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滕州市痉挛性咳嗽患儿的百日咳培养

来源:学术堂 作者:韩老师
发布于:2015-05-12 共2369字
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  滕州市瘦挛性咳嗽患儿的病原学分析
  
  咳嗽是人体对呼吸道的分泌物、已经侵入呼吸道的异物,还有渗出物的清除,清除进入人体的有害因子的过程,是一种保护性反射。近年来,痉挛性咳嗽患儿呈上升趋势,研究不同年龄患儿痉挛性咳嗽的病原学,找出其致病因素,从而采取有效的干预措施,对于患儿的治疗和疾病的快速恢复,有很大的价值,可以节约大量医疗资源,做到有的放矢,有很好的经济效益和社会效益。目前,痉挛性咳嗽患儿的治疗研究较多,关于病原学的研究,主要针对百日咳杆菌的研究,而对于痉挛性咳嗽的其他病原的研究较少,没有专门系统研究痉挛性咳嗽的病原学分布情况。美国近几年研究发现,百日咳发病率有上升趋势,考虑与疫苗接种后效果下降有关,并且百日咳治疗周期长,并发症较多,因而预防显得尤为重要,在美国,疾病预防控制中心调整了疫苗接种的时间,增加了青少年及成人高危人群的疫苗接种工作,在美国,百日咳疫苗的接种率很高,美国疾病预防控制中心认为,百日咳是可以通过接种疫苗进行预防的疾病⑴。但国外的研究不适合中国国情,国内的病原学分布及疾病规律与国外有很大的区别。国内在此方面的研究尚存在不足。为了 了解中国百日咳发病情况,为调整疫苗接种工作提供科学依据,中国疾病预防与控制中心在全国进行流行病学调查项目,在山东省及新疆维吾尔自治区两个点进行,其中山东省选择滕州市中心人民医院及莱芜中心医院进行,滕州市中心人民医院儿科负责临床资料收集工作。该项目由山东省疾病预防与控制中心负责,由山东省疾病预防与控制中心提供新鲜羊血制作百曰咳细菌培养基,专门人员已经由山东省疾病预防与控制中心培训3个月,已经工作近1年时间,聚合酶链式反应(PCR)方法查百日咳DNA,由我院收集鼻咽拭子,由山东省疾病预防与控制中心直接检测,百日咳抗体检测由我院进行,山东省疾病预防与控制中心进行督导检查,流行病学调查由滕州市疾病预防与控制中心预防保健科进行。

  本研究采取对滕州市痉挛性咳嗽患儿做病原学分析,包括常规痰培养查细菌,百日咳杆菌培养及多联酶链方法查百日咳抗体及聚合酶链式反应PCR法检测患者鼻咽部分泌物百日咳杆菌DNA,呼吸道病原九项检测抗体IgM,并同时检查血常规、超敏C反应蛋白、胸部正位片、胸部CT、儿童肺功能检测、支气管舒张试验、过敏原检测、呼出气一氧化氮(NO)检测等,以求找出疾病的病因,并对不同年龄段的患儿病原学进行分析,找出各年龄段病原分布特点及规律,为治疗提供可靠的依据。

  对象与方法
  
  1.1对象
  
  选取滕州市2013-11月至2014-9月以痉挛性咳嗽为主要临床表现的患儿152例,其中男86例,女66例,年龄1月一 12岁,进行病原学检测,同时检查血常规、超敏C反应蛋白、胸部正位片、胸部CT、儿童肺功能检测、支气管舒张试验、过敏原检测、呼出气一氧化氮(NO)检测等,其中5月以下52例,5月一5岁74例,5岁以上26例。痉挛性咳嗽标准为阵发的、成串的、接连不断的咳嗽。选取对照组85例患儿,为非疫挛性咳嗽,与痉挛性咳嗽不同,为单声或不连续咳嗽,由有经验医师决定入组标准,同时进行病原学检查,以及其他检查,需要进行的检查种类由医师决定,并取得家人的同意。由于百白破(白喉类毒素、百日咳菌苗、破伤风类毒素)疫苗接种为生后3个月幵始初种、每月1次、共3次,5月后结束疫苗接种,5岁后抗体滴度低于保护水平,因而将患儿分为5个月以下、5月一5岁、5岁以上3个组,百日咳菌苗为无细胞菌苗。百日咳诊断标准:1、临床表现为痉挛性咳嗽,2、实验室检查:PCR方法检测百円咳DNA阳性或血清学检测百日咳IgM阳性。

  1.2方法:

  1.2.1痰细菌培养:就诊当日对患儿进行深部吸痰做常规细菌培养,患儿入院后先由经验丰富的护士进行深部吸痰处理,进行痰培养,然后进行治疗。

  1.2.2百日咳奸菌培养:用专用鼻咽拭子釆集棉棒,由经过专门培训的医师对患儿采集鼻咽拭子,采集部位为鼻后部1/3处,鼻腔内侧,由山东省疾病预防控制中心提供新鲜羊血配制培养基,做百日咳杆菌培养。

  1.2.3多联酶链反应检测百日咳抗体IgM、IgG.此项工作由专人进行,抽血当天进行检测,人员已经在山东省疾病预防控制中心实验室进行专业培训。

  1.2.4分子生物学检测:聚合酶链式反应PCR法检测患者鼻咽部分泌物百日咳杆菌DNA,由我院专人采集标本,由山东省疾病预防控制中心进行检测,标本同时进行百日咳杆菌培养。该方法敏感、特异,有确诊意义。1.2.5呼吸道九项病原检测:就诊当日抽取静脉血,用间接免疫突光法检测嗜肺军团菌、q热立克次体、腺病毒、肺炎支原体、甲型流感病毒、呼吸道合胞病毒、乙型流感病毒、肺炎衣原体、副流感病毒等抗体IgM,试剂由西班牙VIRCELL公司提供,郑州安图代理。

  1.2.6血常规检测:包括血常规、白细胞总数、淋巴细胞数、中性粒细胞数、超敏C反应蛋白。

  1.2.7胸部正位片、胸部CT等:部分有发热的患儿,咳嗽症状重,需要做胸部正位片、胸部CT
  
  1.2.8儿童肺功能检查:部分患儿仅表现为痉挛性咳嗽,无其他表现,咳嗽时间较长,做儿童肺功能检查,查FEVi (-秒钟用力呼气容积)、PEF (呼气峰值流速)。支气管舒张试验:患儿肺功能检查出现异常时,可以进行支气管舒张试验,试剂为葛兰素史克生产的万托林气雾剂(沙丁胺醇)60楸/支,先进行患儿的肺通气功能检测,测定FEVi值,吸入万托林气雾剂200微克,等待15分钟再测FEVi的数值大小,改善率大于20%为支气管舒张试验阳性。

  1.2.9过敏原检测:对部分疫宁性咳嗽、长期咳嗽患儿,考虑有过敏性咳嗽、咳嗽变异性哮喘的患儿,对其做过敏原检测,采用皮内法(用丹麦埃克瑞公司生产的皮肤点刺液进行20种试剂皮肤点刺试验,包括屋尘螨、粉尘螨等,用生理盐水为阴性对照,组胺为阳性对照,++以上为阳性),抽血查吸入及食物组过敏原,及血总IgE.

  1.2.10呼出气一氧化氮(NO)测定:在潮气状态下取患儿的呼出气,测定患儿的一氧化氮,大于年龄+8为阳性结果,阳性代表气道高反应性,存在咳嗽变异性哮喘的可能。

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