（4084±492）cells/mm2和（324±116）cells/mm2,而B组上皮基底细胞和炎症细胞密度分别为（312和（44±26）cells/mm2,两组比较，差异均有统计学意义（tBC=5.642,tIC=10.467,P<0.05）。见附图E、F.

　　3讨论

　　我国干眼症的发病率逐渐升高并向低龄化发展，而雄激素失调是干眼症主要发病机制之一，它可调节机体及局部的免疫功能，调控泪腺和睑板腺的形态、发育、分化及分泌功能；且对眼的泪液稳定、炎症反应以及细胞凋亡有重要的调节作用。由绝经、衰老、自身免疫性疾病、服用抗雄激素药物等原因引起的雄激素水平下降时，均可导致泪膜不稳定、局部炎症反应和泪腺等腺体组织细胞凋亡加重，最终导致干眼症。

　　眼是性激素作用的靶器官，已证实雄激素、雌激素、孕激素和催乳素受体广泛存在于人、兔和鼠的泪腺、睑板腺、角膜等眼表组织中，雄激素替代药物的意义在于与雄激素受体结合而发挥生物学效应。有研究表明体内睾酮水平与泪液分泌量之间呈正相关[12].此外，雄激素缺乏可促进Sogren综合征的进展，并与泪腺炎症、睑板腺功能异常和重症干眼症有关[13].而雄激素替代疗法是目前此类干眼唯一的对因治疗方法，但长期雄激素应用会造成男性前列腺肥大甚至肿瘤、女性男性化等严重副作用，给患者带来了长期的苦恼。因此，寻找一种行之有效的雄激素替代药物势在必行。黄酮类物质是细胞膜雄激素受体的刺激物，可以与细胞膜雄激素受体结合发挥生物学效应[14].

　　鬼针草为一种厥阴肝经的天然中药，能分离出木犀草素、槲皮素、异槲皮苷、金丝桃苷、芦丁等8种黄酮类物质，含总黄酮4.035%,其化学结构与雄激素结构相似，可以与细胞膜雄激素受体结合发挥生物学效应，起到拟雄激素活性作用，从而改善泪腺、睑板腺的分泌情况，减轻全身和眼局部的自身免疫反应，抑制泪腺和角膜的局部细胞凋亡，最终达到治疗干眼症的目的。此外，鬼针草具有抑菌作用，同时含大量胆碱，可引起流泪，防止干眼患者的眼表状态进一步恶化。MCVEY[15]通过对连续大豆异黄酮灌胃鼠检测研究表明，连续灌胃120d后，异黄酮灌胃鼠睾丸和精液中雄激素含量，与对照组比较均有显着的升高。李桥等[16]发现鬼针草可以用于治疗局部滴用阿托品导致的干眼。利用放射性示踪标记的方法研究表明黄酮类物质是细胞膜雄激素受体的刺激物，可以与细胞膜雄激素受体结合发挥生物学效应[17].笔者前期探讨了密蒙花等其他黄酮类植物雄激素在干眼症作用，本实验研究表明鬼针草滴眼液也可明显改善干眼症状，减少了水煎液的全身副作用，适用于胃肠道吸收不良的患者。实验表明，鬼针草滴眼液在用药2月后可明显改善去势雄兔干眼SIT和改变泪液蛋白成分，PBS治疗则改善不明显，可能的原因是SIT反映泪液基础分泌量，泪液蛋白反映泪液的成分，鬼针草滴眼液主要作用机制可能发挥拟雄激素作用，促进眼睑腺体（睑板腺分泌的脂质层成分和泪腺分泌的泪液）分泌，故可明显改善SIT和部分泪液蛋白的结果。

　　此外，笔者在实验中还发现鬼针草能有效减少雄激素失调性干眼症的炎症细胞浸润和角膜上皮基底细胞萎缩。这可能与鬼针草改善泪腺、睑板腺的分泌情况，抑制角膜的局部细胞凋亡相关。

　　综上所述，对于去势雄兔干眼症，鬼针草滴眼液可较快而明显地改善干眼的症状和维持泪液蛋白成分。它是一种安全有效、给药途径简单、副反应少，患者能长期坚持的治疗干眼的方法，具有广泛临床应用及推广价值。进行临床试验并研究其干预机制，探讨其作用的受体、信号传导途径、调节机制和有关在临床方面的应用，可能为探索抗眼部炎症、新生血管病变与变性性眼病的治疗策略提供新的途径。

　　参考文献：
　　[1]刘超，王传富。NFκ-Bp65-NOS2在去势雄兔角膜，结膜和泪腺中的表达及意义[J].眼科研究，2006,24（1）：81.
　　[2]李教社，赵玉英，李秀兰。鬼针草黄酮类化合物的分离和鉴定[J].药学学报，1996,31（11）：849-854.
　　[3]邵毅，余瑶，黄国栋，等。鬼针草治疗绝经期女性中重度干眼症临床初探[J].中国实用眼科杂志，2012,30（7）：805-810.
　　[4]邵毅，余瑶，黄国栋，等。鬼针草叶治疗更年期女性中重度干眼症临床研究[J].中国中药杂志，2012,37（19）：2985-2989.
　　[5]曹园，瞿慧，姚毅，等。鬼针草化学成分的研究[J].中草药，2013,44（24）：3435-3439.
　　[6]马轶群，王传富，刘美光。去势雄兔干眼病模型角膜上皮细胞橱亡及相关基因表达的研究[J].眼科研究，2004,22（3）：286-289.
　　[7]邵毅，余静，余瑶，等。无缝线骨髓间充质干细胞羊膜移植预防角膜缘干细胞缺乏的实验研究[J].眼科新进展，2013,33（11）：1011-1015.